地黄低聚糖对快速老化模型小鼠造血功能的影响

目的：研究地黄低聚糖（ＲＧＯＳ）对快速老化模型小鼠（ＳＡＭＰ８）造血功能的影响。方法：采用造血祖细胞体外克隆培养等实验血液学方法。结果：ＲＧＯＳ１０，２０ｍｇ·ｋｇ－１可使ＳＡＭＰ８小鼠的ＣＦＵ－Ｓ、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－Ｅ和ＢＦＵ－Ｅ明显增多，并可使外周血中降低的ＷＢＣ数明显增加。提示ＲＧＯＳ可刺激ＳＡＭＰ８小鼠造血干细胞、祖细胞的增殖分化。集落刺激活性实验显示ＲＧＯＳ可使小鼠体内的集落刺激因子产生明显增多。小鼠骨髓组织学研究结果也进一步证实了ＲＧＯＳ增强ＳＡＭＰ８小鼠造血功能的作用。结论：ＲＧＯＳ可以增强ＳＡＭＰ８小鼠的造血功能。

人参总皂甙诱导人内皮细胞和单核细胞表达GM-CSF的实验研究

目的:研究人参总皂甙(TSPG)对人内皮细胞和单核细胞表达粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的影响,及其与人粒单系血细胞发生调控的关系。方法:采用造血祖细胞体外培养、造血生长因子生物学活性检测、免疫细胞化学和核酸分子原位杂交等技术,检测内皮细胞和单核细胞中GM-CSF的表达。结果:经TSPG诱导制备的内皮细胞和单核细胞条件培养液中富含GM-CSF样活性,能显著促进人粒单系造血祖细胞的增殖分化;TSPG能显著促进内皮细胞与单核细胞的GM-CSF蛋白和mRNA表达。结论:TSPG可能通过直接和间接途径促进造血诱导微环境中的内皮细胞和单核细胞合成和分泌GM-CSF,进而促进血细胞生成。

当归补血汤及其组成药味的含药血清对造血祖细胞(CFUGM)的影响

当归补血汤水煎剂（归∶芪＝１∶５）６．６、１３．２、１９．８ｇ生药／ｋｇｉｇ小鼠１次，１小时后采集腹主动脉的血清０．４ｍｌ，加入小鼠造血祖细胞体外培养体系中培养６天，观察对ＣＦＵＧＭ的影响。结果随给药剂量的增加ＣＦＵＧＭ集落数增多，其量效方程为ｙ＝－９８．９３＋１５９．６６ｌｏｇｘ，最低起效量为４．１７ｇ饮片／ｋｇ。拆方研究表明促进ＣＦＵＧＭ增生功效的顺序是当归１．３２ｇ／ｍｌ＞当归０．２２ｇ／ｍｌ≥当归补血汤１．３２ｇ／ｍｌ＞对照≈黄芪１．１０ｇ／ｍｌ＞黄芪１．３２ｇ／ｍｌ。

黄芪对辐射小鼠造血功能的影响

结果表明黄芪能促进造血干细胞的增殖和向红系与粒系细胞分化，但对外周血血小板却无明显影响。

重型再生障碍性贫血患者免疫抑制治疗后骨髓造血祖细胞水平的变化及其意义

为更好地评价重型再生障碍性贫血(SAA)患者免疫抑制治疗(IST)后骨髓造血功能恢复程度,采用造血祖细胞体外培养技术,动态观察了48例接受IBT的SAA患者及20例正常对照者骨髓晚期红系爆式集落形成单位(mBFU-E)及粒-巨噬系集落形成单位(CFU-GM)的水平变化。结果表明,IST前所有SAA患者骨髓mBFU-E及CFU-GM水平均显著低于正常对照组(P<0.001);IST后1年,29例有效者骨髓mBFU-E及CFU-GM水平显著增高,增高程度与其临床疗效相关;12例mBFU-E及10例CFU-GM水平恢复正常,其中8例患者mBFU-E及CFU-GM水平同时恢复正常。这表明SAA确是一组异质性疾病,其造血功能衰竭与异常免疫关系密切,若去除这种异常,造血功能可获得部分甚至完全重建。

