黄芪葛根配伍对糖尿病大鼠脂肪组织AMPK信号通路的影响

目的探讨黄芪与葛根配伍对糖尿病脂肪中腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)信号通路的作用,明确其调控血糖血脂机制。方法将86只SPF级SD雄性大鼠按照随机数字表分成6组:正常组、模型组、金芪降糖组、黄芪组、葛根组、黄芪葛根配伍组,正常组11只,其余各组15只大鼠。一次性腹腔注射2%STZ(46 mg/kg)造模,同日各组分别予金芪降糖混悬液1.47 g/kg、黄芪2.7 g/kg、葛根1.35 g/kg、黄芪葛根汤4.05 g/kg灌胃,给药30 d。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测脂联素(APN)、葡萄糖转运体4(GLUT-4),实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)检测脂联素受体1(AdipoR1)、脂联素受体2(AdipoR2)、AMPK、GLUT-4、过氧化物酶增殖体激活受体-α(PPARα)、PPARγmRNA。结果与正常组比较,模型组大鼠APN、GLUT-4水平降低,AdipoR1、AdipoR2、AMPK、GLUT-4、PPARα、PPARγmRNA表达减少(P<0.05)。黄芪、黄芪与葛根配伍能升高模型大鼠APN、GLUT-4水平(P<0.05);黄芪、葛根及两药配伍能增加AdipoR1(葛根、黄芪与葛根配伍除外)、AdipoR2、AMPK、PPARα(葛根除外)、PPARγ、GLUT-4mRNA表达(P<0.05),黄芪促进AdipoR2、PPARαmRNA表达的作用优于两药合用,黄芪与葛根配伍调节AMPK、PPARγ、GLUT-4mRNA表达的作用优于单一用药(P<0.05)。结论黄芪、葛根及其配伍调节血糖血脂与调控糖尿病大鼠脂肪组织AMPK信号通路有关,黄芪葛根配伍调控血糖、血脂作用优于单一用药,可能与其促进APN、AMPK、GLUT-4、PPARγmRNA表达有关。

黄芪葛根配伍对糖尿病大鼠脂肪组织胰岛素信号通路的影响

目的探讨黄芪葛根配伍对糖尿病大鼠脂肪组织胰岛素信号通路的影响,明确其对血糖调控机制。方法将86只大鼠随机分为6组,除正常组11只外,其余各组15只大鼠予一次性腹腔注射2%STZ(46 mg/kg)造模。同日正常组、模型组予蒸馏水蒸馏水10 mL/kg,各给药组分别予金芪降糖片混悬液1.47 g/kg,黄芪2.7 g/kg,葛根1.35 g/kg,黄芪葛根汤4.05 g/kg,给药30 d。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测脂肪组织中胰岛素(Ins)、Ins受体(InsR)、葡萄糖转运体4(Glut-4)的水平,实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)检测脂肪组织中Ins底物(IRS)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(PKB/AKT)mRNA相对表达。结果与正常大鼠比较,模型大鼠Ins、InsR、Glut-4水平降低,IRS、PI3K、AKT mRNA表达减少(P<0.05)。与模型大鼠比较,黄芪、葛根及其配伍能够升高糖尿病大鼠Ins(葛根、黄芪与葛根配伍除外)、InsR、Glut-4(葛根除外)水平(P<0.05),在调节InsR、Glut-4时,黄芪优于两药合用;黄芪、葛根及两药配伍能够增加IRS(葛根、黄芪与葛根配伍除外)、PI3K(葛根除外)、AKT mRNA表达(P<0.05),黄芪促进PI3K mRNA表达的作用优于两药合用,黄芪与葛根配伍调节AKT mRNA表达的作用优于单一用药。结论黄芪、黄芪与葛根配伍能够调节糖尿病大鼠脂肪组织胰岛素信号通路,黄芪作用效果佳。

