结肠癌患者血清Dermokine-β检测方法的建立及临床意义

目的建立血清Dermokine-β(DK-β)实验检测方法,研究结肠癌患者血清DK-β含量变化及意义。方法用ELISA法检测结肠癌患者血清DK-β含量,对不同结肠癌患者、结肠炎患者以及健康对照者血清DK-β含量进行比较,对不同结肠癌组织学分类中各组间血清DK-β含量进行比较,对不同结肠癌Dukes临床分期间血清DK-β含量进行比较,并进行统计学分析。结果结肠癌患者血清DK-β含量比结肠炎患者以及健康对照者都要显著性升高(P<0.01),结肠癌患者血清DK-β含量在不同组织学分类间比较差异无统计学意义(P>0.05),结肠癌患者血清DK-β含量在DukesA期最高(P<0.01),当疾病进展至DukesB期和DukesC期下降,到DukesD期又升高(P<0.01),而DukesB期和DukesC期无显著性差异(P>0.05)。结论血清DK-β含量变化与结肠癌患者黏膜上皮细胞受损密切相关,结肠癌患者血清DK-β含量呈显著升高,随着对DK特异性和敏感性的研究不断深入,DK-β将有可能成为结肠癌早期诊断、预后及评价疗效的新的指标。

我国消化道早癌筛查的挑战和展望

我国是消化道肿瘤高发国家,以胃癌、食管癌和结肠癌为代表的三大消化道肿瘤严重威胁着我国人民的健康水平,也造成了沉重的医疗负担。本文从近年来国家颁布的相关政策入手,分别针对胃癌、食管癌、结肠癌和胰腺癌的筛查流程加以评述,评估胃癌的血清胃蛋白酶原联合胃泌素检测、结肠癌的粪便和血液基因检测、胰腺癌的" 血清液体活组织检查 "等新技术对早癌的筛查效果,并提出消化道早癌筛查工作现阶段存在的困难和挑战。通过回顾和展望,进一步明确了推动消化道早癌筛查行动和研究对于降低我国消化道肿瘤病死率的重要意义。

结肠癌患者血清中microRNA-183及胸苷激酶1的表达及意义

目的检测结肠癌患者血清中mi RNA-183及胸苷激酶1(TK1)的表达并探讨其临床意义。方法收集结肠癌患者及健康体检者血清标本各52例,荧光定量PCR检测mi RNA-183表达,免疫印迹增强化学发光法检测TK1的表达,分析两者之间的相关性及与临床病理的关系。结果与正常对照组相比,结肠癌患者血清mi R-183的表达相对升高(P<0.01);中低分化腺癌者血清mi R-183的表达量高于高分化腺癌(P<0.01);Ⅲ~Ⅳ期结肠癌者血清中mi R-183的表达量高于Ⅰ~Ⅱ期(P<0.01),且在有淋巴结转移的患者中表达较高(P<0.01);受试者工作特征(ROC)曲线显示,以相对表达量1.15为临界点,血清mi R-183可能具有诊断结肠癌的价值,其敏感度为78.8%,特异度为67.3%,阳性预测值为78.9%,阴性预测值为70.2%。结肠癌患者血清中TK1的表达也较正常对照组升高,中低分化腺癌高于高分化腺癌(P<0.05),Ⅲ~Ⅳ期高于Ⅰ~Ⅱ期(P<0.01)。血清中mi R-183与TK1的表达呈正相关(rs=0.692,P<0.01)。结论血清中mi R-183及TK1可能是早期结肠癌的诊断标志物,并可用于判断肿瘤的恶性程度及预后。

