介孔分子筛Ti-KIT-1的后合成法合成、表征与催化性能

以纯硅介孔分子筛KIT-1为载体,钛酸四丁酯为钛源,分别采用浸渍法、接枝法、胶体法3种后合成法合成了含钛介孔分子筛Ti-KIT-1。利用FT IR、DRS、XRD、N2吸附-脱附等温线、化学分析法等手段对样品进行了表征,并在温和条件下考察了Ti-KIT-1对苯羟化反应的催化性能。实验结果表明:Ti-KIT-1仍保持完好的介孔结构,但其比表面积、孔容有所降低。3种后合成法合成的钛硅分子筛骨架中存在四配位钛,且以接枝法样品中钛的掺杂量最多,表现出比其他两种样品更好的催化活性。

用于黄曲霉毒素B_(1)快速检测的胶体金试剂盒质量评价

为评估黄曲霉毒素B_(1)(aflatoxin B_(1),AFB_(1))胶体金快速检测试剂盒性能,对6个胶体金快速检测试剂盒生产厂家的产品进行质量评价。以大豆油为基质,通过人为加入标准物质的方法制备盲样,对6个生产厂家的试剂盒组成、前处理过程、显色情况、性能指标、检测时间等进行评价,并将其用于国家及河南省抽检食用油样品的检测。结果表明,6个生产厂家的试剂盒组成完整,前处理快速,易操作,检测时间短(均在25 min以内),但合格率仅50%,有3个生产厂家的试剂盒因较高的假阴性率而不达标。由此可知,质量优良的快速检测试剂盒能很好地满足实际样品检测需求,但目前市场上的快速检测试剂盒整体质量还有待提升,生产企业应严格按照国家相关标准进行研发和生产,同时国家相关部门要继续完善评价体系,加强监管。

氟虫腈和水胺硫磷胶体金试剂盒性能考察与分析

研究市面上3个厂家的氟虫腈和水胺硫磷胶体金试剂盒在不同基质中的应用效果,考察其产品的准确度和灵敏度、特异性、假阴性率和假阳性率。结果表明,3个厂家的氟虫腈和水胺硫磷胶体金试剂盒的灵敏度和准确度较高,符合说明书要求;交叉反应结果均为阴性,表明其特异性良好;空白基质加标检测结果与加标情况一致,表明其假阴性率和假阳性率为0。这说明3个厂家的氟虫腈和水胺硫磷胶体金试剂盒检测结果准确、可靠,可以广泛推广应用。

基于机器视觉的胶体金试剂盒质量检测方法

抗原检测试剂盒(胶体金法)是一种新型冠状病毒核酸检测的补充检测方法,具有操作便捷、检测速度快的优点,因此,实现胶体金试剂盒批量自动化生产对于有效的疫情防控具有重要意义。切条检测算法、装条检测算法和压盖检测算法是实现自动化生产的关键一环。所提出的视觉检测方法已在实际项目中得到应用和验证,并可在确保产品质量的前提下,有效提高生产效率,大幅降低人力成本。

血吸虫病快速诊断试剂盒的优化及其应用

目的 对血吸虫病胶体染料试纸条诊断试剂盒 (DDIA Kit)的检测方法作进一步优化并对其应用价值进行评价。方法 采用专用仪器定量制备 DDIA试纸条 ,以定量的抗原和染料进行标记。分别对 2 0、10、5 μl和 2 .5 μl的血清样本进行检测 ,将各组的敏感性、特异性和交叉反应性进行比较。再以确定的最适血清样本量对一血吸虫病低度流行区的自然人群进行筛查并与粪检结果比较 ,评价其应用价值。结果 用 2 0μl血清样本检测时 ,急性和慢性血吸虫病人的检出率均达到 10 0 %(2 4/2 4和 48/4 8) ,健康人的假阳性率为 8.0 % (8/10 0 ) ,与肝吸虫病人和肺吸虫病人的交叉反应率分别为 2 0 .0 % (4 /2 0 )和 65 .0 % (13 /2 0 ) ;用 10 μl样本血清检测时 ,急性血吸虫病人检出率为 10 0 %(2 4/2 4) ,慢性血吸虫病人的检出率为 97.9% (4 7/4 8) ,健康人的假阳性率为 2 .0 % (2 /10 0 ) ,与肝吸虫病人和肺吸虫病人的交叉反应率分别 10 .0 % (2 /2 0 )和 5 0 .0 % (10 /2 0 )。对低流行区的筛查结果表明 ,DDIA与 18例粪检阳性者的阳性符合率为 94.4% (17/18) ,与 44 5例粪检阴性者的阴性符合率为 87.4% (3 89/4 45 )。结论 定量制备的 DDIA试剂盒在检测血清量为 10μl时有较高的敏感性和特异性 。

