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Focus on limbal stem cell deficiency and limbal cell transplantation 被引量:1
1
作者 Emanuele Tonti Gregorio Antonio Manco +1 位作者 Leopoldo Spadea Marco Zeppieri 《World Journal of Transplantation》 2023年第6期321-330,共10页
Limbal stem cell deficiency(LSCD)causes severe vision impairment and can lead to blindness,representing one of the most challenging ocular surface disorders.Stem cell deficiency can be congenital or,more often,acquire... Limbal stem cell deficiency(LSCD)causes severe vision impairment and can lead to blindness,representing one of the most challenging ocular surface disorders.Stem cell deficiency can be congenital or,more often,acquired.The categorization of ocular surface transplantation techniques is crucial to achieving treatment homogeneity and quality of care,according to the anatomic source of the tissue being transplanted,genetic source,autologous or allogenic transplantation(to reflect histocompatibility in the latter group),and cell culture and tissue engineering techniques.The aim of this minireview is to provide a summary of the management of LSCD,from clinical characteristics and therapeutic outcomes to the development of novel therapeutic approaches.The manuscript also briefly summarizes recent findings in the current literature and outlines the future challenges to overcome in the management of the major types of ocular surface failure. 展开更多
关键词 Limbal stem cell deficiency conjunctival limbal autograft conjunctival limbal allograft Keratolimbal allograft Cultivated limbal epithelial transplantation Simple limbal epithelial transplantation
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角膜缘部干细胞对角膜上皮创伤愈合的影响 被引量:14
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作者 赵东卿 孙秉基 +4 位作者 贺燚 张郑民 李建新 靳伟民 银平章 《眼科研究》 CSCD 1993年第4期233-235,T014,共4页
利用角膜缘上皮移植、结膜移植和非手术的方法分别对角膜上皮创伤伴随角膜缘损伤的兔眼进行实验研究,结果表明角膜缘上皮移植组上皮愈合时间短(平均8.5天),且无杯状细胞,无或极少量新生血管;结膜移植组,上皮愈合时间延长(平均11.5天),... 利用角膜缘上皮移植、结膜移植和非手术的方法分别对角膜上皮创伤伴随角膜缘损伤的兔眼进行实验研究,结果表明角膜缘上皮移植组上皮愈合时间短(平均8.5天),且无杯状细胞,无或极少量新生血管;结膜移植组,上皮愈合时间延长(平均11.5天),含有杯状细胞和新生血管;非手术组形成角膜血管翳性混浊。而不伴随角膜缘损伤仅有角膜中央上皮创伤的兔眼愈合时间最短(平均3.5天),愈合后无新生血管及杯状细胞。结果证实角膜缘部干细胞的存在并对角膜上皮再生有直接作用。 展开更多