基于析因设计探讨黄芪葛根配伍对糖尿病大鼠骨骼肌Ins/APN/LEP及其受体的影响

目的:通过析因设计考察糖尿病大鼠骨骼肌胰岛素(Ins)与胰岛素受体(InsR)、脂联素(APN)与脂联素受体(AdipoR)、瘦素(LEP)与瘦素受体(ObR)变化,探讨黄芪葛根配伍对糖尿病大鼠骨骼肌糖代谢的调控作用与机制。方法:按照随机血糖将66只大鼠分为6组。除正常组外,其余各组均腹腔注射链脲佐菌素(STZ)溶液诱导为糖尿病模型。检测糖尿病大鼠血糖;应用酶联免疫吸附测定法检测骨骼肌Ins、InsR、APN、AdipoR、LEP、ObR水平。结果:黄芪组、葛根组及黄芪葛根配伍组均能降低随机血糖;黄芪葛根配伍组能增加Ins、InsR、APN、AdipoR、LEP、ObR水平。结论:黄芪、葛根均具降糖之效。黄芪葛根配伍能够有效调节糖代谢,其机制可能与Ins、APN、LEP及其受体的表达变化相关。

基于PI3K/Akt信号通路探讨黄芪葛根配伍对糖尿病大鼠骨骼肌糖代谢的影响

目的:基于PI3K/Akt信号通路中胰岛素(Ins)、胰岛素受体(InsR)、胰岛素受体底物-2(IRS-2)、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt2)、糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)以及葡萄糖转运体-4(GLUT-4)的变化,探讨黄芪葛根配伍对糖尿病大鼠骨骼肌糖代谢的影响。方法:66只大鼠随机分为6组,除正常组外,其余各组均腹腔注射链脲佐菌素溶液诱导为糖尿病模型。检测大鼠随机血糖,并应用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测骨骼肌Ins、InsR及GLUT-4水平,以及应用实时荧光定量PCR技术检测骨骼肌IRS-2、PI3K、Akt2、GSK-3β、GLUT-4mRNA的表达。结果:黄芪组、葛根组及黄芪葛根配伍组随机血糖均降低,且配伍组血糖下降最明显。黄芪葛根配伍组InsR、GLUT-4、IRS-2mRNA、PI3KmRNA、Akt2mRNA、GLUT-4mRNA表达升高,GSK-3βmRNA表达减低。在调节骨骼肌Ins、InsR及PI3KmRNA方面,黄芪与葛根有交互作用。结论:黄芪、葛根均具有降低血糖之效,其降糖机制可能与Ins、InsR、IRS-2、PI3K、Akt2、GSK-3β、GLUT-4的表达变化相关。

黄芪葛根配伍对糖尿病大鼠肝组织PI3K/AKT信号通路影响

目的基于磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路探究黄芪葛根配伍降低糖尿病大鼠血糖、血脂的作用机制。方法SD大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病模型,随机分为模型组、阳性对照(金芪降糖片)组(1.47 g/kg)、黄芪组(2.7 g/kg)、葛根组(1.35 g/kg)、黄芪葛根汤组(4.05 g/kg),各15只,另设正常组11只,造模同日灌服相应药物或蒸馏水10 mL/kg,连续30 d。检测血糖、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO),实时荧光定量PCR法检测肝组织胰岛素受体底物-2(IRS-2)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT2)、糖原合成酶激酶3β(GSK3β)、肝X受体(LXRα)、固醇调节元件结合蛋白-1(SREBP-1)mRNA相对表达量。结果与正常组比较,模型组大鼠治疗30 d后血糖、CHO、TG水平明显升高,IRS-2、PI3K、AKT2、LXRαmRNA表达降低,GSK3β、SREBP-1 mRNA表达增加(P<0.05)。黄芪组、葛根组及其配伍组能降低模型组大鼠血糖及CHO、TG水平;提升IRS-2、PI3K(葛根组除外)、AKT2(葛根组除外)、LXRαmRNA表达,但两药间无交互作用;同时能降低GSK3β、SREBP-1 mRNA表达,黄芪、葛根二者配伍降低GSK3βmRNA表达的效果优于单用,而降低SREBP-1 mRNA表达的效果不如单用。结论黄芪降糖、降脂作用可能与提升IRS-2、PI3K/AKT、LXRαmRNA表达,降低GSK3β、SREBP-1 mRNA表达有关。葛根降糖、降脂作用可能与提升IRS-2、LXRαmRNA表达,降低GSK3β、SREBP-1 mRNA表达有关。黄芪葛根配伍降低糖尿病大鼠的血糖血脂可能与刺激肝组织IRS-2,激活PI3K/AKT信号通路,调节下游信号分子GSK3β、LXRα、SREBP-1的活性有关。

