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Effect of Implantation Machine Parameters on N^+ ion Implantation for Upland Cotton(Gossypium hirsutum L.)Pollen 被引量:1
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作者 岳洁瑜 余立祥 +1 位作者 吴跃进 唐灿明 《Plasma Science and Technology》 SCIE EI CAS CSCD 2008年第5期640-644,共5页
Effect of parameters of ion implantation machine, including ion energy, total dose, dose rate, impulse energy and implantation interval on the pollen grains of upland cotton implanted with nitrogen ion beam were studi... Effect of parameters of ion implantation machine, including ion energy, total dose, dose rate, impulse energy and implantation interval on the pollen grains of upland cotton implanted with nitrogen ion beam were studied. The best parameters were screened out. The results also showed that the vacuum condition before the nitrogen ion implantation does not affect the pollen viability. 展开更多
关键词 nitrogen ion energy total upland cotton dose dose rate impulse energy INTERVAL pollen
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Evaluation of Impact of Pollen Grains from Bt,Bt/CpTITransgenic Cotton and Bt Corn Plants on the Growth andDevelopment of the Mulberry Silkworm,Bombyx moriLinnaeus (Lepidoptera:Bombycidae)
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作者 LI Wen-dong, YE Gong-yin, WU Kong-ming, WANG Xiao-qi and GUO Yu-yuan(Institute of Plant Protection , Chinese Academy of Agricultural Sciences , Beijing 100094 , P. R. China College ofPlant Protection, Shenyang Agricultural University, Shenyang 110161 , P.R.China Institute of AppliedEntomology, Zhejiang University , Hangzhou 310029 , P.R.China) 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2002年第12期1334-1343,共10页
The S-endotoxin genes of Bacillus thuringiensis (Bt) and proteinase inhibitor (PI) genes are two kinds of genes popularly used for developing transgenic plants resistant to insect pests. To clarify whether there is an... The S-endotoxin genes of Bacillus thuringiensis (Bt) and proteinase inhibitor (PI) genes are two kinds of genes popularly used for developing transgenic plants resistant to insect pests. To clarify whether there is any risk concerning the effects of pollens from these transgenic crops on non-target insects with economic importance, such as the effects on the growth and development as well as cocoon quality of the silkworm, Bombyx