关键词 干细胞 结膜移植 角膜上皮创伤
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胚胎干细胞定向诱导为结膜上皮样细胞的实验研究 被引量:7
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作者 黄丹平 葛坚 +2 位作者 高前应 陶靖 郑健樑 《眼科学报》 2003年第2期117-121,共5页
目的:研究体外诱导小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)分化为结膜上皮细胞的可能性及条件,为构建组织工程化结膜提供新型的种子细胞奠定基础。方法:以人结膜上皮细胞作为诱导条件,采用分层共培养的方法诱导小鼠ESC,倒置相差显微... 目的:研究体外诱导小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cell,ESC)分化为结膜上皮细胞的可能性及条件,为构建组织工程化结膜提供新型的种子细胞奠定基础。方法:以人结膜上皮细胞作为诱导条件,采用分层共培养的方法诱导小鼠ESC,倒置相差显微镜观察共培养后形态的改变;免疫组织化学法检测诱导后的细胞角蛋白3/12(CK3/CK12)、角蛋白13(CK13)、MUC4和MUC5AC的表达。结果:采用人结膜上皮细胞作为诱导条件,ESC在诱导72h后可见部分细胞显示典型上皮样细胞形态,免疫组化检测CK13、MUC4表达阳性,CK3/CK12,MUC5AC表达阴性。结论:采用分层共培养的方法,用人结膜上皮细胞作诱导剂可以诱导小鼠ESC向结膜上皮样细胞分化。眼科学报2003;19:117-121。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 定向诱导 结膜上皮样细胞 实验 小鼠 免疫组织化学 检测 眼表疾病
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DispaseⅡ消化法原代培养兔结膜上皮细胞及鉴定 被引量:3
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作者 谢秀雯 周建强 崔红平 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2011年第4期312-316,共5页
目的研究DispaseⅡ消化法原代培养兔结膜上皮细胞,观察其体外生长特性,并采用免疫组织化学染色鉴定培养的上皮细胞。方法 DispaseⅡ消化法原代培养兔结膜上皮细胞,观察不同时期细胞的生长情况、细胞形态,做广谱角蛋白、MUC5AC免疫荧光... 目的研究DispaseⅡ消化法原代培养兔结膜上皮细胞,观察其体外生长特性,并采用免疫组织化学染色鉴定培养的上皮细胞。方法 DispaseⅡ消化法原代培养兔结膜上皮细胞,观察不同时期细胞的生长情况、细胞形态,做广谱角蛋白、MUC5AC免疫荧光染色及PAS染色鉴定;并比较不同部位结膜上皮细胞增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达阳性情况。结果 DispaseⅡ消化法能够获得大量的较纯净的结膜上皮细胞,细胞生长增殖快,能传代4~5代;绝大多数细胞广谱角蛋白免疫荧光染色阳性,少数细胞MUC5AC表达阳性及PAS染色阳性。睑结膜、穹隆部结膜和球结膜细胞PCNA阳性率分别为:(32.14±1.69)%、(27.67±1.20)%、(22.76±1.73)%,兔睑结膜上皮细胞PCNA阳性率较穹隆部及球结膜上皮细胞的PCNA阳性率高,各部位PCNA阳性率间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 DispaseⅡ消化法是进行体外结膜上皮细胞培养的理想方法,兔眼睑结膜处可能存在结膜干细胞。 展开更多
关键词 结膜上皮细胞 结膜上皮干细胞 DispaseⅡ 原代培养 免疫组织化学鉴定
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Hoechst 33342标记恒河猴皮肤干细胞向结膜上皮细胞分化 被引量:1
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作者 卢蓉 黄丹平 +3 位作者 黄冰 高楠 王智崇 葛坚 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期263-267,共5页