巨噬细胞p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路促进抗结核菌感染作用

目的研究p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路在抗结核分枝杆菌感染中的作用。方法通过流式细胞仪检测肺组织中p38 MAPK磷酸化水平;蛋白印迹法检测小鼠骨髓来源的巨噬细胞在H37Ra刺激下p38 MAPK的磷酸化水平;用p38 MAPK特异性抑制剂SB203580抑制巨噬细胞中p38MAPK活性后,检测H37Ra感染不同小鼠巨噬细胞后细胞内结核菌的存活率,同时利用qRT-PCR检测H37Ra感染不同小鼠巨噬细胞的细胞因子表达水平。结果 H37Ra雾化的小鼠肺组织中p38 MAPK的磷酸化水平显著高于PBS组(t=5.493,P=0.0006);与空白对照组相比,在H37Ra刺激下,巨噬细胞中p38MAPK的磷酸化水平逐渐增加;用p38 MAPK特异性抑制剂SB203580抑制p38 MAPK活性后,巨噬细胞内H37Ra的存活率显著增加(t=3.674,P=0.0213),H37Ra诱导的巨噬细胞中IL-6(t=9.789、P=0.0006)、TNF-α(t=5.735,P=0.0046)和IL-1β(t=9.311,P=0.0007)的表达水平也明显降低。结论巨噬细胞中p38 MAPK信号通路可能增强机体的抗结核菌感染作用。

低能量激光对人胎肝造血细胞的增殖作用

低能量激光对生物体具有刺激作用。经Ar^+激光波长514.5nm照射后的人胎肝造血细胞,可以在体外培养体系中分裂增殖,造血细胞集落明显增多。用激光照射产生集落刺激因子(CSF)的细胞,可以提高CSF的活性,在造血细胞体外培养体系中,使用该CSF,也能明显地提高造血细胞集落的形成率。用激光技术来处理造血细胞,可以成倍地提高细胞产率。这一技术不仅有理论意义而且有实用价值。

当归补血汤及其服药后血清对小鼠造血祖细胞的影响

当归补血汤煎液()对小鼠粒系—巨系造血祖细胞(CFU-GM)的生长有抑制作用,剂量越大,抑制作用越强。当归补血汤口饲小鼠后的含药血清()对CFU-GM的生长有明显的激活作用,剂量越大,CFU-GM集落生长的越多。药在相同含药血清浓度下,从时—效关系求出当归补血汤的药效动力学参数,Ke=0.3961/h,T1/2(Ke)=2.1602h,Ka=1.3422/h,T1/2(Ka)=1.6057h,Tp=1.5978h,Td=14.8019h。

小鼠巨噬细胞吞噬马尔尼菲青霉酵母相细胞的实验观察

目的探讨小鼠腹腔巨噬细胞对马尔尼菲青霉酵母相细胞的影响,为研究抗马尔尼菲青霉的免疫机制提供一定的实验依据。方法将马尔尼菲青霉酵母相细胞与小鼠腹腔巨噬细胞在体内和体外两种方式下进行共培养,分别于60min、120min、240min和360min后进行菌落形成单位(CFU)计数,统计分析体内组与体外组CFU数结果的差异性。利用钙荧光白染色巨噬细胞胞内的马尔尼菲青霉酵母相细胞,荧光显微镜下观察细胞形态特征的变化。结果经体内和体外两种方式共培养,两组之间的CFU计数差异无统计学意义,但两组内不同时间点的CFU计数差异存在统计学意义。荧光显微镜下可见巨噬细胞内的酵母细胞被钙荧光白染上淡蓝色荧光。结论小鼠腹腔巨噬细胞在体内、外对马尔尼菲青霉酵母相细胞不起明显的杀灭或溶解作用,其最大的吞噬时间为共培养240min。钙荧光白染色可快速有效的区分巨噬细胞与真菌,是一种良好的检测真菌方法。

成骨生长肽促进实验性再生障碍性贫血小鼠造血的恢复

目的 研究人工合成成骨生长肽(sOGP)对实验性再生障碍性贫血(EAA)小鼠造血功能恢复的促进作 用。方法BALB／C小鼠辐射5Gy后,尾静脉输注DBA／2小鼠混合淋巴细胞1×105个／鼠,建立EAA动物模 型。造模次日始腹腔注射sOGP共12d,每天分别为0.05、0.5、5.0 nmol／鼠,共3个剂量组,第14天杀鼠检测体 重、脾重、血常规、骨髓有核细胞数(BMNCs)、骨髓涂片及胸骨切片等,并作粒细胞-巨噬细胞集落形成单位(CFU -GM)培养。结果 骨髓涂片与胸骨切片中均可见随着sOGP治疗剂量的增高,骨髓增生逐渐有所恢复;各组 CFU-GM增殖能力则表现出显著差别,治疗效果与剂量有明显的正相关线性关系。结论 sOGP可有效促进 EAA小鼠造血功能的恢复,其作用环节可能位于干细胞或其上游水平,提示sOGP在促进造血恢复方面的潜在 前景。

