基于UPLC-TOF-MS分析人参麦冬配伍后皂苷类成分的变化

利用超高效液相色谱-飞行时间质谱联用技术(UPLC-TOF-MS)分析人参麦冬药对配伍后人参皂苷的变化,从化学成分层次阐释其配伍机制。采用Acquity BEH C18色谱柱,流动相为0.1%甲酸水溶液和乙腈溶液梯度洗脱,电喷雾电离离子源V模式检测,建立基于UPLC-TOF-MS的人参麦冬药对配伍的化学指纹图谱,数据分析采用MassLynx 4.1软件通过主成分分析法和正交偏最小二乘判别法分析药对配伍在合煎过程中人参皂苷的成分变化,找出差异变化显著的化学成分。结果表明:人参麦冬药对合煎液与合并液相比,8种皂苷成分发生显著变化,其中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、丙二酸甲酰基人参皂苷Rb1的含量减少,而人参皂苷Rb3、丙二酸甲酰基人参皂苷Rb2、丙二酸甲酰基人参皂苷Rc、人参皂苷Rf的含量增加,说明麦冬与人参配伍改变了人参皂苷成分的含量,这可能是麦冬配伍人参作用的物质基础。

牛黄-人参药对发展源流与配伍特征探析

自《神农本草经》首次提出“牛黄,人参为使”以来,历代医家对牛黄-人参配伍多有应用与发挥,内外妇儿各科均能找到应用痕迹。但关于牛黄-人参药对的发展源流及配伍特征尚待梳理与明确。通过对历代医籍相关记载的梳理,分析和总结牛黄-人参药对的历史沿革、配伍特征和临床应用,以期为更好地发挥其临床价值和现代开发提供文献参考。

人参、五灵脂同方配伍功用初探

人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神益智之功效,广泛用于治疗劳伤虚损、反胃吐食、虚咳喘促、小儿慢惊、崩漏等一切气血津液不足之证。五灵脂具有活血止痛、化瘀止血之功效,主要用于治疗心腹血气诸痛、闭经、产后瘀血作痛等病证。人参、五灵脂为十九畏中临床应用较多的一对配伍,一补一通,补中寓通,补而不滞,通而不伤正,治疗病证之病机主要是病久气虚,痰瘀交结,浊气壅塞,宿食不化所致的气虚血瘀之虚实夹杂之证,多用于胸痹心痛、妇科疾病、脾胃疾病、肺系疾病、癥瘕积聚、鼓胀及中风等疾病。

基于R语言的专利中药复方防治呼吸道传染病的用药规律研究

【目的】挖掘专利中药复方防治呼吸道传染病的遣方用药规律,为呼吸道传染病的防治提供参考。【方法】在国家专利数据库中收集防治呼吸道传染病的中药复方,经数据筛选与规范化后,利用R语言进行数据挖掘。【结果】共纳入429首中药专利复方,涉及中药846味;高频中药有26味,使用频次居前10位的药物分别为甘草、金银花、黄芩、连翘、桔梗、百部、苦杏仁、黄芪、柴胡、薄荷。高频中药主要为清热解毒药和补气药;所涉中药药性以寒为主,药味多为苦、甘、辛,主归肺经;关联规则分析得到19条核心关联规则、多个药物组合;聚类分析得到3个药物聚类。【结论】专利中药复方防治呼吸道传染病时注重寒温相配、宣降相伍,着重宣散肺邪、清热解毒,同时不忘益气和中、滋阴润燥,使祛邪不伤正、扶正不敛邪。