【目的】探讨皮肤干细胞诱导分化为结膜上皮细胞,为组织工程结膜探索一种新型的种子细胞,为严重眼表疾病的治疗奠定基础。【方法】在体外培养纯化鉴定恒河猴皮肤干细胞,并用Hoechst 33342标记,标记后的皮肤干细胞与结膜上皮细胞进行Tran... 【目的】探讨皮肤干细胞诱导分化为结膜上皮细胞,为组织工程结膜探索一种新型的种子细胞,为严重眼表疾病的治疗奠定基础。【方法】在体外培养纯化鉴定恒河猴皮肤干细胞,并用Hoechst 33342标记,标记后的皮肤干细胞与结膜上皮细胞进行Transwell非接触共培养10d,然后对诱导后的细胞用细胞免疫化学以及流式细胞术检测结膜上皮细胞的特异性表面标志,包括角蛋白4和粘蛋白4,同时检测细胞的Hoechst 33342表达情况。【结果】纯化后的皮肤干细胞比例接近90%。Hoechst 33342标记后的皮肤干细胞胞核显示蓝色荧光。在与结膜上皮细胞共培养10d后,皮肤干细胞显示结膜上皮细胞的标志粘蛋白4和角蛋白4阳性,流式细胞术检测阳性细胞比例分别为49.9%和95.6%,同时细胞还显示胞核的Hoechst 33342表达。【结论】灵长类动物恒河猴的皮肤干细胞,在体外的适宜条件下,可诱导分化为有结膜上皮细胞特征的细胞。 展开更多
关键词 皮肤干细胞 结膜上皮细胞 诱导 恒河猴
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成人结膜干细胞定位特征的免疫组织化学研究 被引量:1
6
作者 裴涌 洪晶 +1 位作者 张昊 郭嘉术 《国际眼科杂志》 CAS 2010年第5期853-855,共3页
目的:研究成人结膜上皮细胞中,粘蛋白5AC(MUC5AC),角蛋白7,p63和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及分布情况,探讨成人结膜上皮干细胞的定位特征。方法:获取角膜移植供者的睑球结膜,采用HE免疫组化染色法,观察MUC5AC,角蛋白7,p63和PCNA的表... 目的:研究成人结膜上皮细胞中,粘蛋白5AC(MUC5AC),角蛋白7,p63和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及分布情况,探讨成人结膜上皮干细胞的定位特征。方法:获取角膜移植供者的睑球结膜,采用HE免疫组化染色法,观察MUC5AC,角蛋白7,p63和PCNA的表达及分布情况。结果:PCNA及p63表达情况一致,主要表达在睑缘皮肤黏膜交界处及近角膜缘结膜上皮深层细胞。角蛋白7在穹窿部球结膜的固有层中的腺体细胞有阳性表达,MUC5AC在各部位结膜上皮的杯状细胞的胞质阳性表达。结论:MUC5AC细胞角蛋白7和p63及PCNA在成人结膜上皮细胞的特征性表达情况可以推测具有分化潜力的结膜干细胞存在于睑缘皮肤黏膜交界处及近角膜缘球结膜上皮深层细胞。 展开更多
关键词 结膜上皮干细胞 定位 免疫组织化学
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孕晚期胎儿结膜上皮干细胞分布的研究
7
作者 郭嘉术 洪晶 +1 位作者 张昊 裴勇 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2008年第11期828-831,共4页
目的利用免疫组织化学方法,对孕晚期胎儿结膜上皮干细胞进行研究,推测其分布规律。方法死亡6h内的孕晚期胎儿8例(16眼),制备标本,苏木精-伊红染色确定各部位结膜位置,SP法免疫组织化学染色,观察各部位角蛋白K7、K19及黏蛋白5AC(MUC5AC)... 目的利用免疫组织化学方法,对孕晚期胎儿结膜上皮干细胞进行研究,推测其分布规律。方法死亡6h内的孕晚期胎儿8例(16眼),制备标本,苏木精-伊红染色确定各部位结膜位置,SP法免疫组织化学染色,观察各部位角蛋白K7、K19及黏蛋白5AC(MUC5AC)、增生细胞核抗原(PCNA)、P63蛋白的表达情况。结果在睑缘皮肤黏膜交界处及角膜缘处,PCNA及P63表达相对明显,其余指标表达不明显;在睑结膜、穹隆部结膜、球结膜呈大致相反的分布规律。结论在孕晚期胎儿睑缘皮肤黏膜交界处及角膜缘处存在较高增生活性的细胞,结膜上皮干细胞可能存在于这两个部位。 展开更多
关键词 胎儿 结膜上皮干细胞 定位 免疫组织化学
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人孕中期胎儿结膜上皮干细胞定位特征的免疫组化研究
8
作者 张昊 洪晶 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期819-821,共3页
目的研究孕中期不同胎龄胎儿结膜上皮细胞中,角蛋白7、14、19p63和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及分布情况,探讨人胎儿结膜上皮干细胞的定位特征。方法取正常引产6h内的孕中期不同胎龄胎儿眼球前部组织,采用HE、免疫组化染色法,观察角蛋... 目的研究孕中期不同胎龄胎儿结膜上皮细胞中,角蛋白7、14、19p63和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及分布情况,探讨人胎儿结膜上皮干细胞的定位特征。方法取正常引产6h内的孕中期不同胎龄胎儿眼球前部组织,采用HE、免疫组化染色法,观察角蛋白p63和PCNA的表达及分布情况。结果PCNA及p63表达情况一致,主要表达在睑缘皮肤黏膜交界处及角膜缘上皮深层细胞。角蛋白19主要表达在穹窿部及球结膜上皮细胞。角蛋白14表达在睑缘皮肤黏膜交界处及睑结膜上皮细胞。角蛋白7表达在穹隆部至角膜缘上皮细胞。结论细胞角蛋白7、14、19和p63及PCNA在人孕中期不同胎龄的胎儿结膜上皮细胞的特征性表达表明,人孕中期胎儿结膜上皮细胞普遍具有增殖的活性,干细胞位于睑缘皮肤黏膜交界处和角膜缘上皮细胞的深层。 展开更多
