一种牛乳酪蛋白肽粉复合物对睡眠的改善作用

该研究探讨一包含牛乳酪蛋白肽粉、酸枣仁、百合、γ-氨基丁酸的复合物改善睡眠的功效。利用秀丽隐杆线虫模型研究复合物及复合物中各个功效成分改善睡眠的效果,然后使用体内小鼠模型评价复合物改善睡眠作用,并测定小鼠下丘脑中神经递质含量。与空白组相比,复合物组显著延长线虫睡眠时间,各指标均优于复合物中单个组分的作用结果。复合物低、中、高剂量组小鼠睡眠潜伏期分别提高18.18%、20.60%、25.60%,睡眠时长分别提高34.54%、45.24%、47.29%,入睡率分别提高25.00%、33.33%、33.33%。在旷场实验中复合物组运动总路程分别降低15.06%、13.96%、9.58%,进入中央区域次数分别提高138.10%、114.29%、114.29%,中央区域停留时间分别提高142.98%、176.89%、114.25%、静止总时间分别增加28.13%、44.42%、55.40%。与空白组相比,低中高复合物剂量组小鼠下丘脑GABA含量显著提高34.74%、66.45%、76.99%,5-HT含量显著提高32.67%、50.34%、79.72%,Glu含量显著降低33.41%、34.83%、39.55%。综上所述,牛乳酪蛋白肽粉、酸枣仁、百合、γ-氨基丁酸的复合物能够改善睡眠,通过调节下丘脑神经递质水平来改善睡眠,研究结果为新食品资源开发提供理论参考。

山羊乳酪蛋白酶解物制备及体外抗氧化活性研究

以自由基清除能力、金属离子螯合能力和抗脂质过氧化能力为指标,采用均匀试验研究山羊乳酪蛋白酶解物的制备及其体外抗氧化活性,并且比较自由基清除能力的方法。结果表明:山羊乳酪蛋白适宜的酶解工艺为在60g/kg的底物浓度下,中性蛋白酶和碱性蛋白酶的添加量分别为4000U/g和250U/g,45℃、pH7.5条件下酶解24h。山羊乳酪蛋白经酶解后其体外抗氧化活性显著增强。山羊乳酪蛋白酶解物.OH清除率的EC50值是其蛋白的3.59倍,ABTS+.的清除能力是其蛋白的158.72倍,螯合Fe2+的能力是其蛋白的5.44倍;在亚油酸体系中抗脂质过氧化能力强于TBHQ,与VE相当。清除.OH、DPPH自由基、O-2.和ABTS+.的方法不能相互替代。

牦牛乳酪蛋白酶解产物清除DPPH自由基活性分析

以牦牛(Bos grunniens)乳酪蛋白为原料,用胃蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶制备酪蛋白酶解产物,分别测定其DPPH自由基清除活力,发现碱性蛋白酶酶解产物的清除活力显著高于其他酶解产物(p<0.05)。测定不同水解时间点酪蛋白酶解产物的DPPH自由基清除活力,发现第7h酶解产物的清除活力显著高于其它水解时间点的样品(p<0.05)。还分析了碱性蛋白酶7h酶解产物的理化指标,发现其水解度、三氯乙酸氮溶解指数和蛋白质回收率均较高,表明此时大部分酪蛋白已降解,且酶解产物中短肽段的含量较高,用碱性蛋白酶制备具有DPPH自由基清除能力的酪蛋白酶解产物时得率较高,而其氨基氮含量相对较低,适宜作为保健食品功能性基料。

酶解水牛奶酪蛋白制备抗氧化活性肽工艺的研究

以水解度、还原能力和DPPH自由基清除率为检测指标,比较筛选碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶水解水牛奶酪蛋白制备抗氧化活性肽,筛选出中性蛋白酶是最适用酶。应用单因素和响应面法对酶解工艺进行优化。结果表明:中性蛋白酶酶解酪蛋白的最佳工艺参数:pH为6.9,温度为46℃,酶与底物浓度比为4.6%,酶解时间4.0h,此时10mg/mL酶解物的还原能力为0.457。实测结果与预测值符合性良好。

