缺氧缺糖后再给氧给糖对培养心肌细胞膜糖蛋白变化的影响

本实验应用凝集素伴刀豆球蛋白Ａ（ＣｏｎｃａｎａｖａｌｉｎＡ，ＣｏｎＡ）为探针，以能量制剂ＭｇＡＴＰ、氧自由基清除剂ＳＯＤ及钙阻滞剂异搏定作用于体外缺氧缺糖培养后再给氧给糖，观察对大鼠乳鼠培养心肌细胞的影响。发现心肌细胞膜、肌质网膜、线粒体膜等生物膜上存在ＣｏｎＡ受体；缺氧缺糖后再给氧给糖组心肌细胞生物膜上致密阳性产物减少，而用药组不减少，与正常组相近，对照组则无这种阳性产物。提示，尽管这种变化机制尚不大清楚，但与糖蛋白合成、加工、运输和分泌的细胞的结构和功能变化有关。

洋刀豆植物蛋白中凝集素的灭活研究

洋刀豆蛋白是一种具有较高营养价值的植物蛋白质,但是其中含有的一些抗营养因子,例如血球凝集素(Concanavalin A,简称ConA)、胰蛋白酶抑制剂等,限制了它在人类食用植物蛋白和动物饲料中的应用,其中ConA是最主要的抗营养因子。本文主要研究洋刀豆植物蛋白中的ConA的灭活方法。分别利用干热、湿热和茶多酚处理法灭活ConA。实验表明,在保持洋刀豆蛋白质良好品质的条件下,干热处理不能使ConA的活力明显丧失;而95℃、30min,100℃、20min或105℃、10min的湿热处理,可使ConA的活力完全丧失;洋刀豆蛋白液中茶多酚浓度达到17.5mg/ml时,也可完全灭活ConA的活力。

氟化物对人多形核白细胞SOD活力变化的影响

目的 通过测定超氧化物歧化酶 (SOD)活力变化 ,观察刀豆蛋白 A(Con A )及与 Na F对多形核中性粒细胞 (PMN)超氧阴离子自由基 (· O2 - )释放的影响。方法 采用体外实验。结果 研究表明 :1在 1ml的反应体系中 ,37℃温育含粒细胞悬液 0 .5 m l(终浓度 1× 10 9/ L ) ,SOD(5 0 NU / m l) ,当加入 Con A后 ,SOD活力明显下降 ,即 · O2 - 的释放量明显高于对照组 ,且 Con A浓度为 2 0 0 mg/ L时 ,SOD活力下降明显 ,即 · O2 - 的释放量最大 ;2上述条件不变 ,加入 Con A(2 0 0 m g/ L) ,当加入 Na F(10 m g/ L) ,温育 30 s时 ,SOD活力下降最明显 ,即·O2 - 释放量最大 ;Na F达到 (5 0 .0 ,10 0 .0 mg/ L)时 ,· O2 - 释放量不增加且趋于平稳。结论 提示 :一定浓度 Con A是人粒细胞产生 · O2 - 有效诱发剂 ;低剂量 Na F(10 .0 m g/ L )可能是粒细胞产生活性氧自由基的耗氧性刺激剂 ,且在较短时间 (30 s)即可刺激产生大量· O2 - ;而高剂量 Na F可能通过产生蓄积性毒性 ,损害 PMN的结构和功能 ,从而影响 · O2 - 的释放。

人外周血淋巴细胞化学发光测定的最佳实验条件探讨

本文采用正交设计对人外周血淋巴细胞(PBL)化学发光(CL)测定系统中的PBL、Luminol及ConA浓度进行分析比较,并探讨了新生牛血清(NCS)、牛血清白蛋白(BSA)、细胞保存温度与时间等对淋巴细胞化学发光(Ly-CL)的影响。结果表明,Ly-CL测定的最优实验条件为:(1)测定系统含1.0ml PBL悬液(1.4×10°/ml)、0.2ml Lumionl溶液(7×10^(-4)M)及0.2ml ConA溶液(700μg/ml);(2)分离的PBL悬于0.1％BSA-无酚红Hanks液中,4℃冰浴保存,2小时内完成测定。

基于静电结合的电化学阻抗D-甘露糖生物传感器的研究

糖组学的研究已经成为后基因时代一个重要的研究领域.糖类物质与凝集素之间的特异性相互作用,能够用于制备糖生物传感器,文章设计了一种简便的D-甘露糖电化学阻抗生物传感器,以刀豆凝集素为分子识别物质,静电吸附法将刀豆凝集素固定到金圆盘电极的表面,用电化学阻抗法进行检测.实验结果表明,以[Fe（CN）6]3-4-氧化还原电对作为探针,电子转移阻抗变化值与D-甘露糖浓度的对数在5.0×10-8～1.0×10-5 mol/L之间呈良好的线性关系,检出限为0.02μmol/L.