不同部位的巨噬细胞培养上清液对小鼠红系血细胞发生的影响

目的:探讨腹腔、肺泡和肝脏的巨噬细胞培养上清液对小鼠早期红系造血祖细胞[用红系爆式集落形成单位(BFU-E)表示]和晚期红系造血祖细胞[用晚期红系集落形成单位(CFU-E)表示]发生的影响。方法:采用造血祖细胞体外培养技术观察3种不同部位的巨噬细胞培养上清液对BFU-E和CFU-E集落数的影响。结果与结论:3种培养上清液均能促进BFU-E和CFU-E的分化与增殖,而肺泡巨噬细胞培养上清液的上述作用更明显。

四物汤及各单味药的含药血清对粒系-巨系造血祖细胞集落(CFU-GM)的影响

目的 :研究四物汤及各单味药对粒系 -巨系造血祖细胞集落 (CFU - GM)的影响 ,更近于真实地反映药物在体内作用的实际情况 ,以进一步探讨四物汤补血作用的配伍机制。方法 :采用血清药理学体外实验法。结果 :四物汤能明显促进造血祖细胞的增殖 ,单味药当归的作用最强 ,单味药熟地黄、川芎的作用也较正常对照组有增强趋势 ,而单味药白芍对 CFU - GM的增殖似无作用。几种受试药的作用强弱顺序可排列如下 :当归 >四物汤 >川芎 >熟地黄 >白芍。结论 :上述结果提示在促进 CFU - GM的增殖方面 ,四物汤的生血补血作用源于当归 ,川芎与熟地黄似有一定的协同作用 ,而白芍不表现协同作用。

Rhodamine123介导的光动力学疗法对小鼠淋巴细胞增殖及骨髓干祖细胞集落形成的影响

目的 探讨Rhodamine12 3(Rh12 3)介导的光动力学疗法对小鼠淋巴细胞增殖及骨髓干祖细胞集落形成的影响。方法 以C5 7B/ 6小鼠为供鼠 ,BALB/c小鼠为受鼠 ,脾脏淋巴细胞混合培养 ,比较单纯Rh12 3、单纯激光照射、光动力学疗法对小鼠混合淋巴细胞增殖 (MTT法 )及骨髓粒单核巨噬细胞集落形成 (CFU -GM)的影响 (甲基纤维素培养基法 ) ;流式细胞仪检测混合淋巴细胞中CD3+ CD6 9+ 阳性率。结果 Rh12 3组及单纯激光组对细胞增殖无显著影响 ,光动力学组 2 0mW/cm2 以下剂量激光对细胞增殖无明显影响 ,30mW/cm2 以上明显抑制细胞增殖 ;30mW/cm2 以下剂量对CFU -GM集落无明显影响。光动力学疗法后细胞培养 2 4h ,CD3+ CD6 9+ 表达明显下降。结论 光动力学疗法在 30mW/cm2 激光照射时可抑制淋巴细胞增殖 ,降低早期活化T细胞表达 ,但不影响骨髓CFU

肺泡巨噬细胞培养上清液对小鼠粒-单系造血祖细胞和造血干细胞的影响

目的:观察肺泡巨噬细胞培养上清液(AM_(?)S)对粒-单系造血祖细胞(CTU-GM)和造血干细胞的影响。方法:采用脾集落形成和造血祖细胞体外培养技术。结果:AM__(?)S 对 CFU-GM 的增殖具有双向调控作用,即低浓度有促进作用,高浓度有抑制作用,但它对 CFU-S 无明显影响。结论:AM_(?)S 中含有粒-单系集落刺激因子(CSF-GM)和前列腺素样活性物质,这些物质浓度的变化可以调控 CFU-GM 的增殖,大肠杆菌脂多糖(LPS)可以促进肺泡巨噬细胞分泌这些生物活性物质。

裂变中子照射狗血清集落刺激因子的变化

利用体外半固体琼脂培养骨髓粒单系祖细胞的方法测定狗血清中集落刺激因子(CSF)活力。狗受1.3、1.7和2.0Gy裂变中子照射后1～15d,受照射动物血清CSF持续上升。2.0Gy照射动物死前血清CSF活力可为照射前7～20倍。1.3Gy及1.7Gy照射活存狗照射后13～30d CSF活力直线下降。γ线3.5和2.5Gy照射狗早期血清中CSF活力变动呈波动性,5～10d后持续上升的幅度也不如中子照射动物。 实验结果证明,血清CSF活力和外周血白细胞数的变化呈负相关。本文对中子照射动物血清CSF活力升高的机理和CSF在中子照射动物造血恢复中的意义进行了探讨。