mori Linnaeus, a series of feeding experiments were conducted, using pollens from transgenic cotton or corn containing cry 1Ac, cry1A+CpTI or crylAb genes, compared with pollens from non-transgenic normal cotton and corn as well as the non-pollen treatment. In contrast to the latter ones, pollens from transgenic plants showed no significant adverse effects on larval mortality, cocoon weight, pupa weight, cocoon shell weight, pupation rate, emergence rate and fecundity of the silkworm after neonates were fed with the pollens for 72 h. In addition, no dosage effects of pollens were found. Though the duration of 1st instar larvae was prolonged in the case of feeding with transgenic pollens as compared with those of the non-pollen treatment , but they were not significantly different from those fed with pollens from non-transgenic cotton or corn. Meanwhile, the body weight of the 3rd instar molters fed with transgenic pollens was obviously different from those for non-pollen treatment, and was all significantly heavier than that of the controls. Consequently, it is considered that the adverse effect of pollens from transgenic insect-resistant cotton and corn on the growth and development of the silkworm is negligible. 展开更多
关键词 Bt/CpTI transgenic cotton Bt transgenic corn pollen Bombyx mori Growth and development
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乳酸酚棉兰染色在气传花粉鉴定中的应用
3
作者 张续德 冯少杰 +3 位作者 刘菁菁 王昱琳 刘凤霞 张芹 《中华临床免疫和变态反应杂志》 CAS 2024年第4期383-388,共6页
目的探索乳酸酚棉兰(lactophenol cotton blue,LPCB)染色方法在气传花粉镜检中的潜在应用价值。方法分别采用碱性复红(basic fuchsin,BF)染色与LPCB染色鉴定潍坊市春季、夏秋季主要气传花粉并记录每日花粉粒数。结果在鉴定构树花粉、悬... 目的探索乳酸酚棉兰(lactophenol cotton blue,LPCB)染色方法在气传花粉镜检中的潜在应用价值。方法分别采用碱性复红(basic fuchsin,BF)染色与LPCB染色鉴定潍坊市春季、夏秋季主要气传花粉并记录每日花粉粒数。结果在鉴定构树花粉、悬铃木属花粉、蒿属花粉、苋科花粉和禾本科花粉方面,LPCB染色较BF染色更具优势,而在鉴定柏科花粉方面,BF染色更具优势。此外,潍坊市夏秋季优势花粉近40年无明显变化,由于绿化树种的改变,悬铃木属花粉已成为本地春季的主要致敏花粉。结论LPCB染色可同时用于真菌和气传花粉的鉴定,在保证鉴定准确性的同时,节约时间成本。 展开更多
关键词 气传花粉 镜检 碱性复红 乳酸酚棉兰 染色
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Cloning and Ectopic Expression of <i>ScYCF</i>1 Gene from <i>Saccharomyces cerevisiae</i>in Cotton
4
作者 Min Mu Na Shu +8 位作者 Xuke Lu Xiugui Chen Shuai Wang Junjuan Wang Delong Wang Weili Fan Lixue Guo Chao Chen Wuwei Ye 《Agricultural Sciences》 2018年第1期53-68,共16页