黄芩与不同药物配伍后成分含量的变化及其抗皮肤癣菌作用研究

目的研究黄芩汤中不同药物与黄芩配伍对君药黄芩有效成分含量和抗皮肤癣菌活性的影响,并探讨两者的相关性。方法采用L8(27)正交设计法组方,以高效液相色谱法(HPLC)测定各配伍样品中黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A、千层纸素A苷6种有效成分的含量;以临床常见皮肤癣菌——须癣毛癣菌为例,采用微量稀释法测定黄芩不同配伍组的最小抑菌浓度(MIC值),比较配伍前后的抗真菌作用;采用Pearson分析两者的相关性。结果白芍、甘草和大枣在用药水平时,黄芩苷、黄芩素等各成分含量均大于不用药水平,其对成分含量的影响程度为:白芍>甘草>大枣;白芍的用药作用对各成分含量的影响均差异有统计学意义(P<0.05);四味药合煎时各成分含量最高。白芍、甘草在用药水平时,汤液MIC值小于不用药水平,而大枣在用药水平时,其MIC值大于不用药水平;四味药合煎液MIC值最小。Pearson相关分析显示黄芩苷等6个成分与MIC值均呈显著负相关(r>0.7且P<0.05)。结论黄芩汤的抗皮肤癣菌作用强度与君药黄芩的主要成分含量显著相关,黄芩汤配伍能够促进成分溶出和提高抗真菌活性。

参附汤配伍人参对附子中单酯型生物碱类成分药代动力学的影响

目的:建立血浆中苯甲酰新乌头原碱(BMC)、苯甲酰乌头原碱(BAC)、苯甲酰次乌头原碱(BHC)的超高效液相色谱-串联质谱含量测定方法,研究参附汤中配伍人参对上述3种成分在大鼠体内药代动力学参数的影响。方法:将SPF级雄性SD大鼠随机分为附子组(2.5 g/m L)和参附汤组(5.0 g/m L),每组各6只。给予相应药物灌胃后,于5 min、10 min、20 min、30 min、45 min、1 h、2 h、4 h、6 h、8 h、10 h和24 h经尾静脉采血。离心去上清,乙腈沉淀蛋白,经Waters Xbridge C18色谱柱分离,流动相为0.1%甲酸水(A)∶乙腈(B)=18∶82。采用电喷雾离子源、多反应离子监测模式测定3种单酯型生物碱成分的血药浓度,Phoenix Win Nonlin 6.0软件计算药代动力学参数。结果:3种单酯型生物碱成分测定的日内、日间精密度相对标准偏差(RSD)均小于9.60%,提取回收率为94.400%~107.000%,稳定性RSD均小于9.50%。与附子组比较,参附汤组BMC、BAC、BHC的达峰浓度和药时曲线下面积显著升高,表观清除率明显降低,且达峰时间均提前,BAC的表观分布容积降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:建立了一种灵敏度高、准确可靠测量参附汤配伍前后附子中单酯型生物碱类成分的方法,且参附汤配伍人参可改变附子中单酯型生物碱的药代动力学行为。

基于OATP1B3转运体活性与表达研究黄芩-黄连药对中黄连对黄芩黄酮肝脏分布的影响及其机制

目的探究在连续给药过程中,黄连对黄芩黄酮在大鼠肝组织中分布的影响机制。方法大鼠灌胃给药黄芩、黄连-黄芩药对提取物14 d后,LC-MS/MS分析肝脏中黄芩苷、黄芩素、汉黄芩苷、汉黄芩素的含量;采用稳定转染OATP1B3的HEK293细胞,以黄芩苷和汉黄芩苷为底物,小檗碱作为抑制剂,进行药物转运实验;大鼠灌胃给药黄芩、黄连-黄芩药对提取物14 d后,取肝脏进行Western blot实验,验证Oatp4的蛋白表达水平。结果连续给药后,在肝脏中,黄连仅降低汉黄芩素的含量。小檗碱可抑制OATP1B3对黄芩苷和汉黄芩苷的转运功能;黄连可上调Oatp4的蛋白表达水平。结论在连续给药过程中,黄连可通过影响OATP1B3转运体活性和蛋白水平共同影响黄芩黄酮在肝脏中的转运过程。