牛乳酪蛋白抗氧化乳基料的制备及其分离纯化

为制备具有低过敏性和抗氧化作用的牛乳酪蛋白活性肽乳基料,以水解度和.OH清除率为指标,先后采用大孔吸附树脂和凝胶过滤色谱分离、纯化酪蛋白酶解物。结果表明:胰蛋白酶和中性蛋白酶组合酶解牛乳蛋白6h,其产物具有较高的水解度(36.80%)和较好的抗氧化活性,.OH清除率的半抑制浓度(IC50)值为3.12mg/mL;酶解物通过LS106大孔吸附树脂分离、纯化后,体积分数为75%的乙醇洗脱液具有较高的抗氧化活性,其.OH清除率的IC50值为0.14mg/mL;体积分数75%的乙醇洗脱组分经凝胶过滤色谱分离、纯化后,得到4个不同相对分子质量肽段,其中抗氧化活性较强肽段的相对分子质量为355.38～854.89,其.OH清除率的IC50值为0.09219mg/mL,与酶解物相比其抗氧化活性扩大33.84倍;相对分子质量小于3238.05的多肽占纯化后多肽总量的60.32%,30.09%多肽是由2～8个氨基酸组成的寡肽。牛乳酪蛋白经复合酶酶解后其抗氧化活性明显提高,过敏性明显降低,喷雾干燥后可以直接制备乳基料。

山羊乳酪蛋白酶解条件优化及其抗菌活性研究

为制备山羊乳酪蛋白抗菌肽,以新鲜无抗山羊乳为原料,采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和胃蛋白酶在最适条件下酶解山羊乳酪蛋白,以沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径为指标,筛选最适水解酶,并通过单因素实验和正交实验确定水解酶水解山羊乳酪蛋白的最适条件。结果表明:木瓜蛋白酶是酶解山羊乳酪蛋白的最佳蛋白酶,其酶解物对沙门氏菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用最强;确定了木瓜蛋白酶水解山羊乳酪蛋白的最佳工艺。

羊乳酪蛋白酶解物对秀丽线虫衰老的改善作用

该研究利用秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)模型研究了羊乳酪蛋白酶解物(Goat Milk Casein Hydrolysates,GMCH)的抗衰老及体内外抗氧化作用。通过对比GMCH实验组和大肠杆菌对照组秀丽线虫的寿命、运动能力、脂褐素水平等指标来研究GMCH的抗衰老作用,通过自由基清除实验以及测定线虫体内抗氧化酶活性评价GMCH的体内外抗氧化活力,同时测定秀丽线虫在过氧化氢、百草枯及热应激条件下的寿命。结果表明,与对照组相比,喂食0.1mg/mL羊乳酪蛋白酶解物的线虫的平均寿命延长9.33%,体内脂褐素水平降低了65.00%,同时GMCH对线虫的生殖能力和运动能力没有负面影响,对线虫氧化应激和热应激有一定的保护作用;GMCH具有一定的体外抗氧化能力并且能够提高线虫体内抗氧化酶活力,与对照组相比,实验组SOD活力提高43.30%、CAT活力提高124.40%、GSH活力提高176.90%、MDA含量降低78.70%。综上所述,GMCH能够延长线虫的寿命,降低线虫体内脂褐素积累,提高线虫在应激条件下的抵抗能力和体内抗氧化酶活力,具有较好的抗衰老活性。

羊乳酪蛋白酶解物的改善睡眠作用

该文研究了羊乳酪蛋白酶解物(Goat Milk Casein Hydrolysates,GMCH)促进睡眠的功效及作用机制。采用保健食品规范方法(睡眠实验、巴比妥钠睡眠潜伏期实验、延长戊巴比妥钠睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验)判定GMCH高、中、低剂量组(700、400、100 mg/kg)改善小鼠睡眠的功效。进一步通过旷场实验深入探究GMCH对小鼠行为学的影响,最后测定小鼠下丘脑中睡眠相关神经递质分泌含量。结果表明,GMCH无直接睡眠作用,与空白组相比,GMCH低、中、高剂量组小鼠睡眠潜伏期分别缩短42.86%、56.63%、91.18%,睡眠时间分别延长34.46%、48.83%、63.19%,入睡率分别提高20.00%、60.00%、80.00%。在旷场中的运动总路程缩短,中央停留次数、中央停留时间和静止总时间均增加。下丘脑中GABA含量显著升高64.72%、41.16%、56.19%,5-HT含量显著升高25.87%、33.50%、43.67%、DA含量显著降低7.02%、12.85%、13.72%,NE含量显著降低18.73%、23.37%、29.41%。综上,GMCH具有改善小鼠睡眠的作用,有一定镇静作用,可能通过调节小鼠下丘脑中的神经递质水平起到促睡眠作用。