Yeast cadmium factor 1 (YCF1), is a member of the ATP-binding cassette (ABC) transporter family. To explore the functions of YCF1 of Saccharomyces cerevisiae (ScYCF1) in the cotton, ScYCF1 was cloned from Saccharomyce... Yeast cadmium factor 1 (YCF1), is a member of the ATP-binding cassette (ABC) transporter family. To explore the functions of YCF1 of Saccharomyces cerevisiae (ScYCF1) in the cotton, ScYCF1 was cloned from Saccharomyces cerevisiae As2.375, with the full-length of 4548 bp. The bioinformatics analysis revealed that the largest component of ScYCF1 protein is leucine (12%). ScYCF1 is alkaline and positive charged, stable, and hydrophilic protein. The predictive secondary structure is mainly composed of α-helix areas, random coils and β-sheets. We constructed the pBI121-ScYCF1:GFP infusion expression vector and verified it by enzyme ingestion. The transient expression results of cotton pollen showed that the green fluorescence phenomenon of three kinds of upland cotton pollen significantly increased after transforming ScYCF1. The salt sensitive material upland cotton CCRI12 was transformed in vivo simultaneously, and the germination ability of trans-ScYCF1-gene T0 seeds was much better than the acceptor material CCRI12 under the stress of 100 mM NaCl saline solution. According to the gene nucleotide sequences, four pairs of primers were designed for molecular detection of T0 generation, and the sequencing results of PCR products of four specific primers evidence that the transgene is successful. Salt tolerance analysis of leaf discs of identified transgenic cotton showed that the chlorophyll content of leaf discs of transgenic cotton was higher than the content of the control cotton under salt stress. ScYCF1 gene was cloned and introduced into cotton, showing that ScYCF1 plays an important role in improving the salt tolerance of cotton. 展开更多
关键词 SACCHAROMYCES CEREVISIAE ScYCF1 UPLAND cotton pollen Instantaneous Expression Molecular Detection
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提高棉花花粉管通道法转化率的研究 被引量:19
5
作者 马盾 黄乐平 +4 位作者 黄全生 孟庆玉 危晓薇 陈勋基 美丽古丽 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期10-12,共3页
针对棉花不同受体材料、果台、棉铃大小、注射时间以及操作技术的研究 ,逐步总结出一套适合于新疆的实用操作方法。使外源 DNA通过花粉管通道导入技术得到了不断提高 ,注射棉铃未落铃率平均达到2 5 %以上 ,最高达到 5 6% ,大大提高了外... 针对棉花不同受体材料、果台、棉铃大小、注射时间以及操作技术的研究 ,逐步总结出一套适合于新疆的实用操作方法。使外源 DNA通过花粉管通道导入技术得到了不断提高 ,注射棉铃未落铃率平均达到2 5 %以上 ,最高达到 5 6% ,大大提高了外源 DNA的转化率 。 展开更多
关键词 棉花 花粉管通道法 棉铃 外源DNA 受体材料 注射时间 植株 高表达 研究 操作方法
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花粉管通道法在棉花转基因上的应用 被引量:15