鸡新城疫免疫胶体金诊断技术的研究

为了建立一种快速、简便的检测鸡新城疫病毒(NDV)的胶体金免疫层析法(GICA),采用柠檬酸钠还原法制备胶体金颗粒,标记纯化的ND抗体,并包被在玻璃纤维素膜上,另外将纯化的ND抗体和纯化的兔抗鸡抗体包被在硝酸纤维素膜上,组装成ND快速检测试纸条.用本试验研制的ND快速检测试纸条检测收集的24份样品,其结果与HA结果一致,符合率100%;当病毒HA效价在1∶40以上时,试纸条均能检测为阳性;ND快速检测试纸条与已知的马立克病(MD)病料和鸡传染性法氏囊病(IBD)病料的上清液无交叉反应出现,且保存6个月后重复性100%.试验证明,建立的GICA是一种快速、灵敏、特异的抗原检测方法,可用于鸡新城疫诊断,具有广泛应用价值.

破伤风抗体胶体金检测试剂盒的研制

目的 研制破伤风抗体胶体金检测试剂盒。方法 应用胶体金免疫斑点法研制破伤风抗体胶体金检测试剂盒,并对破伤风类毒素免疫的豚鼠及人血清的破伤风抗体水平进行测定。结果 该试剂盒所测定的结果与小鼠体内法的相关性好(r>0.95,P=0.25),远优于目前使用的间接血凝法(r<0.10);且该试剂盒的灵敏度较小鼠法高1倍,特异性强,无交叉反应,精密准确。结论 可用于临床检测患者创伤后的血清破伤风抗体水平。

胶体金法检测结核抗体的临床价值探讨

目的探讨结核抗体在活动性肺结核中的诊断价值。方法分为活动性肺结核组、非结核疾病组和健康组三组,活动性肺结核组分为痰阳组和痰阴组。均采用胶体金法检测结核抗体。结果计算灵敏度、特异度、假阳性率、假阴性率、约登指数、粗一致性、阳性预测值、阴性预测值8项。痰阳组结核抗体阳性率74.5%,痰阴组阳性率56.0%,P<0.01。结论胶体金法结核抗体在诊断活动性肺结核时有一定参考价值,也可以用于非结核患者和健康体检的初步筛查。

唾液中HIV抗体快速检测诊断胶体金免疫层析试纸条的研制

制备一种适于早期HIV的大范围筛查使用的检测人唾液中抗HIV-1抗体的胶体金免疫层析试纸条.采用柠檬酸三钠还原法制备直径为19nm的胶体金颗粒,标记HIV-1gp41抗原,制备胶体金免疫复合物,按常规组装成免疫层析检测试纸条.结果表明:阳性HIV患者唾液中的抗HIV抗体与测试条上金标记物结合后沿着硝酸纤维素膜移动,与膜上的固相抗原结合形成肉眼可见的红色圆点.胶体金颗粒粒径均一,胶体金免疫复合物性能稳定,特异性强,试纸条检测时间只需10～20min.制备的胶体金免疫层析试纸条检测唾液中HIV抗体,使用安全,简便快速,结果准确,适用于基层医疗单位使用和对大量人群的规模筛查等.

免疫胶体金法检测磺胺甲噁唑残留的研究

应用胶体金免疫层析技术（GICA）进行磺胺甲嗯唑（SMZ）的残留检测研究。制备抗磺胺甲嗯唑多克隆抗体，并采用柠檬酸三钠法制备20nm胶体金颗粒。胶体金标记多抗后喷涂到玻璃纤维膜上，特异性抗原（SMZ-OVA）以线状包被在硝酸纤维素膜上，制成快速检测试纸条。滴加检测溶液后，若呈现一条红色条带则为阴性，无红色条带则为阳性。该方法对SMZ标准溶液的灵敏度达到50ng／mL，试纸条显色结果清晰，反应灵敏，整个检测反应在5～10min内完成，稳定性及重复性良好。