结肠癌干细胞样细胞的体外培养、鉴定及n-3多不饱和脂肪酸对结肠癌干细胞样细胞的抗增殖作用

目的:采取无血清培养法培养出SW620细胞球,并对细胞球细胞进行干细胞鉴定;在细胞水平研究n-3多不饱和脂肪酸(n-3 PUFAs)对结肠癌干细胞样细胞的作用。方法:正常培养人结肠癌细胞株SW620并使其逐步适应无血清培养条件,经无血清培养1周后收集SW620细胞球。用免疫荧光法检测胚胎干细胞标志物SSEA-1和TRA-1-81;采用real-time PCR的方法检测干细胞相关基因Sox-2和Oct-4的表达情况;对比SW620贴壁细胞和干细胞样细胞(CSCLC)在软琼脂上的克隆形成能力;采用裸鼠移植瘤模型比较2种细胞的成瘤能力;用MTS法对比2种细胞在递增浓度的5-氟尿嘧啶(5-FU)或mitomycin C处理下的生长抑制情况;用MTS法、Annexin V/PI染色和台盼蓝染色分别观察递增浓度二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA)作用于SW620 CSCLC后细胞生长抑制情况、凋亡情况和死亡情况;MTS法检测5-FU或mitomycin C联合n-3 PUFAs对结肠癌CSCLC增殖的影响。结果:无血清培养法成功从SW620中培养出细胞球。细胞球细胞高表达SSEA-1和TRA-1-81并一过性表达Sox-2和Oct-4基因;对5-FU及mitomycin C相对抵抗;在软琼脂上克隆形成率及在裸鼠皮下的成瘤率均显著高于贴壁细胞,表明这些细胞具有干细胞特性,即为来自于SW620的CSCLC。DHA和(或)EPA作用于SW620CSCLC能抑制细胞生长、诱导细胞凋亡,并能增强5-FU及mitomycin C对其抑制作用。结论:无血清培养法能够从SW620细胞中培养出具有干细胞特性的细胞,它们具有高克隆形成能力及高致瘤性,对化疗药物相对抗拒;DHA和EPA能够诱导SW620来源CSCLC发生凋亡并增强化疗药物的抗肿瘤活性。

64排多层螺旋CT和血清淀粉样蛋白A联合评估结肠癌对手术方案选择的影响

目的探讨64排多层螺旋CT(MSCT)和血清淀粉样蛋白A(SAA)联合术前评估结肠癌的临床价值和对手术方案选择的影响。方法前瞻性纳入2007年11月至2008年11月期间于四川大学华西医院肛肠外科住院的110例结肠癌患者,随机均分为MSCT+SAA组和MSCT组,MSCT+SAA组术前行MSCT和SAA联合评估,MSCT组只进行MSCT评估,将术前分期和预测手术方案分别与术后病理分期和实际手术方案比较。结果本研究实际纳入病例99例,MSCT+SAA组49例,MSCT组50例,2组基线情况一致。MSCT+SAA组的术前T、N、M及TNM分期的准确度分别为81.6%、79.6%、100%及77.6%;MSCT组的术前T、N、M及TNM分期的准确度分别为82.0%、60.0%、98.0%及62.0%。MSCT+SAA组和MSCT组在N分期之间的差异有统计学意义(χ2=4.498,P=0.034)。MSCT+SAA组手术方案的预测符合率为95.9%(47/49),MSCT组手术方案的预测符合率为82.0%(41/50),2组间预测符合率差异具有统计学意义(χ2=4.854,P=0.028)。结肠癌手术方案选择与多种临床病理因素如术前N分期(P=0.008)、术前M分期(P=0.010)、术前TNM分期(P=0.009)和SAA水平(P=0.004)有关。结论MSCT和SAA联合评估结肠癌患者的策略可以提高术前分期的准确性,并且提高肛肠外科医师预测手术方案的符合率。

结肠癌Caco-2细胞株无血清培养技术研究

目的探索人结肠癌Caco-2细胞株肿瘤干细胞的分选方法。方法应用无血清悬浮培养法培养Caco-2细胞,产生肿瘤细胞球,并对肿瘤细胞球从形态学、分化、自我更新及交替培养等方面进行鉴定。结果 Caco-2细胞在无血清培养基(SFM)中可存活,24 h后可产生少量体积较小松散的悬浮肿瘤球,肿瘤球体积随时间延长而增大;将肿瘤球接种于完全培养基中12 h后细胞贴壁生长,细胞形态与传统培养形成的单细胞层无明显差异,重新消化贴壁细胞后再次悬于SFM中24～72 h后仍可形成悬浮细胞球,其形态与原代相同。结论结肠癌Caco-2细胞在SFM中可生成悬浮肿瘤细胞球,采用无血清悬浮培养法可达到富集肿瘤干细胞的目的。