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作者 马盾 黄乐平 +3 位作者 黄全生 李建平 王浩 李晓荣 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2004年第1期29-30,共2页
利用花粉管通道法进行棉花转基因,已在我国运用了10多年,但到目前,转基因的成功率还很低,经过近年来的摸索和研究,在新疆自然植棉环境下,试图通过技术改良和方法创新,提高转基因成功率,使其更好地为育种服务。
关键词 花粉管通道法 棉花 转基因 转导时间 注射器 注射方法
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棉花洞A雄性不育系花药发育的mRNA差别显示 被引量:30
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作者 侯磊 肖月华 +3 位作者 李先碧 王文锋 罗小英 裴炎 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第4期359-363,共5页
应用cDNA AFLP(Amplifiedfragmentlengthpolymorphism)技术 ,分析了棉花洞A雄性不育和可育材料在花药发育过程中花粉发育相关基因表达的差异。结果表明 :在花药发育的相同时期 ,不育和可育花粉cDNA AFLP的谱带在单核期的差异大于减数分... 应用cDNA AFLP(Amplifiedfragmentlengthpolymorphism)技术 ,分析了棉花洞A雄性不育和可育材料在花药发育过程中花粉发育相关基因表达的差异。结果表明 :在花药发育的相同时期 ,不育和可育花粉cDNA AFLP的谱带在单核期的差异大于减数分裂期。在花粉发育过程中 ,花粉发育相关基因的表达具有时空特异性。共回收了 6 4条差异cDNA片段 ,随机选择 3个片段标记为探针 ,RNA斑点杂交分析表明 ,GHA2 7具有花器官组织特异性 ,仅在花器官中表达 ;GHA2 8、GHA4 7则具有花药组织特异性且仅在可育花药中表达。序列相似性比较表明 :GHA2 7与植物ADP ribosylationfactor (ARF)基因有较高的相似性 ,而GHA2 8、GHA4 展开更多
关键词 棉花 花粉发育 基因表达 CDNA-AFLP 洞A雄性不育系 MRNA差别显示
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高温对棉花花粉生活力的影响 被引量:21
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作者 郑冬官 方其英 +1 位作者 蔡永立 黄德祥 《棉花学报》 CSCD 北大核心 1995年第1期31-32,共2页
用三种方法测定高温处理后棉花花粉的生活力,评述了各种测定方法的相对价值。开花前的花粉恒温处理10小时以后,用PMDA法测定,从33℃至42℃,花粉都能萌发。用花柱基部花粉管穿孔计数法测定,35℃育性消失。用培养基发芽... 用三种方法测定高温处理后棉花花粉的生活力,评述了各种测定方法的相对价值。开花前的花粉恒温处理10小时以后,用PMDA法测定,从33℃至42℃,花粉都能萌发。用花柱基部花粉管穿孔计数法测定,35℃育性消失。用培养基发芽法测定,39℃经3小时和5小时,花粉的萌发率均很低。 展开更多
关键词 棉花 花粉 温度 活力 测定
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棉花不同GbU6启动子截短克隆及功能鉴定 被引量:12
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作者 雷建峰 李月 +4 位作者 徐新霞 阿尔祖古丽.塔什 蒲艳 张巨松 刘晓东 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期675-683,共9页
U6启动子是CRISPR/Cas9基因组编辑载体系统中驱动sgRNA转录的重要元件,而使用较短序列的启动子也是构建CRISPR/Cas9基因组编辑载体的基本要求之一。将已经克隆的海岛棉GbU6-5P启动子(长度为1166 bp),采用Transfer PCR方法成功地截出6个... U6启动子是CRISPR/Cas9基因组编辑载体系统中驱动sgRNA转录的重要元件,而使用较短序列的启动子也是构建CRISPR/Cas9基因组编辑载体的基本要求之一。将已经克隆的海岛棉GbU6-5P启动子(长度为1166 bp),采用Transfer PCR方法成功地截出6个长度不同的U6启动子,其长度分别为672、468、358、280、202和105 bp,并分别构建了6个启动子驱动的GUS融合植物表达载体。将构建好的6个GbU6-5Ps::GUS-pCAMBIA1300与初始克隆的GbU6-5P::GUS-pCAMBIA1300植物表达载体一起利用农杆菌真空渗透转化法分别转染棉花花粉。GUS组织化学染色显示,克隆到的7个不同截短大小的GbU6-5P启动子均能驱动GUS基因在棉花花粉中转录,棉花花粉被染成蓝色但颜色深浅存在显著差异。结果显示启动子长度越短,其转录活性越高。而且另外两种棉花U6启动子GbU6-1P和GbU6-7P也表现出类似的结果。本研究克隆了3个短小的、在棉花花粉细胞中具有转录功能的GbU6启动子。结果显示更短的U6启动子具有更高的转录活性,而且这一特点在不同U6启动子上具有共性。这预示着使用更短U6启动子不仅符合构建CRISPR/Cas9基因组编辑载体的要求,而且会提高sgRNA的转录水平,进而可能提高基因组编辑效率。 展开更多