艾滋病合并分枝杆菌感染患者分枝杆菌菌种鉴定

目的：对艾滋病合并分枝杆菌感染患者菌株标本进行菌种鉴定，评价MPB64抗原胶体金法快速检测试剂盒鉴别分枝杆菌的价值。方法：对艾滋病患者临床标本中培养出的140株分枝杆菌菌株用16SrDNA测序的方法进行菌种鉴定，分析艾滋病患者中常见非结核性分枝杆菌（NTM）菌种，同时对这些标本用MPB64抗原免疫胶体金法进行菌株鉴定，分析后者的敏感性和特异性。结果：以16SrDNA测序结果为金标准，MPB64抗原胶体金法快速检测区分结核分枝杆菌（MTB）与NTM的敏感性和特异性分别为96．00％和96．84％。共有114份标本（114／140，81．43％）获得明确鉴定结果，其中50份（43．86％）为MTB，63份标本（55．26％）鉴定为NTM。最常见的NTM菌种为戈登分枝杆菌、鸟分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌。结论：MPB64抗原胶体金法检测分枝杆菌菌种具有较好的特异性，且快速、经济、简便，适合用于临床对MTB及NTM的初步鉴别。艾滋病合并结核患者中NTM的比例较高，需进行菌种鉴定以指导临床治疗。

沙眼衣原体取样方法改良对提高其检出率的效果探讨

目的探讨沙眼衣原体取样的改良对提高其检出率的效果。方法同时对疑似沙眼衣原体感染的187例男性患者作沙眼衣原体检测,一组按试剂说明书上的方法取样本(普通组),另一组在原有取材基础上加上精液沉淀物作为样本(改良组)。两组分别采用沙眼衣原体快速检测抗原试剂盒(胶体金法)、酶联免疫吸附试验、快速免疫诊断法进行检测。结果普通组上述3种方法检测沙眼衣原体的阳性率分别为5.35%、3.74%和3.21%,改良组的阳性率分别为6.95%、4.28%和6.42%。两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论沙眼衣原体男性尿道拭子联合尿液沉淀物加精液沉淀物检出率高于普通取样方法。

淋巴显象剂硫化锑胶体冻干药盒的研制

９９ｍＴｃ标记的硫化锑胶体是目前性能最优的淋巴显象剂，但因无标记药盒供应，使推广应用受限。我们研制了一种硫化锑胶体冻干药盒，有效保存期达一年以上，复溶性能良好，颗粒均匀（２０～４０ｎｍ），标记率约９４％，标记稳定性大于２４小时。经临床试用，其淋巴显象效果良好。

人心脏型脂肪酸结合蛋白检测试剂盒的临床评价

目的评价人心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)检测试剂盒(胶体金法)在急性心肌梗死(AMI)诊断中的价值。方法采用平行、盲法、对照的对比试验设计,比较其试验产品和对比产品对诊断AMI的敏感性、特异性、准确性。结果共测定240份临床血液标本。试验产品和对比产品的阳性符合率为100%,阴性符合率为96.15%,总符合率为97.92%。对比产品和试验产品结果不一致的5例标本以临床诊断结果为标准进行验证后,试验产品与临床诊断结果的阳性符合率为100%,总符合率为100%。采用Kappa检验考核两种产品测定结果的一致性,Kappa指数为0.958。经McNamara's test分析,两产品之间无差异,χ2=3.20,P>0.05。结论试验产品显示出较好的诊断价值,可以作为AMI早期诊断标志物,试验产品与对比产品等效。

SPA金标试纸与MPAIA试剂盒检测日本血吸虫病血清抗体应用方向探讨

目的评价SPA金标试纸条和MPAIA试剂盒检测日本血吸虫病血清抗体的应用效果,并探讨其应用方向。方法使用SPA金标试纸和MPAIA试剂盒检测376例日本血吸虫病患者血清、100例健康人血清及120例蠕虫病患者血清,对检测结果进行分析、比较。结果 SPA金标试纸条灵敏度为95.21%(359/376),特异度为97.00%(97/100),MPAIA试剂盒灵敏度为97.61%(367/376),特异度为100%(100/100);两者检测结果差别无统计学意义(日本血吸虫病患者:χ2=2.23,P>0.05;健康人:χ2=0,P>0.05),且呈高度一致(kappa=0.88);SPA金标试纸交叉反应率为7.5%(9/120),MPAIA试剂盒仅为2.5%(3/120)。结论 SPA金标试纸和MPAIA试剂盒均可作为理想的日本血吸虫病诊断试剂;前者操作简便、反应迅速、利于基层及普查使用;后者准确性较高,更适于临床确诊及鉴别诊断。