术前血清白蛋白水平与结肠癌临床病理特征及生存预后的关系

目的探讨结肠癌患者术前血清白蛋白水平的临床意义及其与预后的关系。方法回顾性分析2000年1月至2008年12月间河南省肿瘤医院收治的621例结肠癌患者的临床病理资料。以血清白蛋白35g／L为标准，将患者分为低白蛋白组及正常组。分析白蛋白水平与患者临床病理特征的关系，并用Kaplan—Meier法和Logrank检验进行生存分析．应用Cox回归模型分析本组患者的预后影响因素。结果低白蛋白组67例（10．8％），术前血清白蛋白水平与肿瘤浸润深度（x2=35．609，P=0．000）、淋巴结转移（x2=8．110，P=0．004）、远处转移（x2=9．064，P=0．003）及肿瘤TNM分期（x2=23．070，P=0．000）有关，而与年龄、性别、肿瘤大体分型、组织分型和组织分化程度无关（均P〉0．05）。低白蛋白组和正常组的5年总生存率分别为55．2％和66．1％，差异有统计学意义（P=0．025）。单因素分析结果显示，年龄（P=0．000）、大体分型（P=0．014）、分化程度（P=0．014）、浸润深度（P=0．000）、淋巴结转移（P=0．001）、远处转移（P=0．000）、TNM分期（P=0．000）、手术方式（P=O．000）和术前血清白蛋白水平（P=0．032）与结肠癌患者总生存率有关。多因素Cox回归分析显示，术前血清白蛋白水平可独立预测结肠癌患者的总生存率（HR：0．694，95％CI：0．492～0．980，P=0．038），白蛋白水平较高提示患者预后较好。结论术前血清白蛋白水平是结肠癌预后的独立预测因素。白蛋白水平低提示患者较差的临床病理情况及预后。

血清白蛋白对结肠癌患者手术后预后的影响

目的:研究结肠癌患者术前血清白蛋白的临床意义以及其对术后预后的影响。方法:回顾性分析2008年3月~2012年12月期间我院收治的326例结肠癌患者的临床资料。以血清白蛋白35g/L为界限,将患者分为正常组及低白蛋白组。分析血清白蛋白水平与患者临床病理特征的相关性,并用Cox回归模型分析结肠癌患者预后的影响因素。结果:低白蛋白血症与结肠癌肿瘤部位、分化程度、TNM分期及浸润深度相关,并随着分化程度、TNM分期及浸润深度的进展其发生率明显增高;TNM分期、肿瘤浸润深度以及术前低白蛋白水平为结肠癌患者的独立预后因素;术前血清白蛋白水平正常患者3、5年生存率分别为75.6%、63.7%;低白蛋白血症患者3、5年生存率分别为61.4%、53.9%,差异比较有统计学意义。结论:术前血清白蛋白水平与结肠癌肿瘤部位、分化程度、TNM分期及浸润深度相关,也是结肠癌患者术后的独立预后因素。

无血清培养人结肠癌球囊样细胞生物学特性研究

目的采用无血清培养方法从人结肠癌细胞株中分选出富含肿瘤干细胞的球囊样细胞，并分析其增殖和迁移特性。方法人结肠癌细胞株HCTll6、HT29细胞在特殊配制的无血清培养基（SFM）中悬浮培养，观察球囊样细胞的生成。流式细胞仪检测结肠癌干细胞分子标记CDl33表达，利用CCK一8比色法以及Transwell小室法研究结肠癌球囊样细胞的增殖情况和迁移能力。采用成组设计资料的t检验分析检测数据。结果HCTl16、HT29细胞在SFM培养条件下可以获得可稳定传代的球囊样细胞，SFM培养下HCTll6球囊样细胞CDl33阳性细胞占75．44％±11．41％，HT29球囊样细胞CDl33阳性细胞占76．22％±14．23％。与常规含血清培养基（SSM）培养的同系细胞比较，HCTll6及HT29球囊样细胞中结肠癌干细胞分子标记CDl33阳性细胞数明显增多（t：11．43，9．17，P〈0．05），其持续增殖能力和运动迁移能力均增强。结论无血清培养获得的结肠癌球囊样细胞高表达结肠癌干细胞分子标记CDl33，且具有更强的增殖和迁移能力。它可作为进一步研究结肠癌干细胞的良好模型。

