复方鹿角霜对胶原诱导性关节炎模型小鼠抗炎作用研究

目的观察复方鹿角霜对小鼠胶原诱导性关节炎(CIA)体内相关炎症细胞因子的表达及滑膜组织病理学的影响。方法建立小鼠CIA模型,实验小鼠随机分为5组:空白对照组,模型对照组,复方鹿角霜总膏低、高剂量组(C1,C2组),雷公藤多苷片组。小鼠第一次免疫后,观察小鼠的一般情况,记录小鼠前后足爪病变发生情况。小鼠第二次免疫后,复方鹿角霜C1、C2组分别灌胃给予复方鹿角霜总膏2.5,5 g·kg-1·d-1,雷公藤多苷片组灌胃给予雷公藤多苷片13.6 g·kg-1·d-1,连续4周。小鼠给药结束后,取血分离血清,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-4(IL-4)的表达水平。取小鼠足踝关节,光镜观察关节滑膜组织病理学变化。结果与模型对照组比较,复方鹿角霜C1、C2组、雷公藤多苷片组血清TNF-α均明显降低;而复方鹿角霜组血清IL-4水平升高。模型对照组关节病理可见滑膜组织增生,各给药组关节病理形态有所改善。结论复方鹿角霜可减轻胶原诱发的小鼠关节炎红肿症状,其作用机制可能与降低炎性因子TNF-α、调节抑炎因子IL-4作用有关。

固相萃取-液质联用法用于乌鸡白凤丸中动物药的质量控制初探

目的:建立乌鸡白凤丸中鹿角胶、鹿角霜和鳖甲的鉴别和掺伪检查方法。方法:采用胰蛋白酶对乌鸡白凤丸样品酶解处理,利用固相萃取-超高效液相色谱-三重四极杆质谱(SPE-UPLC-QQQ)对样品中的鹿、鳖、猪、牛、马、驴、角鳖、佛罗里达鳖源性成分的专属性特征离子进行检测。结果:方法的专属性、精密度和灵敏度均符合分析检测的技术要求。12批样品检测到了处方中规定的鹿、鳖源性成分,部分样品也检出了处方中未规定的猪、牛源性成分。结论:所建立的方法经方法学验证,专属性强,为乌鸡白凤丸的质量控制及标准研究提供了参考。

补正续骨泡腾颗粒质量标准研究

目的:建立补正续骨泡腾颗粒的质量标准。方法:采用显微鉴别法对方中鹿茸进行显微定性鉴别,采用薄层色谱法对方中制何首乌、合欢花、骨碎补进行定性鉴别,采用高效液相色谱法测定续断中川续断皂苷Ⅵ含量。结果:薄层色谱斑点清晰,阴性液无干扰,显微特征明显,川续断皂苷Ⅵ在3.465~20.79μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9999),平均回收率为99.8%。结论:该方法准确,专属性强,重复性好,可以作为控制补正续骨泡腾颗粒质量的方法。

论鹿角霜炮制方法的变迁

对鹿角霜炮制方法的历史沿革进行了探讨。鹿角霜产生于隋代,在唐代仍未引起重视。宋代随着鹿角胶使用的增加,鹿然霜开始进入医家视野。元代创立了鹿角霜炮制的基本法式。明代进一步改进了其炮制的工艺,完善了其药性理论。清代对鹿角霜的炮制工艺进行了反思,认为鹿角霜应该将胶质留在霜中,并重新定义了鹿角霜的概念。建国以来历版《中华人民共和国药典》中关于鹿角霜的认识与明代的炮制理念相同。认为现代鹿角霜研究应注意:(1)鹿角霜应为胶霜的复合体;(2)应开展胶霜合用工艺的比较研究;(3)应重新定义鹿角粉与鹿角霜;(4)鹿角霜应入丸散剂;(5)应进一步探讨煮霜过程中的热水频添工艺原理。

