透性化处理酵母工程菌提高虫草素发酵产量

以酿酒酵母Saccharomyces cerevisiae S288C为底盘细胞,引入蛹虫草菌中虫草素合成关键基因cns1和cns2,成功构建了产虫草素的酿酒酵母工程菌COR12,经液体发酵10 d后虫草素产量达到(43.74±0.13)mg/L。采用细胞透性化技术,通过添加表面活性剂(吐温-60、吐温-80、SDS)、有机溶剂(乙醇、DMSO)、物理处理法(热激、超声、玻璃珠振荡)等改变细胞膜通透性,弱化胞内虫草素积累诱发的反馈抑制,促进胞内虫草素外排以实现虫草素高产。结果表明,在发酵第3天时添加0.4%SDS,7 d时虫草素发酵产量最高,达到(98.53±0.98)mg/L,较对照组提高366.30%。