重组鲨肝刺激物质类似物对刀豆蛋白A致小鼠急性肝损伤的保护作用

为探讨重组鲨肝刺激物质类似物(r-sHSA)对刀豆蛋白A(Con A)致小鼠急性肝损伤的保护作用及其作用机制,利用尾静脉注射Con A制备小鼠急性肝损伤动物模型,以谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活性以及组织病理变化为指标判断r-sHSA(30,60,120μg/kg)对免疫性肝损伤的保护作用;同时,检测肝组织丙二醛、谷胱甘肽水平和总抗氧化能力以及血清中TNF-α和IFN-γ的含量,并测定肝组织匀浆中iNOS活力。结果表明,3个给药剂量的r-sHSA均可显著降低肝损伤小鼠血清转氨酶活性,明显减轻肝细胞坏死,减少炎细胞浸润,改善肝脏氧化应激水平,并下调炎症因子表达。结果提示,r-sHSA对Con A致小鼠急性肝损伤具有明显的保护作用,其机制可能与抗氧化和抗炎作用有关。

细胞间粘附分子-1在刀豆蛋白A诱导小鼠急性肝损害中的表达

目的 观察刀豆蛋白A (ConA)诱导的小鼠急性肝损害肝组织内粘附分子 -1(ICAM -1)的表达 ,以研究ICAM -1在这种肝损害模型中的作用。方法 ConA以 18mg/kg的剂量诱导小鼠急性肝损害 ,用免疫组化的方法观察 8h后肝组织ICAM -1的表达 ,并观察血清ALT的变化。结果 8h后出现明显肝损害 (ALT水平升高 ) ,肝组织内ICAM -1表达明显增强。结论 ICAM -1参与了ConA小鼠肝损害的病理过程。

姜黄素对免疫性肝损伤小鼠JAK2-STAT3信号通路的影响

目的探讨姜黄素对刀豆蛋白A(Concanavalin A,Con A)诱导的小鼠免疫性肝损伤的防护效果及可能机制.方法 60只小鼠随机分为空白对照组、模型组、联苯双酯组、姜黄素100、200、400 mg·kg-1组,每组10只.每天灌胃给药1次,连续7 d.末次给药1 h后,除空白对照组小鼠给予相同剂量的生理盐水外,其余各组小鼠一次性尾静脉注射Con A 15 mg·kg-1,8 h后取小鼠血液检测血清谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)水平,取肝脏计算肝指数,采用HE染色法观察肝组织病理改变情况,酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测肝组织中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素(interleukin,IL)-6、IL-1β含量,Western blot法检测肝组织中磷酸化Janus激酶2(phosphorylated Janus kinase 2,p-JAK2)、磷酸化的信号转导与转录激活因子3(phosphory-lated signal transducer and activator of transcription 3,p-STAT3)蛋白表达情况.结果与空白对照组比,模型组小鼠血清中ALT、AST明显升高(F值为37.89和24.91,P值均<0.05),小鼠肝组织病理损伤严重,肝细胞大量坏死、凋亡,肝组织TNF-α、IL-6、IL-1β含量显著升高(F值分别为19.75、18.93、22.90,P值均<0.05),表明造模成功.与模型组比较,姜黄素中、高剂量组小鼠血清中ALT、AST水平明显降低(F值为31.58和20.97,P值均<0.05),肝组织中TNF-α、IL-6、IL-1β含量下降(F值分别为17.78、18.01、18.97,P值均<0.05),p-JAK2、p-STAT3蛋白表达量下调(F值分别为34.27和36.78,P值均<0.05).结论姜黄素对Con A诱导的小鼠免疫性肝损伤具有一定的保护作用,机制可能与其调控JAK2/STAT3信号通路有关.