通过MAPK/ERK1/2信号通路探讨固本增骨方对MC3T3-E1成骨分化的影响

目的探讨固本增骨方含药血清对MC3T3-E1细胞增殖分化的影响及与MAPK/ERK1/2信号通路的关系。方法制备固本增骨方含药血清干预MC3T3-E1细胞,CCK-8法观察各组细胞增殖情况。ALP试剂盒、茜素红染色检测各组细胞成骨矿化能力。根据CCK-8检测、ALP活性检测与茜素红染色结果筛选最佳含药血清浓度及干预时间;将MC3T3-E1细胞分A、B、C、D 4组,分别加入空白血清、20%含药血清、空白血清+PD0325901、20%含药血清+PD0325901,采用RT-PCR检测各组细胞中ERK1/2、Runx2、BMP-2 mRNA表达水平,免疫印迹法Western blot检测各组细胞中ERK1/2、P-ERK1/2、Runx2、BMP-2蛋白表达水平。结果与空白对照组相比,10%、15%、20%、25%含药血清组均能促进MC3T3-E1细胞增殖能力,提高ALP活性,其中20%含药血清干预48 h效果最为显著(P<0.05);茜素红染色后镜下观察在浓度为20%时染色区域钙结节数量最为密集;与A组相比,B组ERK1/2、Runx2、BMP-2 mRNA及ERK1/2、P-ERK1/2、Runx2、BMP-2蛋白的表达水平明显增高(P<0.05);加入阻断剂PD0325901后,C组与D组上述指标的表达明显降低(P<0.05);与D组相比,C组ERK1/2、Runx2、BMP-2 mRNA及ERK1/2、P-ERK1/2、Runx2、BMP-2蛋白的表达水平更低(P<0.05)。结论固本增骨方含药血清能促进MC3T3-E1细胞的增殖及矿化,并上调成骨相关因子Runx2、BMP-2的表达,其作用机制可能与激活MAPK/ERK1/2通路有关。

固本增骨方治疗老年原发性骨质疏松的随机对照临床试验研究

目的观察固本增骨方治疗老年原发性骨质疏松的临床疗效。方法将确诊为老年原发性骨质疏松症的106例患者随机分为固本增骨方组(53例)和骨健康补充剂组(53例),骨健康补充剂组给予碳酸钙D3咀嚼片1片/次,1次/d;骨化三醇胶丸1粒/次,1次/d,1个月为1疗程,共治疗6个疗程,固本增骨方组在骨健康补充剂组治疗基础上,给予固本增骨方,每日1剂,水煎服,早晚各1次分服,1个月为1疗程,观察6个疗程后判定疗效,采用VAS评分、中医症候评分以及检测骨密度值进行疗效评价,并观察不良反应发生情况。结果治疗后固本增骨方组有效率为94.34%,明显高于阳性药物对照组的84.90%(P<0.05);治疗后,两组患者的VAS评分均较治疗前降低(P<0.05),固本增骨方组明显低于骨健康补充剂组(P<0.05);固本增骨方组和骨健康补充剂组治疗后骨密度值均较治疗前升高(P<0.05),治疗组高于骨健康补充剂组(P<0.05);治疗后两组患者的主要症状评分均较治疗前下降(P<0.05),固本增骨方组低于骨健康补充剂组(P<0.05);治疗后,固本增骨方组1例患者出现胃烧灼感;骨健康补充剂组出现2例恶心、纳差,1例患者出现皮肤过敏,停药后不良反应均自行消失,两组患者不良反应的差别无统计学意义(P>0.05)。结论固本增骨方治疗骨质疏松症患者安全有效,能够增加骨密度、缓解疼痛症状以及主要症状,是一种安全、有效、经济的治疗方法。