HSA微胶粒(SAA)药盒的制备及其^(99)Tc^m标记

用生理盐水将20%医用人血清白蛋白(HSA)静脉注射液稀释后,在碱性条件下加热制备HSA微胶粒(SAA),冻干制成药盒;电镜检查显示得到了粒径<80nm的SAA,颗粒范围适合于骨髓、淋巴和炎症显像。用Na99TcmO4溶液对药盒进行标记,标记率>99%,并可稳定至标记后4h。小鼠生物分布结果提示,99Tcm-SAA主要从肾脏排泄,60min时肝、脾和肾放射性较高;家兔显像结果显示给药后30～60min骨髓可以清晰显影。该SAA药盒标记方法简单,质量稳定,骨髓摄取率高,有望成为一种新的胶体显像剂。

人巨细胞病毒pp150-pp65蛋白的表达与应用

目的构建并表达人巨细胞病毒(HCMV)pp150-pp65蛋白,将纯化的重组蛋白制备成胶体金试剂盒对其抗原性进行评价。方法采用PCR方法扩增HCMV pp150-pp65基因片段,连接到原核表达载体pET28a进行表达并纯化,采用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定,并与北京英诺特生物技术有限公司合作研制出巨细胞IgG/IgM抗体联合检测试剂盒(胶体金法),与进口试剂盒(酶免法)进行临床标本比对试验。结果成功构建了HCMV的高效表达载体pET28a-pp150-pp65,并得到分子量在45kd的高表达蛋白,具有良好的抗原性。将该蛋白制备成胶体金试剂盒,经600份血清标本的检测,与进口CMV-IgG试剂盒进行比对,本试剂盒的阳性符合率和阴性符合率分别为92.7%和83.1%,总的符合率为90.2%;与进口CMV-IgM试剂盒进行比对,本试剂盒的阳性符合率和阴性符合率分别为88.1%和89.2%,总的符合率为88.5%,稳定性良好。结论高效表达纯化的pp150-pp65重组蛋白抗原性强,利用其建立的胶体金试剂盒与国产已上市试剂盒和进口试剂盒比对,不仅具有较高的灵敏度和特异性,而且经初步临床应用,表明该试剂盒能检测不同临床感染阶段的患者,具有较好的市场前景。

特异、快速、简便、经济的淋病检测试剂盒的研制

本研究成功地制备了多株淋球菌主要外膜蛋白的单抗，并以胶体金标记。制备兔抗外膜蛋白多抗。在硝酸纤维素膜条上打点包被多抗，加经处理的被检样品和胶体金标记的单抗，直接显色。与细菌培养法一同检测标本312例，两法检测结果符合率力99．36％。结果表明两者特异性、灵敏度基本一致，本试剂稳定性、重复性好，且操作简便，不用仪器，15分钟内即可得到结果。本研究具有很高的特异性和灵敏度，结果适用于快速临床检测。

囊虫IgG胶体金诊断试剂盒(层析法)的研制和考核

目的 在国内外率先开发成功用于囊虫病诊断的IgG金标层析法 (一步法 )诊断试剂盒。方法 采用独特制备猪囊尾蚴囊液抗原的方法 ;先进制备胶金试剂盒工艺并以比利时提供的囊虫IgG试剂盒 (ELISA)做参照。 结果 产品经中国药品生物制品检定所检定合格。对试剂盒的特异性、敏感性进行了临床考核。其敏感性为 93 .2 3 % ,特异性为 97.3 7% ,该试剂盒检测包虫血清的交叉反应率为 4 5 .0 0 % ,与血吸虫、肝吸虫、肺吸虫等寄生虫病人血清无交叉反应。结论 该试剂盒敏感性、特异性良好 ,操作简单、快速 ,结果判读容易 ,特别适用于基层和现场应用。

酶联免疫吸附试剂盒与免疫金标快速检测试纸检测PRRS抗体的比较

应用美国IDEXX公司生产的PRRS抗体ELISA试剂盒和PRRS抗体免疫金标试纸同时检测12份猪血清,阳性率均为41.67％(5/12)。二种试剂都具有微量、特异、准确的优点。前者需要有酶标仪等仪器,试验时间长,成本高,但能用准确的数字表达抗体水平;后者不需要特殊仪器设备,试验时间短,成本低,适用于基层兽医站、养猪场使用。