B族链球菌基因cpsG抑制人类宫颈癌细胞增殖的研究

目的 探讨B族链球菌基因cpsG影响人类宫颈癌细胞增殖的作用及其机制。方法 通过人工合成方法将cpsG的读码框序列(ORF)融合HA标签连接到质粒pLVX-mCMV-ZsGreen的限制性内切酶EcoRⅠ和BamHⅠ之间构建稳定表达cpsG人类宫颈癌细胞系。通过CCK8和集落形成实验进行生长曲线和集落形成能力分析,检测cpsG对人类宫颈癌细胞体外生长能力的影响。通过高通量RNA测序进行基因表达水平的定量分析,分析cpsG对人类宫颈癌细胞转录组学的影响,包括基因本体论(GO)分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析和融合基因分析。结果 成功构建稳定表达cpsG人类宫颈癌细胞系之后,CCK8和集落形成实验显示cpsG基因抑制人类宫颈癌细胞体外生长。高通量RNA测序技术发现cpsG能够显著调控人类宫颈癌细胞部分基因的转录能力;GO分析和KEGG分析发现cpsG调节了人类宫颈癌细胞中部分基因的功能和信号通路。主要通过上调DSC3、IGFBP4、PLCL1和下调KRT6A、COL8A1、KRT17等基因的转录,从而抑制G蛋白偶联受体活性、PI3K-Akt信号通路、TNF信号通路、NF-κB信号通路和激活脂肪酸降解、p53信号通路。结论 cpsG可能影响了人类宫颈癌细胞中部分基因的融合,主要影响了B3GAT3-ATP8、LEPROT-LEPR、MRPS6-SON融合基因的形成。