关键词 胎儿结膜上皮干细胞 定位 免疫组织化学
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羊膜和结膜基质诱导胚胎干细胞分化为上皮样细胞的初步研究 被引量:2
9
作者 黄丹平 葛坚 +2 位作者 高前应 卢蓉 郑健樑 《中华显微外科杂志》 CSCD 北大核心 2007年第5期363-366,406,共5页
目的观察小鼠胚胎干细胞在保存人羊膜及兔眼表结膜基质上分化的情况。方法36只新西兰兔随机分为3组,每组12只。A组:将表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的小鼠ES-GFP细胞用5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记后行实验兔结膜... 目的观察小鼠胚胎干细胞在保存人羊膜及兔眼表结膜基质上分化的情况。方法36只新西兰兔随机分为3组,每组12只。A组:将表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的小鼠ES-GFP细胞用5-溴脱氧尿嘧啶(BrdU)标记后行实验兔结膜下移植;B组:将小鼠ES-GFP细胞接种到人羊膜上共培养4d,用BrdU标记后移植到实验兔结膜缺损区;C组:采用保存羊膜移植到实验兔兔结膜缺损区。分别于移植后1、2、3、4,6和8周,摘取各组实验眼行荧光显微镜、组织学和免疫组织化学检查,荧光检测ES-GFP细胞在组织中的荧光表达,组织学检查移植到结膜基质的ES-GFP细胞的存活、形态变化以及移植局部的反应等情况;免疫组织化学检测移植到结膜基质的带有BrdU标记的ES-GFP细胞CK3/CK12和CK13的表达。结果小鼠ES-GFP细胞接种到人羊膜后能在羊膜上贴附生长,与羊膜共培养4 d后部分ES-GFP细胞分化为多角形上皮样细胞,免疫组化显示β1整合素阳性。将负载有ES-GFP细胞的羊膜移植到兔结膜缺损区,术后荧光显微镜可在结膜上皮层检测到绿色荧光带,免疫组织化学检测结膜上皮层CK13表达阳性,CK3/CK12表达阴性,在重建的结膜上皮层可检测到BrdU核阳性细胞,未见异常增殖细胞。结论采用保存人羊膜负载小鼠ES细胞行兔结膜移植,小鼠ES细胞能在兔结膜基质存活并增殖。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 羊膜 结膜上皮细胞 诱导分化
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自体角膜缘干细胞结合结膜移植联合翼状胬肉切除术治疗原发性翼状胬肉的临床效果分析 被引量:2
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作者 兰晓文 吴强 《中国实用乡村医生杂志》 2019年第5期53-55,共3页
目的探讨自体角膜缘干细胞结合结膜移植联合翼状胬肉切除术治疗原发性翼状胬肉的效果。方法收集大同朝聚安康眼科医院2017年1-12月收治的93例(95眼)原发性翼状胬肉,随机分为观察组47例(48眼,行翼状胬肉切除联合自体角膜缘干细胞+结膜移... 目的探讨自体角膜缘干细胞结合结膜移植联合翼状胬肉切除术治疗原发性翼状胬肉的效果。方法收集大同朝聚安康眼科医院2017年1-12月收治的93例(95眼)原发性翼状胬肉,随机分为观察组47例(48眼,行翼状胬肉切除联合自体角膜缘干细胞+结膜移植术)、对照组46例(47眼,行翼状胬肉切除术),患者术后1 d、3 d、1周、2周、12个月时复诊,记录患者术后角膜上皮恢复时间及治疗效果和复发情况。结果角膜上皮修复时间:观察组(4.6±0.4)d,对照组(7.8±1.1)d,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组治愈47眼、复发1眼;对照组治愈39眼、复发8眼,观察组治愈率高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论自体角膜缘干细胞+结膜移植联合翼状胬肉切除术有利于术后角膜上皮恢复,复发率低,值得推广。 展开更多
关键词 翼状胬肉 切除 自体结膜干细胞移植 角膜上皮修复 效果
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