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全人源化抗结肠癌单链抗体基因的克隆和表达
被引量:
5
1
作者
朱建高
李官成
+5 位作者
李跃辉
胡锦跃
周国华
胡志伟
孙去病
李小玲
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第5期526-530,共5页
分离大肠癌患者外周血单个核细胞 (PBMC) ,在体外用灭活的大肠癌细胞再次致敏后 ,经EBV转化 ,然后用有限稀释法克隆分泌抗大肠癌细胞抗体的B细胞 ;多次PCR扩增和克隆其抗体可变区基因 (VH VLcDNA) ,并用编码 (Gly4Ser) 3 的互补序列连接...
分离大肠癌患者外周血单个核细胞 (PBMC) ,在体外用灭活的大肠癌细胞再次致敏后 ,经EBV转化 ,然后用有限稀释法克隆分泌抗大肠癌细胞抗体的B细胞 ;多次PCR扩增和克隆其抗体可变区基因 (VH VLcDNA) ,并用编码 (Gly4Ser) 3 的互补序列连接成ScFvcDNA(VH linker VL) ,经酶切克隆入载体fUSE 5RF ,使之呈现于噬菌体表面。通过用 3轮肿瘤细胞和正常人PBMC淘选后 ,ELISA检测 80 %的单克隆噬菌体抗体显示了很强的阳性反应。以上结果初步说明 :联合应用体外致敏、EBV转化。
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关键词
大肠癌
噬菌体呈现
人源化单链抗体
ebv
经
体外致敏
聚合酶链反应
基因克隆
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职称材料
题名
全人源化抗结肠癌单链抗体基因的克隆和表达
被引量:
5
1
作者
朱建高
李官成
李跃辉
胡锦跃
周国华
胡志伟
孙去病
李小玲
机构
湖南医科大学肿瘤研究所
出处
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第5期526-530,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目 (3990 0 14 1)&&
文摘
分离大肠癌患者外周血单个核细胞 (PBMC) ,在体外用灭活的大肠癌细胞再次致敏后 ,经EBV转化 ,然后用有限稀释法克隆分泌抗大肠癌细胞抗体的B细胞 ;多次PCR扩增和克隆其抗体可变区基因 (VH VLcDNA) ,并用编码 (Gly4Ser) 3 的互补序列连接成ScFvcDNA(VH linker VL) ,经酶切克隆入载体fUSE 5RF ,使之呈现于噬菌体表面。通过用 3轮肿瘤细胞和正常人PBMC淘选后 ,ELISA检测 80 %的单克隆噬菌体抗体显示了很强的阳性反应。以上结果初步说明 :联合应用体外致敏、EBV转化。
关键词
大肠癌
噬菌体呈现
人源化单链抗体
ebv
经
体外致敏
聚合酶链反应
基因克隆
Keywords
colorectal carcinoma
,
phage display
,
single
\
\|chain
fv
molecule
,
ebv transformation
,
in vitro immunization
,
polymerase chain reaction
分类号
R735.3 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
全人源化抗结肠癌单链抗体基因的克隆和表达
朱建高
李官成
李跃辉
胡锦跃
周国华
胡志伟
孙去病
李小玲
《生物工程学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001
5
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参考文献
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