关键词 棉花 GbU6启动子 截短克隆 真空渗透 棉花花粉
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氮离子注入对棉花花粉形态和生活力及育性的影响 被引量:10
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作者 程备久 李展 +4 位作者 田秋元 王公明 林毅 余增亮 何建军 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期85-89,共5页
本文分析了氮离子注入棉花花粉对其形态,生活力和育性的影响。结果表明:氮离子束对花粉壁有明显的刻蚀作用,并能促进花粉粒间的融合。离子注入导致花粉管生长受抑制;过氧化物酶同工酶活性增强,酶带数目增加;萌发率、花粉管穿过花... 本文分析了氮离子注入棉花花粉对其形态,生活力和育性的影响。结果表明:氮离子束对花粉壁有明显的刻蚀作用,并能促进花粉粒间的融合。离子注入导致花粉管生长受抑制;过氧化物酶同工酶活性增强,酶带数目增加;萌发率、花粉管穿过花柱到达胚珠率、结籽率和成铃率均较对照显著降低。离子注入剂量与花粉损伤程度的大小呈正相关。经20×10 ̄(15)N ̄+/cm ̄2剂量处理的花粉,其萌发率降为对照的52.3%;花粉管长度仅为对照的17.1%;而且未获得成熟的种子。文中建议棉花花粉离子束诱变的剂量范围以5×10 ̄(15)N ̄+/cm ̄2-10×10 ̄(15)N ̄+/cm ̄2为宜,并且讨论了离子注入技术在植物外源基因导入和细胞融合等方面的应用。 展开更多
关键词 棉花 花粉 育性 氮离子 生活力
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提高棉花花粉管通道技术转化率的研究 被引量:10
11
作者 李静 韩秀兰 +1 位作者 沈法富 刘莲 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2005年第2期67-71,共5页
利用花粉管通道技术将含有IPT基因的双元表达载体质粒 pBG121 导入不同的陆地棉品种(中棉所10号、中棉所24和中棉所36)中,采取正交试验设计,探讨基因型、导入时间、导入DNA的浓度和化学诱变剂的浓度对棉花转化率的影响,筛选出了适宜提... 利用花粉管通道技术将含有IPT基因的双元表达载体质粒 pBG121 导入不同的陆地棉品种(中棉所10号、中棉所24和中棉所36)中,采取正交试验设计,探讨基因型、导入时间、导入DNA的浓度和化学诱变剂的浓度对棉花转化率的影响,筛选出了适宜提高棉花花粉管通道技术转化率的方法。应用结果表明,改进方法的转化率比传统的方法提高两倍。 展开更多
关键词 花粉管通道技术 棉花 中棉所 陆地棉 化学诱变剂 品种 转化率 研究 正交试验设计 导入
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转Bt-cry1Ac棉花花粉对意大利蜜蜂生长发育的影响 被引量:9
12
作者 田岩 张永军 +3 位作者 吴孔明 赵奎军 彭于发 郭予元 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期464-467,共4页
研究了取食转Bt-cry1Ac棉花花粉对意大利蜜蜂的影响,主要包括意大利蜜蜂的生长发育、体内酶活性的变化.结果发现,取食转Bt-cry1Ac基因棉花花粉的意大利蜜蜂与取食非转基因亲本棉花花粉的蜜蜂(CK)相比,4、5、6日龄幼虫体重差异不显著,幼... 研究了取食转Bt-cry1Ac棉花花粉对意大利蜜蜂的影响,主要包括意大利蜜蜂的生长发育、体内酶活性的变化.结果发现,取食转Bt-cry1Ac基因棉花花粉的意大利蜜蜂与取食非转基因亲本棉花花粉的蜜蜂(CK)相比,4、5、6日龄幼虫体重差异不显著,幼虫及蛹的历期也没有明显差异.取食转Bt-cry1Ac基因棉花花粉的意大利蜜蜂6日龄幼虫体内的谷胱甘肽-S-转移酶、总蛋白酶活力与CK相比,没有显著差异.取食转Bt-cry1Ac基因棉花花粉的意大利蜜蜂幼虫体内的α-乙酸萘酯酶、乙酰胆碱酯酶活力极显著高于CK,强碱性、弱碱性类胰蛋白酶活力极显著低于CK,类胰凝乳蛋白酶活力显著低于CK.另外,采用酶联免疫(ELISA)方法在取食转Bt-cry1Ac基因棉花花粉的蜜蜂6日龄幼虫体内能够检测到Bt杀虫蛋白. 展开更多
关键词 转Bt-cry1Ac基因棉花 花粉 意大利蜜蜂 生长发育 酶活性
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利用目的基因转化技术培育棉花抗病新品种 被引量:37
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作者 乐锦华 祝建波 +7 位作者 崔百明 朱新霞 王爱英 陈正华 刘桂珍 李国英 简桂良 吴刚 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2002年第3期173-178,共6页