牦牛乳酪蛋白酶解物对H_2O_2诱导的氧化损伤HepG2细胞蛋白羰基含量及抗氧化酶活性的影响

为探究牦牛乳酪蛋白酶解物缓解氧化应激损伤的作用,利用过氧化氢(H_2O_2)建立氧化损伤细胞模型,以细胞蛋白质羰基含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)、过氧化氢酶(catalase,CAT)的活性为指标评价牦牛乳酪蛋白酶解物的活性。结果表明,利用酶解物处理H_2O_2损伤的HepG2细胞,能够缓解H_2O_2诱导的蛋白质羰基含量升高,并增加细胞内SOD、CAT、GSHPx的活性,从而提高机体抗氧化能力,缓解H_2O_2引发的氧化应激状态。研究证明,牦牛乳酪蛋白酶解物具有缓解氧化应激损伤的作用,为牦牛乳资源的进一步开发利用及乳源活性肽应用于抗氧化功能食品提供了依据。

营养成分对‘安陆1号’银杏胚离体培养成苗的影响

以‘安陆1号’品种银杏胚为材料,探讨基本培养基及外源添加物对银杏胚离体萌发成苗的影响.结果表明:‘安陆1号’银杏胚在基本培养基N6中最易萌发成苗,其成苗率达到36.7%;N6中加入适宜添加物椰子乳、活性炭、水解酪蛋白和银杏胚乳汁均能更有效促进胚萌发和成苗;其中0.5 g/L水解酪蛋白的促进效果最好,银杏胚离体萌发的成苗率达到92.8%,平均株高达到4.1 cm,且幼苗健康粗壮,为‘安陆1号’银杏胚的离体萌发成苗提供了技术可能.

山羊乳酪蛋白抗菌肽分离纯化及结构鉴定

为制备山羊乳酪蛋白抗菌肽,阐明抗菌肽的构效关系,采用LS-106大孔吸附树脂、凝胶色谱和高效液相色谱(HPLC)对山羊乳酪蛋白酶解物进行逐级分离纯化,以对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径、最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)为指标,对分离组分进行抑菌试验,采用预测软件、质谱与圆二色谱对分离抗菌肽的一、二级结构进行预测和鉴定。试验结果表明:(1)大孔吸附树脂分离酶解液,其中体积分数为60%的乙醇洗脱组分抑菌作用较强。(2)凝胶色谱将60%乙醇洗脱组分分离成3个色谱峰,峰3抑菌作用较强。(3)HPLC将峰3分离为2个组分F3-1和F3-2,其中F3-1对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的MIC均为297.9μg/mL,MBC为1191.6μg/mL;F3-2对大肠杆菌的MIC和MBC分别为309.2,1236.8μg/mL,对沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的MIC均为154.6μg/mL,MBC为618.4μg/mL。(4)F3-1和F3-2的一级结构分别为Leu-Gly-Gly-Val-Gln-Glu-Pro-Asp-Pro-Asn-Thr-Asp-Val-Arg(1497.76)和Val-Val-Asn-Leu-Glu-GluLys-Leu-Pro-Gly(1242.66)。F3-1和F3-2均属阴离子抗菌肽,虽然其抑菌作用稍弱于阳离子抗菌肽,但是其二级结构为无毒性的无规则卷曲结构,与α-螺旋结构抗菌肽相比,在食品、药品和化妆品等安全应用方面潜力巨大。

牦牛乳酪蛋白肽分离组分对DPP-4活性的抑制作用

以牦牛乳酪蛋白为原料,研究牦牛乳酪蛋白水解产物及其分离组分对二肽基肽酶-4(DPP-4)活性的抑制作用。以木瓜蛋白酶水解牦牛乳酪蛋白,水解产物采用Sephadex G-25凝胶过滤色谱进行分离,以DPP-4抑制率为指标,分析水解产物和分离组分对DPP-4活性的抑制作用。结果表明,木瓜蛋白酶水解0.5 h获得的水解产物表现出最强的DPP-4抑制活性,抑制率可达(59.57±0.23)%,半抑制浓度(IC50)为0.67 mg/m L。经Sephadex G-25凝胶过滤分离将木瓜蛋白酶水解产物分成4个组分,其中第3个组分对DPP-4抑制作用最强,IC50值为0.583 mg/m L。研究结果表明,与牦牛乳酪蛋白相比,其水解产物的DPP-4抑制活性显著增强,经凝胶过滤色谱分离后的水解产物分离组分具有更强的DPP-4抑制活性。