附子与人参配伍对急性心衰大鼠血流动力学的影响

目的研究附子与人参配伍前后对急性心衰大鼠血流动力学的影响。方法建立戊巴比妥钠致大鼠急性心力衰竭动物模型,以左室内压(LVSP)、左室内压最大上升速率(dp/dtmax)、左室内压最大下降速率(dp/dtmin)、左室舒张末期压(LVEDP)及心率(HR)等为血流动力学检测指标,考察附子与人参配伍前后对急性心衰大鼠的影响。结果附子与人参配伍前后均可改善急性心衰大鼠血流动力学指标,附子或人参单味给药组作用缓和且时间较短,附子与人参配伍后作用增强,并且随着人参配伍比例的增加,作用强度增强;给药15 min后,附子、人参、附子人参1∶0.5、附子人参1∶1和1∶2组,LVSP分别较模型组上升-0.91±2.21(P<0.05),-1.96±5.32(P<0.05),0.41±3.22(P<0.01),2.46±2.36(P<0.01),4.39±4.63(P<0.01);+dp/dtmax分别较模型组上升-0.29±2.23(P<0.01),-1.33±7.55(P<0.05),1.91±4.56(P<0.01),2.87±4.32(P<0.01),9.91±9.27(P<0.001)。结论附子与人参配伍能改善血流动力学相关指标,有增强治疗或缓解急性心力衰竭的作用。

人参与五灵脂配伍对实验动物毒性的影响

小鼠急性毒性试验表明，人参、五灵脂配伍，口服不具毒性，腹腔注射呈毒性增加趋势；大鼠亚急性毒性试验显示，两者配伍对白细胞总数及分类、血小板计数、血红蛋白含量、血清谷丙转氨酶活力、尿素氮等均无明显影响。

人参附子不同比例配伍对小鼠急性毒性的影响

[目的]考察人参附子不同比例配伍对小鼠急性毒性的影响,旨在从毒性角度考察人参附子配伍是否减毒。[方法]运用均匀设计和固定附子剂量与人参不同配比两种方法考察人参附子不同比例配伍对小鼠急性毒性的影响。[结果]均匀设计实验的研究结果表明,随着附子给药剂量的增多,小鼠的死亡率呈上升趋势,且随着人参对附子的比例增大减毒作用呈现增大趋势。固定附子LD50与人参不同配比的减毒作用研究结果表明,人参与附子配伍的减毒作用在一定范围内随着人参剂量的增加而增加,尤其在人参∶附子为1∶1及大于1∶1时更明显。[结论]人参附子配比1∶1为人参附子配伍减毒作用的分界点,可作为临床用药的参考依据。

HPLC法研究泻心汤中大黄和黄芩配伍的活性成分变化

目的研究泻心汤中大黄和黄芩配伍前后的活性成分变化。方法采用HPLC法对两药合煎液和单煎混合液的各峰进行检测和分析,并对两药合煎液和单煎混合液中黄芩苷、大黄素等活性成分进行测定和动态分析。结果大黄与黄芩配伍合煎后产生了活性成分的动态变化。结论中药复方配伍并非是单味药的简单加合,本实验结果有助于阐明泻心汤的化学成分基础。

柴胡黄芩配伍抗大鼠急性酒精性肝损伤作用的实验研究

目的研究柴胡、黄芩以不同剂量比例配伍(2∶1,1∶1,1∶2)对大鼠急性酒精性肝损伤的防治作用。方法采用白酒灌胃造成大鼠急性酒精性肝损伤模型,以单味柴胡黄芩和小柴胡冲剂作为对照药,通过血清和肝匀浆乙醇脱氢酶(ADH)的测定和肝组织病理学的观察,探讨柴胡黄芩配伍对急性酒精性肝损伤的影响。结果柴胡黄芩1∶2组对各项检测指标影响最显著。结论不同比例配伍的柴胡黄芩抗急性酒精性肝损伤中发挥作用的强弱趋势不同,以柴胡黄芩1∶2组疗效较佳。