用花粉管通道法将菜豆几丁质酶基因与烟草 β 1、3葡聚糖酶基因双价植物表达载体pBLGC导入新疆棉花主栽品种 (系 )系 5 5 0、82 2、130 4、石远 32 1。通过卡那霉素检测、PCR Southern验证、抗黄萎病、枯萎病性筛选 ,得到抗病性良好且... 用花粉管通道法将菜豆几丁质酶基因与烟草 β 1、3葡聚糖酶基因双价植物表达载体pBLGC导入新疆棉花主栽品种 (系 )系 5 5 0、82 2、130 4、石远 32 1。通过卡那霉素检测、PCR Southern验证、抗黄萎病、枯萎病性筛选 ,得到抗病性良好且遗传性稳定的转基因棉花。经过 6年 10个世代的选育 ,育成抗枯萎病、抗 (耐 ) 展开更多
关键词 目的基因转化技术 棉花 枯萎病 黄萎病 转基因棉花 花粉管通道法 抗病品种 良种培育
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转基因抗早衰棉的获得 被引量:10
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作者 李静 沈法富 +1 位作者 于东海 韩秀兰 《西北植物学报》 CAS CSCD 2004年第8期1419-1423,共5页
利用花粉管通道技术将含有抑制衰老嵌合基因PCSAG12-ipt的pBG121质粒转入早衰型陆地棉品种中棉所10号中,通过对T1代植株进行卡那霉素田间筛选、PCR检测及GUS组织化学染色,获得了12株转基因棉花.在棉花发育进入衰老时期,对转基因植株进... 利用花粉管通道技术将含有抑制衰老嵌合基因PCSAG12-ipt的pBG121质粒转入早衰型陆地棉品种中棉所10号中,通过对T1代植株进行卡那霉素田间筛选、PCR检测及GUS组织化学染色,获得了12株转基因棉花.在棉花发育进入衰老时期,对转基因植株进行叶绿素和细胞分裂素含量的测定及形态观察,结果表明转基因植株的衰老得到延迟. 展开更多
关键词 棉花 花粉管通道法 异戊烯基转移酶 抗早衰
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陆地棉花粉管通道形成时期的研究 被引量:7
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作者 杨书华 倪万潮 +3 位作者 葛才林 朱静 王泽港 罗时石 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期62-65,共4页
用石蜡切片法观察陆地棉的花粉管生长、受精和受精卵分裂过程及花粉管通道形成时期。结果表明:①授粉后15h花粉管通过珠孔进入胚囊;②授粉后18~21h,精子和卵细胞开始融合,24h后形成一个核仁的受精卵;③授粉后48h,始见胚分裂;授... 用石蜡切片法观察陆地棉的花粉管生长、受精和受精卵分裂过程及花粉管通道形成时期。结果表明:①授粉后15h花粉管通过珠孔进入胚囊;②授粉后18~21h,精子和卵细胞开始融合,24h后形成一个核仁的受精卵;③授粉后48h,始见胚分裂;授粉后72h,早期胚形成;④应用花粉管通道法对棉花导入外源DNA的适宜时期为授粉后18~48h。 展开更多
关键词 陆地棉 花粉管通道 石蜡切片法
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盐穗木耐盐基因通过花粉管通道法对棉花遗传转化的研究 被引量:9
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作者 王志才 廖茂森 +3 位作者 木合热皮业·艾尔肯 徐建辉 李春平 张富春 《分子植物育种》 CAS CSCD 2011年第2期180-184,共5页
以新疆主栽陆地棉品种为实验材料,通过花粉管通道法导入盐穗木耐盐相关基因HcNHX1和HcVP1。经过连续两代筛选繁育,结果显示:外源基因已经整合进棉花受体材料基因组中,并且在RNA水平有表达;外源基因对T1代棉花转基因植株生长影响很大,表... 以新疆主栽陆地棉品种为实验材料,通过花粉管通道法导入盐穗木耐盐相关基因HcNHX1和HcVP1。经过连续两代筛选繁育,结果显示:外源基因已经整合进棉花受体材料基因组中,并且在RNA水平有表达;外源基因对T1代棉花转基因植株生长影响很大,表现为生长势弱,植株矮小,株铃少,但T2代的棉花转基因植株在株高、果枝数和株铃等方面均有不同程度的恢复。 展开更多
关键词 耐盐基因 新疆主栽棉花 花粉管通道法 遗传转化
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酵母耐盐相关基因HAL1在棉花中的功能表达 被引量:4
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作者 穆敏 舒娜 +6 位作者 王帅 郭丽雪 樊伟丽 阴祖军 王俊娟 王德龙 叶武威 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第14期2651-2661,共11页