《中华人民共和国药典》收载的鹿源药材中γ-氨基丁酸含量分析

目的对《中华人民共和国药典》收载的鹿源药材中γ-氨基丁酸进行含量分析。方法采用柱前衍生UPLC-PDA法对不同基原、形态、采收时期,不同加工方式和部位鹿茸及鹿源药材中γ-氨基丁酸进行含量分析。结果鹿茸、鹿角、鹿角胶和鹿角霜中γ-氨基丁酸含量差异有统计学意义(P<0.05),以鹿茸(0.35-2.91 g/kg)最高,鹿角胶(0.71-0.94 g/kg)其次,鹿角和鹿角霜含量(0-0.13 g/kg)最低;不同基原鹿茸中γ-氨基丁酸含量以花鹿茸最高;不同形态鹿茸中γ-氨基丁酸含量以二杠最高,三岔其次,毛桃最低;不同生长阶段鹿茸中γ-氨基丁酸含量以二茬茸最高,激素催生二茬茸最低;不同加工方式及部位对鹿茸中γ-氨基丁酸含量影响较大,煮炸与冻干相比能较大程度保留鹿茸中的γ-氨基丁酸,单位质量排血茸中γ-氨基丁酸含量显著高于带血茸(P<0.05),蜡片、粉片、纱片和骨片中γ-氨基丁酸含量逐渐递减。结论γ-氨基丁酸在鹿源药材中广泛存在且差异显著,尤其在不同基原、形态、采收时期,不同加工方式和部位鹿茸中,可以考虑将γ-氨基丁酸作为鹿源药材的质量控制成分。

复方鹿角霜浸膏对佐剂性关节炎大鼠的抗炎作用

目的研究复方鹿角霜浸膏对佐剂性关节炎大鼠的抗炎作用。方法弗氏完全佐剂制备佐剂性关节炎大鼠模型,大鼠随机分成空白组,模型组,醋酸泼尼松片组,雷公藤多苷片组,复方鹿角霜浸膏高、中、低剂量组(1 000、500、250 mg/kg),观察大鼠体质量、精神状态的变化及关节损伤程度。治疗后,ELISA法测定TNF-α、IL-6、IL-10、PGE-2水平,HE染色评估踝关节病理变化。结果模型组大鼠体质量、IL-10水平显著低于空白组,TNF-α、IL-6、PGE-2水平及关节损伤程度显著升高(P<0.01);复方鹿角霜高、中剂量组及醋酸泼尼松片组、雷公藤多苷片组上述指标均较模型组显著好转。结论复方鹿角霜浸膏可通过降低促炎细胞因子分泌、升高抗炎因子水平、减轻炎性反应及组织损伤程度来治疗类风湿关节炎。

复方鹿角霜片的质量控制

目的建立复方鹿角霜片的质量控制方法。方法采用薄层色谱法对制剂中鹿衔草、忍冬藤进行定性鉴别,采用高效液相色谱法测定忍冬藤中的马钱苷、当药苷,鹿衔草中的水晶兰苷的含量。结果定性鉴别薄层色谱斑点清晰,特征明显,专属性强;高效液相色谱法测定含量,专属性强,在范围内水晶兰苷、马钱苷、当药苷进样浓度与色谱峰面积均呈良好的线性关系(r>0.999),平均回收率分别为97.2%,98.4%,96.0%,RSD分别为1.4%,0.8%,0.8%。结论利用薄层色谱法定性、高效液相色谱法定量,方法简便准确,重复性好,可有效控制复方鹿角霜片的质量。

复方鹿角霜片水提醇沉工艺研究

目的:优选复方鹿角霜片水提醇沉工艺。方法:以干浸膏得率和水晶兰苷、马钱苷和当药苷的总含量作为评价指标,采用L9(34)正交表优选复方鹿角霜片水提醇沉工艺。结果:复方鹿角霜片最佳水提工艺为药材12倍量的水提取3次,每次2h;最佳醇沉工艺为浓缩药液相对密度1.10～1.15,药液含醇量为65%,静置时间24h(或以上)。结论:该水提醇沉工艺科学合理,为复方鹿角霜片生产提供理论依据。