莱菔子对人参补益作用的影响

历代方书及医家大多认为莱菔子解人参的补益作用,民间也传说服食人参时忌食莱菔子及萝卜。本实验表明,人参对提高小鼠的抗疲劳、耐缺氧及抗应激等方面都有明显作用,而同服莱菔子对上述作用未见影响。

基于文献挖掘的相恶药对生姜与黄芩临床应用特点研究

目的探讨相恶药对生姜与黄芩临床配伍应用规律。方法系统检索生姜与黄芩配伍文献,以Excel数据分析平台为数据贮存和分析工具,采用文献计量学方法对生姜与黄芩配伍治疗的疾病、用药剂量、配伍比例、剂型等进行整理和分析。结果生姜与黄芩配伍处方主要用于治疗内科疾病(746例,占76%)、妇科疾病(62例,占6%)、耳鼻喉科疾病(43例,占4%)等;中医内科疾病中脾胃系病证数量最多(193例,占26%),其次为肝胆病证(189例,占25%)、肺系病证(185例,占25%)。黄芩用量以10、12、9、15 g居多,69%(532/772)处方中的黄芩剂量在《中华人民共和国药典》规定剂量范围内;生姜用量以10、6 g居多,84%(356/424)处方中的生姜剂量在《中华人民共和国药典》规定剂量范围内。生姜与黄芩多以1∶1比例配伍(32%)。结论相恶药对生姜与黄芩配伍处方临床广泛应用于内、外、妇、儿等多类病证,二者一寒一热,温肺与清肺相宜,共奏相制相成之效。

柴胡黄芩配伍应用对小鼠急性癫痫模型的影响

目的:观察柴胡黄芩配伍应用对小鼠急性癫痫模型的影响。方法:60只昆明小鼠被随机分为6组,即模型组(A组),柴胡黄芩5∶2组(B组),柴胡黄芩1∶1组(C组),柴胡组(D组),黄芩组(E组),地西泮组(F组),每组各10只,制备小鼠最大电休克(MES)急性癫痫模型;另取180只昆明小鼠按上述分组方法分别制备小鼠戊四氮(PTZ)、士的宁(STR)、匹罗卡品(PLCP)急性癫痫模型。结果:B、F组可显著降低MES小鼠惊厥率(P<0.05),明显延长PTZ小鼠发作性阵挛潜伏期、发作性强直潜伏期以及死亡潜伏期(P<0.05),以及STR小鼠死亡潜伏期(P<0.01)。仅F组可延长PLCP小鼠强直及死亡潜伏期(P<0.01)。结论:柴胡黄芩配伍应用有抗惊厥、抗癫痫作用,其中以柴胡黄芩5∶2组效果最为明显。

基于UPLC-LTQ-Orbitrap-MS技术分析黄芩清肺汤中黄芩、栀子单煎与合煎的成分变化

目的研究黄芩清肺汤中黄芩、栀子配伍前后的成分变化,探讨二者配伍的合理性。方法采用超高效液相色谱-离子阱-静电场轨道阱质谱联用(UPLC-LTQ-Orbitrap-MS)技术建立黄芩、栀子配伍前后的化学指纹图谱,通过正交偏最小二乘判别法分析药对配伍前后的化学成分变化,并对筛选到的化学标记物进行鉴定。结果黄芩、栀子合并液与合煎液化学成分存在明显差异,合煎后京尼平苷酸(geniposidic acid)、栀子苷(gardenoside)等含量显著下降,黄芩素(baicalein)、槲皮素(quercetin)等含量显著升高。结论黄芩清肺汤中黄芩、栀子配伍后,可促进多种活性成分在合煎液中的溶出,这些成分可能是黄芩、栀子配伍协同增效的物质基础。