【目的】克隆酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)耐盐基因HAL1(halotolerance)并转化棉花,探究该基因在棉花中的功能,进一步探究酵母耐盐相关基因在高等植物中的具体功能。【方法】根据随NCBI核酸数据库中酵母耐盐基因HAL1的mRNA全长... 【目的】克隆酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)耐盐基因HAL1(halotolerance)并转化棉花,探究该基因在棉花中的功能,进一步探究酵母耐盐相关基因在高等植物中的具体功能。【方法】根据随NCBI核酸数据库中酵母耐盐基因HAL1的mRNA全长序列信息,利用RT-PCR技术从酿酒酵母AS2.375中克隆该基因。选择酶切位点XbaⅠ和SmaⅠ对表达载体pBI121::GFP进行双酶切,采用In-Fusion技术构建pBI 121-ScHAL1::GFP融合表达载体。以自发荧光较弱的陆地棉品种Y-2067、ZA-23、GZ-2的花粉为材料,用基因枪轰击棉花花粉进行瞬时表达研究。采用基因枪活体转化技术将外源基因表达载体pBI121-HAL1::GFP转化棉花盐敏感材料中s9612,获得T_0棉花转基因种子。用100mol·L^(-1)NaCl盐溶液对转基因T_0种子进行耐盐性发芽试验,并进行分子检测,对鉴定出的转基因植株进行叶盘耐盐性分析。【结果】从酿酒酵母As2.375中克隆耐盐基因ScHAL1,基因全长885 bP,共编码294个氨基酸。对其序列进行分析,发现HAL1蛋白中丝氨酸所占比例最大,整个蛋白呈碱性且带正电,属于亲水性蛋白。根据蛋白二级结构预测结果,推测该蛋白的结构功能域可能主要由无规则卷曲和β-折叠片构成。棉花花粉瞬时表达结果表明,转化HAL1后,3种陆地棉花粉的绿色荧光现象都明显增强,说明该基因可以在这3种陆地棉的花粉中表达。用100 mol·L^(-1)NaCl盐溶液对转基因棉花T_0种子和受体材料中s9612自交种进行胁迫,发现转基因种子萌发能力明显强于受体材料,表明HAL1可以提高种子耐盐性。根据基因核苦酸序列设计2对引物对T_0转基因棉花幼苗进行分子检测,将纯化后的PCR产物进行直接测序,测序结果证明转基因成功。对鉴定出的转基因植株进行叶盘耐盐性分析发现;在600 mol·L^(-1)NaCl和400 mol·L^(-1)NaCl盐胁迫下转基因植株叶盘叶绿素含量均高于对照植株,且在600 mol·L^(-1)NaCl溶液胁迫后,转HAL1植株叶绿素含量反而高于400 mol·L^(-1)NaCl溶液处理后的叶盘。【结论】成功从酿酒酵母中克隆基因HAL1;酵母HAL1对提高棉花耐盐性具有重要作用。 展开更多
关键词 酵母 HAL1 陆地棉 花粉瞬时表达 分子检测
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花粉管通道法导入标记DNA在棉花胚珠内的分布 被引量:7
18
作者 杨书华 倪万潮 +3 位作者 葛才林 朱静 王泽港 罗时石 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期13-16,共4页
通过花粉管通道法将[α3-2P]dATP标记的DNA导入科棉1号,测量标记DNA在胚珠内的放射性活度并进行放射性自显影观察,以求获得陆地棉导入外源DNA的最佳时期和外源DNA在胚珠内的分布情况。结果表明,导入的外源DNA能进入到胚珠中;棉花授粉33... 通过花粉管通道法将[α3-2P]dATP标记的DNA导入科棉1号,测量标记DNA在胚珠内的放射性活度并进行放射性自显影观察,以求获得陆地棉导入外源DNA的最佳时期和外源DNA在胚珠内的分布情况。结果表明,导入的外源DNA能进入到胚珠中;棉花授粉33h时通过滴涂和注射法导入标记DNA在胚珠内的放射性活度测量值均较高;而滴涂法的放射性活度明显低于注射法;胚珠内银粒的分布较明显,标记外源DNA的胚珠内银粒远多于对照。 展开更多
关键词 陆地棉 花粉管通道 放射性自显形法
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农杆菌真空渗透法转化棉花花粉的初步研究 被引量:7
19
作者 张燕红 黄乐平 +1 位作者 周小云 王冬梅 《棉花学报》 CSCD 北大核心 2008年第5期354-358,共5页
以陆地棉花粉为受体,利用农杆菌真空渗透法将外源Susy基因转入新陆早19,对转化因素作了初步研究。结果表明,花粉在45%蔗糖浓度的花粉悬浮液中能维持适当渗透压,破损率最低;在-80Pa压力下,菌液OD600值在0.6~1.2范围内,真空渗入时间在15... 以陆地棉花粉为受体,利用农杆菌真空渗透法将外源Susy基因转入新陆早19,对转化因素作了初步研究。结果表明,花粉在45%蔗糖浓度的花粉悬浮液中能维持适当渗透压,破损率最低;在-80Pa压力下,菌液OD600值在0.6~1.2范围内,真空渗入时间在15~25min内,能维持较低花粉破损率及较高瞬间转化率;对自然花粉、农杆菌浸染的花粉及农杆菌真空渗透的花粉,分别进行GUS瞬时检测,未抽真空的花粉未被染色,而辅助真空处理的花粉部分变成蓝色,后将其授粉于已去雄的柱头上,观察到花粉管的伸长,说明抽真空后部分花粉仍有活力。 展开更多
关键词 农杆菌真空渗透法 陆地棉 花粉 转化
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花粉管通道法转基因棉花后代的遗传特性 被引量:9
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作者 马盾 周小云 黄乐平 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期147-149,共3页
利用花粉管通道法获得的转基因棉花,随着自交繁殖代数的增加,转基因植株与非转基因植株的分离比例,不符合孟德尔遗传规律,遗传分离比例变化较大,存在着遗传分离多样性,而且有的遗传不稳定。
关键词 棉花 花粉管 后代 遗传
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