BXSB狼疮鼠骨髓粒-巨噬细胞集落形成单位异常与发病的关系

目的 :研究 BXSB自发性狼疮鼠骨髓粒 -巨噬细胞系的增殖情况与狼疮发病的关系。方法 :雄性 BXSB小鼠按 4、 8、 12、 16及 2 0周龄分组 ,每组 6只 ,采用甲基纤维素半固体培养方法体外培养骨髓单个核细胞(BMMC) ,计数粒 -巨噬细胞集落形成单位 (CFU - GM)及小鼠外周血单核细胞 (PBMC) ,并检测尿蛋白。相同周龄的 C5 7BL小鼠作为正常对照组。结果 :12周龄雄性 BXSB小鼠尿蛋白 (+) ,2 0周龄时尿蛋白 ( ) ,4、 8周龄 BXSB小鼠及各周龄 C5 7BL小鼠尿蛋白 (- )。 8周龄雄性 BXSB小鼠骨髓 CFU - GM为 (96 .0 0± 18.11) / 2×10 5BMMC,PBMC计数为 (111.33± 10 .97)× 10 6· L- 1 ,均明显高于 4周龄 BXSB小鼠及正常 C5 7BL 小鼠(P<0 .0 5 ) ,随着周龄增加 ,CFU- GM和 PBMC进一步增多。结论 :BXSB小鼠粒 -巨噬细胞系造血异常及外周血单核细胞增多参与了自身免疫疾病的发病过程。

有机锗对粒-巨噬集落形成细胞的作用

利用体外琼脂半固体培养体系探索了有机锗(Ge-132)对粒—巨噬集落形成细胞(CFC-GM)的作用。结果表明,体系中无集落刺激因子时(CSF),Ge-132不能刺激CFC-GM形成集落。若体系中有CSF,则Ge-132不能增加CFU-GM的集落数量,二者无协同作用。把Ge-132加入到含肺组织的双层培养体系中,则发现它能显著地促进CFC-GM集落的形成,而Ge-132对含其他组织的双层培养体系无此现象。提示Ge-132刺激了肺组织的某些细胞(内皮细胞或者是巨噬细胞),产生活性的集落刺激因子而促进CFU-GM集落的形成。

牛膝精对辐照小鼠粒-单系造血功能的影响

目的探讨牛膝精(Extract of Achynanthis Bidentatae,ABE)对辐照小鼠粒-单系造血功能的影响及作用机制。方法采用造血祖细胞体外培养和体内扩散盒植入技术,观察牛膝精对辐照小鼠外周血白细胞(white blood cell,WBC)、骨髓有核细胞(bone marrow cell,BMC)及其分裂指数和骨髓粒-单系造血祖细胞(colony forming unit-granulocyte/macrophage,CFU-GM)的影响。结果辐照用药组(50mg/l、100mg/l、200mg/l)的WBC、BMC总数均较辐照对照组(0mg/l)明显提高,体内培养的CFU-GM产率也明显高于辐照对照组,而体外培养未显示刺激活性。结论牛膝精可刺激体内粒-单系造血祖细胞的分化与增植。对骨髓具有保护作用。

光卟啉-光照选择性杀灭白血病细胞株K_(562)的研究

为研究光卟啉（ＹＨＰＤ）加光照对白血病细胞株Ｋ５６２的杀伤作用及对正常造血祖细胞的影响，通过细胞体外液体培养活细胞计数、体外半固体培养集落测定，以探讨该法用于体外净化自体移植骨髓中残留的白血病细胞的可能性。观察不同光敏剂剂量和光照时间的变化对杀伤白血病细胞作用的影响，结果表明，单用ＹＨＰＤ或单独日光荧光照射对Ｋ５６２细胞和正常人造血祖细胞均无明显杀伤作用。二者联合使用表现光敏效应。细胞存活率的对数与ＹＨＰＤ剂量、光照时间呈线性相关。ＹＨＰＤ加光照对Ｋ５６２细胞具有强大杀伤作用，对正常造血祖细胞影响较小，在能够杀伤白血病细胞大于５个对数级，其体外已不能形成集落的情况下，正常人骨髓－巨噬细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）尚有１５．９７％。

重组血小板生成素对再生障碍性贫血患者巨核祖细胞的作用

应用重组血小板生成素(rTpo)对17例再生障碍性贫血(AA)患者进行CFU-MK和CFU-GM培养。研究结果表明:①Tpo 10ng/ml为CFU-MK培养的最佳浓度;②AA患者CFU-GM和CFU-MK增殖均明显低于正常人,P<0.001;③AA患者CFU-MK增殖较CFU-GM更低(CFU-MKx 3.2,CFU-GMx 17.5);④Tpo对骨髓小剂量照射后CFU-MK的增殖有促进恢复,对血小板的减少起到积极预防作用。