附子人参不同配伍比例对缺糖缺氧/复糖复氧损伤大鼠心肌细胞的保护作用

目的观察不同配伍比例的附子人参对缺糖缺氧/复糖复氧损伤大鼠心肌细胞的保护作用。方法将原代培养6 d的心肌细胞分为正常对照组、模型组、不同配伍比例的附参组、空白血清组。建立原代大鼠心肌细胞缺糖缺氧/复糖复氧损伤模型,观察不同配伍比例的附子人参血清对损伤心肌细胞自发搏动、细胞活力的作用,并测定心肌细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量以及心肌组织上清液中一氧化氮(NO)分泌量和乳酸脱氢酶(LDH)释放率。结果与空白血清组比较,各附参配伍组心肌细胞自发搏动频率、细胞活力显著升高(P<0.05),心肌细胞SOD活性显著升高(P<0.05),MDA含量、NO分泌量和LDH释放率均显著降低(P<0.05),而且附参(2∶1)组对心肌细胞的自发搏动频率、细胞活力、SOD、MDA和LDH作用均不同程度地优于其余各配伍组。结论各附参配伍组对缺糖缺氧/复糖复氧损伤大鼠心肌细胞具有保护作用,其中以附参(2∶1)组作用效果最为显著。

人参配伍五灵脂对A549人肺腺癌细胞增殖抑制及诱导凋亡的实验研究

目的:观察人参配伍五灵脂对A549人肺腺癌细胞增殖及凋亡的影响,以阐明其作用机制,探究其最佳配伍比例,为临床用药提供合理的实验依据。方法:健康Wistar大鼠25只,随机分成5组,每组5只,即正常对照组,人参、五灵脂1∶1,1∶2,2∶1组,复方斑蝥胶囊组。煎取药液后,计算出大鼠等效剂量,按1 mL.100 g-1给大鼠灌胃,每天2次,连续灌胃3 d。末次灌胃后1 h取血清,加入RPMI 1640培养液,配制成含量为10%的药物血清温育液。运用MTT法检测肿瘤细胞生长曲线及肿瘤细胞抑制率,透射电镜观察其凋亡情况。结果:人参、五灵脂配伍能抑制A549人肺腺癌细胞增殖,并对其细胞的凋亡有诱导作用,且当二者比例为2∶1时效果最显著。结论:提示抑制肿瘤细胞增殖,诱导其调亡可能是人参配伍五灵脂抗癌作用的机制之一。

黄芩百部配伍过程中主要活性成分的变化研究

目的研究黄芩百部配伍过程中主要活性成分的变化。方法通过薄层色谱法(TLC)比较黄芩、百部单煎与合煎黄酮与生物碱成分的变化,采用紫外分光光度法测定了黄芩总黄酮的含量,运用酸性染料比色法对百部生物碱作半定量分析,比较黄芩百部单煎与合煎总黄酮和总生物碱含量的变化。结果黄芩百部合煎后每100g黄芩中总黄酮的含量从单煎的5.774g增加到8.487g;生物碱含量合煎∶单煎为1∶1.061;黄酮种类基本不变;减少了一种生物碱成分。结论黄芩与百部配伍后合煎的化学成分不同于单味药化学成分的简单加和,百部有助于黄芩中总黄酮成分的煎出,黄芩对百部生物碱成分有影响。

三物黄芩汤组分(群)配伍在大鼠肝微粒体孵育模型中的相互作用

目的研究三物黄芩汤组分(群)配伍在大鼠肝微粒体孵育模型中的相互作用。方法以高丽槐素和麻黄碱为内标,HPLC法分别同时测定7个时间点(0、15、30、45、60、90、120 min)全方组分(群)配伍及单味药材部位(群)中黄芩总黄酮(黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A)和苦参总生物碱(氧化苦参碱、氧化槐果碱、苦参碱)的含有量,并计算其体外代谢率。结果在全方组分(群)配伍中,黄芩苷、汉黄芩苷含有量先升高(0~0.5 h)后降低(0.5~2.0 h),黄芩素、汉黄芩素、千层纸素A含有量呈升高趋势(0.5 h内更明显);各生物碱代谢稳定平缓,在20 min内达到平衡。结论三物黄芩汤中黄芩总黄酮与苦参总生物碱、地黄总多糖配伍后,可改善其生物利用度,增强其药效。