鹿角霜治疗恶性肿瘤放化疗后白细胞减少症的临床疗效及安全性评价

目的评价鹿角霜治疗恶性肿瘤放化疗后白细胞减少症的临床疗效及安全性。方法将60例恶性肿瘤放化疗后白细胞减少症、中医辨证为肾阳虚的患者随机分为试验组30例和对照组30例。对照组予以口服利可君40 mg,每日3次;试验组予以口服鹿角霜颗粒100 g,每天1次。2组患者1个疗程为2周,均服药3个疗程。比较2组治疗前后的白细胞数量、临床疗效以及不良反应发生率。结果治疗后,试验组总有效率为86.67%明显高于对照组73.33%(P<0.05)。治疗后,2组患者白细胞数量较治疗前均明显上升(P<0.05),且试验组白细胞数量明显高于对照组(P<0.05)。2组患者的不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论鹿角霜相比于利可君治疗恶性肿瘤放化疗后白细胞减少症的疗效更佳,且无明显不良反应,值得在临床中推广。

《中华人民共和国药典》收载的鹿源药材中胶原蛋白对比分析

目的:研究《中华人民共和国药典》收载的鹿源药材中胶原蛋白含量,以期为鹿源药材的质量评价和控制提供理论依据。方法:参考GB 5009.5-2016方法,通过杜马斯燃烧法测定鹿源药材中蛋白质含量,折算系数为6.25;在NY/T 1618-2008方法基础上做略微改动,采用氨基酸自动分析法测定鹿源药材中4个构成胶原蛋白的氨基酸含量,进而折算胶原蛋白含量,折算系数为10。结果:梅花鹿的鹿茸、鹿角、鹿角脱盘、鹿角胶、鹿角脱盘胶、鹿角霜和鹿角脱盘霜中的胶原蛋白含量分别为391.0、157.0、159.8、716.4、735.0、12.2和13.2 mg·g-1;马鹿的鹿茸、鹿角、鹿角脱盘、鹿角胶、鹿角脱盘胶、鹿角霜和鹿角脱盘霜中的胶原蛋白含量分别为382.4、154.6、157.1、708.8、714.3、10.9和12.8 mg·g-1。结论:鹿源药材中胶原蛋白含量以鹿角胶最高,鹿茸其次,鹿角次之,鹿角霜最低。鹿源药材中4个构成胶原蛋白氨基酸和胶原蛋白含量差异很大,可以考虑以羟脯氨酸、脯氨酸、甘氨酸、丙氨酸和胶原蛋白含量作为鹿源药材的质量评价标准。

2015年版《中华人民共和国药典》收载的鹿源药材中硫酸软骨素含量分析

目的:研究2015年版《中华人民共和国药典》(简称《中国药典》)收载的鹿源药材中硫酸软骨素的含量差异。方法:采用稀碱-浓盐法提取,硫酸软骨素ABC酶酶解样品中的硫酸软骨素,应用高效液相色谱法对样品中的总硫酸软骨素及硫酸软骨素A、B、C含量进行测定;色谱条件:Hypersil SAX强阴离子硅胶色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以2 mol·L^(-1)的氯化钠溶液(盐酸调pH至3.5)和水(盐酸调pH至3.5)为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长232 nm,柱温40℃。结果:梅花鹿鹿茸、鹿角(鹿角脱盘)、鹿角胶(鹿角脱盘胶)、鹿角霜(鹿角脱盘霜)中硫酸软骨素含量分别为2.06、0.46(0.42)、0.93(1.10)、0.22(0.17)g·kg^(-1);马鹿鹿茸、鹿角(鹿角脱盘)、鹿角胶(鹿角脱盘胶)、鹿角霜(鹿角脱盘霜)中硫酸软骨素含量分别为1.83、0.41(0.34)、0.91(0.87)、0.19(0.15)g·kg^(-1)。结论:《中国药典》收载的鹿源药材中硫酸软骨素的含量差异很大,鹿茸中的最高,鹿角胶、鹿角、鹿角霜中的依次递减。