多层螺旋CT联合血清淀粉样蛋白A对结肠癌术前分期诊断价值的随机对照研究

目的:探讨64排多层螺旋CT(MSCT)联合血清淀粉样蛋白A(SAA)在结肠癌术前分期中的临床应用价值。方法:110例结肠癌患者,随机分为A组(55例)和B组(55例),A组术前行MSCT和SAA联合评估,B组只进行MSCT评估,比较术前分期与术后病理分期。结果:实际纳入病例99例,A组49例,B组50例,2组基线情况一致。A组的术前T、N、M及TNM分期的准确度分别为81.6%、79.6%、100%及77.6%;而B组准确度分别为82.0%、60.0%、98.0%及62.0%。两组在N分期之间的差异有统计学意义,χ2=4.498,P=0.034。结论:MSCT和SAA联合术前分期评估结肠癌患者的策略可以提高术前分期的准确性。

结肠癌细胞球高耐药性及其相关蛋白RAD51和BRCA1的表达

目的:探讨结肠癌HCT116和SW480细胞球的高耐药性与同源重组中心分子RAD51和人乳腺癌易感基因1(breast cancer susceptibility gene1,BRCA1)表达的关系。方法:通过无血清悬浮培养获得结肠癌HCT116和SW480细胞球,应用FCM法检测HCT116和SW480细胞球及单层细胞中肿瘤干细胞标志物CD133+细胞的含量。不同浓度的5-氟尿嘧啶(5-luorouracil,5-Fu)和奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)单独或联合干预HCT116和SW480细胞球和单层细胞后,采用CCK-8法检测细胞的增殖并计算各药物的半数抑制浓度(halfinhibitory concentration,IC50),FCM法检测细胞的凋亡率,免疫荧光及蛋白质印迹法检测细胞中RAD51和BRCA1的表达。结果:HCT116和SW480细胞在含生长因子的无血清培养液中形成可稳定传代的肿瘤细胞球,并且细胞球中CD133+细胞含量显著高于单层细胞(P<0.01)。相同浓度药物干预后,肿瘤细胞球与单层细胞相比细胞生存率更高而凋亡率更低,各药物作用HCT116和SW480细胞球的IC50值显著高于单层细胞(P均<0.01)。不同化疗药物干预后,HCT116和SW480细胞球及单层细胞中RAD51和BRCA1的表达水平均上调;相同药物干预后,HCT116和SW480细胞球中RAD51和BRCA1的表达水平均高于单层细胞(P<0.05)。结论:结肠癌HCT116和SW480细胞球耐药性明显高于普通单层细胞,RAD51和BRCA1可能参与了结肠癌细胞球的高耐药性。