基于含量分析探讨黄芪-葛根药对不同配比的差异

目的探究不同配比的黄芪-葛根药对水煎液中葛根素的含量,验证经方黄芪葛根汤和玉液汤配伍比例的合理性,为临床用药提供参考。方法设置不同剂量配比的黄芪-葛根药对(0∶1、1∶1、2∶1、3∶1、4∶1、1∶2、1∶3、1∶4),以Sino Chrom ODS-BP(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,甲醇-0.1%磷酸(35∶65)为流动相,流速为0.5 m L/min,检测波长250 nm,进样量20μL,测定不同配比药对水煎液中葛根素含量。结果葛根素在5~300μg/m L浓度范围内呈良好的线性关系,回归方程为Y=66 449.269 1X-175 665.663 1(r=0.999 6),重复性、稳定性和回收率良好。黄芪与葛根的比例为0∶1、1∶1、2∶1、3∶1、4∶1、1∶2、1∶3、1∶4的混煎液中葛根素含量分别为(2.506 7±0.025 8)%、(2.526 7±0.071 2)%、(2.863 3±0.086 4)%、(2.956 7±0.119 6)%、(2.835 0±0.078 7)%、(2.480 0±0.072 4)%、(2.530 0±0.064 8)%、(2.183 3±0.128 9)%。结论黄芪-葛根药对配伍比例为2∶1、3∶1、4∶1时,水煎液中葛根素含量最高,证实经方中两者的配比合理,可作为临床选用的最优配比。

黄芪葛根配伍调节糖尿病大鼠血糖血脂炎症的作用与机制

目的：考察黄芪葛根配伍对糖尿病大鼠血糖、血脂及炎症的调节作用与机制,分析黄芪葛根配伍在降糖降脂抗炎过程中的交互作用。方法：66只大鼠随机分为6组,除正常组外,其余各组采用链脲佐菌素（STZ）诱导糖尿病模型。正常组、模型组灌服蒸馏水（10 mL·kg^-1）,阳性药组灌服金芪降糖片混悬液（1.47 g·kg^-1）,黄芪组、葛根组、黄芪葛根汤组分别灌服黄芪水煎液（2.7,1.35,4.05 g·kg^-1）,连续给药30 d后处死。酶联免疫吸附试验法（ELISA）检测肝组织胰岛素（Ins）,胰岛素受体（InsR）,肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法（Real-time PCR）检测肝组织脂联素受体1（AdipoR1）,腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）,葡萄糖转运体-4（GLUT-4）,过氧化物酶增殖体激活受体α（PPARα）,脂肪酸转运蛋白4（FATP4）,p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）mRNA相对表达量。结果：与模型组比较,黄芪、葛根及其配伍（黄芪葛根汤）能升高糖尿病大鼠肝脏Ins（葛根组除外）,InsR水平,增加AdipoR1,AMPK（葛根组除外）,GLUT-4,PPARα,FATP4mRNA表达,降低TNF-α（葛根组除外）水平,减少p38 MAPK mRNA表达（P〈0.05）。在调节InsR,PPARαmRNA,TNF-α水平时,单用黄芪作用比两药合用效果好。结论：黄芪葛根配伍在调节血糖血脂炎症过程中各有侧重,其机制与升高肝脏Ins水平、增加GLUT-4,FATP4 mRNA,降低p38 MAPK mRNA有关。