XELOX方案与FOLFOX4方案治疗结肠癌效果及对血清肿瘤标志物和细胞学指标的影响

目的比较XELOX(奥沙利铂+卡培他滨)方案与FOLFOX4(奥沙利铂+亚叶酸钙+氟尿嘧啶)方案治疗结肠癌效果和对血清肿瘤标志物及细胞学指标的影响。方法选取安徽省芜湖市中医院2016年1月至2019年1月收治的84例结肠癌患者,按照随机数字表法分为观察组(XELOX方案,42例)和对照组(FOLFOX4方案,42例)。比较两组患者疗效、不良反应及化疗前后血清肿瘤标志物与细胞学指标的变化。结果观察组近期有效率为76.19%(32/42),对照组为61.91%(26/42),差异无统计学意义(χ^(2)=2.005,P=0.156)。观察组不良反应发生率为35.71%(15/42),低于对照组的59.53%(25/42)(χ^(2)=4.773,P=0.029)。两组治疗前糖类抗原19-9(CA19-9)、大肠癌特异性抗原2(CCSA-2)、骨桥素(OPN)水平比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);两组治疗后CA19-9、CCSA-2、OPN水平较治疗前均降低(均P<0.05);治疗后观察组CA19-9、CCSA-2、OPN水平均低于对照组(均P<0.05)。两组治疗前中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)、红细胞分布宽度(RDW)比较,差异均无统计学意义(均P>0.05);两组治疗后NLR、PLR、RDW较治疗前均降低(均P<0.05);治疗后观察组NLR、PLR、RDW均低于对照组(均P<0.05)。观察组治疗1、2、3年复发率分别为4.76%(2/42)、14.26%(6/42)、19.05%(8/42),对照组分别为11.90%(5/42)、21.43%(9/42)、26.19%(11/42),两组差异均无统计学意义(均P>0.05);观察组治疗1、2、3年总生存率分别为92.86%(39/42)、78.57%(33/42)、71.43%(30/42),对照组分别为85.71%(36/42)、69.05%(29/42)、64.28%(27/42),两组差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论XELOX方案与FOLFOX方案治疗结肠癌的近期及远期疗效均相当,均可降低患者血清肿瘤标志物及细胞学指标水平,改善患者预后,其中XELOX方案不良反应少。

CRP、SAA、CEA、CA242、CA50联合检测对结肠癌的诊断价值

目的探讨分析炎症因子C反应蛋白(CRP)、淀粉样蛋白A(SAA)联合癌胚抗原(CEA)、糖类抗原242(CA242)、糖类抗原50(CA50)检测对结肠癌的诊断价值。方法收集中国科学院大学附属肿瘤医院2019年1月至6月177例首诊结肠癌患者、74例结肠息肉患者和58例健康体检者分为结肠癌组、结肠息肉组和健康对照组,分析各组CRP、SAA、CEA、CA242、CA50水平并计算其诊断结肠癌的效率,比较不同分期结肠癌的相应水平。结果结肠癌组CRP、SAA、CEA、CA242、CA50水平较结肠息肉组、健康对照组明显升高(P<0.05);结肠息肉组CRP、SAA、CEA水平较健康对照组明显升高(P<0.05)。CRP、SAA、CEA、CA242、CA50联合诊断结肠癌的AUC为0.818,灵敏度和特异度均高于单独检测。Ⅳ期结肠癌CRP、SAA、CEA、CA242、CA50水平较0~Ⅲ期明显增高(P<0.05)。结论炎症因子CRP、SAA联合CEA、CA242、CA50可以提高结肠癌的诊断效率,并有助于结肠癌病情的判断,尤其对伴远处转移的Ⅳ期结肠癌的诊断意义较大。

结肠癌患者术前血清间皮素水平表达的临床意义

目的探讨结肠癌患者术前血清间皮素水平表达差异。方法选取2014年3月-2016年6月本院收治的首次诊断为早期结肠癌患者125例（病例组）和健康者75例（对照组）。酶联免疫吸附法法检测病例组术前和对照组体检时血清间皮素水平。采用受试者工作曲线分析血清问皮素对结肠癌的诊断价值；Kaplan．Meier法和Log—rank检验分析生存资料。结果对照组血清问皮素水平显著低于病例组[分别为（0．91±0．80）pg／ml和（7．63±3．25）pg/ml，t=17．57，P〈0．001]。病例组肿瘤大小、TNM分期、浸润深度、淋巴结转移、远端转移患者的血清问皮素水平差异均有统计学意义（均P〈0．05）。术前血清问皮素预测结肠癌的最佳诊断界值为2．36pg／ml，术前血清间皮素预测结肠癌进展的最佳诊断界值为8．62pg／ml。以临界值8．62pg/ml将125例结肠癌患者分为低血清间皮素组（n=56，间皮素≤8．62pg／m1）和高血清间皮素组（n=69，间皮素≥8．62pg／m1），两组生存期比较差异有统计学意义（t=36．01，P〈0．001）。结论间皮素可能是潜在诊断结肠癌及其进展的血清生物标志物。