CpxRA双组分系统对小肠结肠炎耶尔森菌环境耐受性和抗生素耐药性的影响

目的探究CpxRA双组分系统对小肠结肠炎耶尔森菌环境耐受性和抗生素耐药性的影响。方法本研究选用Cat-SacB无标记基因敲除系统,利用同源重组双交换原理,构建了基因敲除菌株ΔcpxA和ΔcpxR,以及相应的回补菌株ΔcpxA-cpxA和ΔcpxR-cpxR,然后分别测定了野生型、突变型和回补型在酸性、碱性、高氧和高渗环境中的存活率,以及红霉素、罗红霉素、卡那霉素、链霉素的最小抑菌浓度值。结果cpxA和cpxR基因的缺失使小肠结肠炎耶尔森菌的在酸性环境下的存活率由55.1%分别降为45.9%和42.8%;使该菌在碱性环境下的存活率由43.4%分别降为38.9%和37.2%;在高渗环境下的存活率由44.1%分别降为36.3%和33.7%;在高氧环境下的存活率由20.8%分别降为15.1%和15.8%。cpxA基因的缺失增强了该菌对于氨基糖苷类抗生素:卡那霉素、链霉素的耐药性,而cpxR基因的缺失减弱了该菌对于大环内酯类抗生素:红霉素、罗红霉素的耐药性。结论CpxRA双组分系统参与调控小肠结肠炎耶尔森菌在不良环境中的存活能力以及抗生素耐药性。

嗜水气单胞菌cpxRA缺失株构建及生物学特性研究

为了探讨Cpx系统在嗜水气单胞菌生长及毒力等方面发挥的作用,利用融合PCR和基因同源重组原理,以自杀质粒pRE112为载体构建缺失57—1879 bp序列的cpx R-A基因簇突变株Δcpx,然后比较缺失株和野生株在生长、生物膜形成、应激耐受及毒力等生物学特性方面的差异。普通PCR及荧光定量PCR结果验证了突变株中cpx RA基因簇片段的部分缺失,表明突变株构建成功;生物学特性研究结果显示,突变株在形态、生长、生物膜形成及毒力等方面与野生株没有显著差异,两者主要在应对高渗透压、SDS(十二烷基磺酸钠)刺激及含有EDTA(乙二胺四乙酸二钠)或多黏菌素B环境表现不同。结果表明Cpx双组分系统在嗜水气单胞菌应对外界刺激方面扮演着重要角色,但在毒力方面则可能处于次要地位。

革兰阴性菌包膜应激反应系统的调控机制及对致病性的影响

革兰阴性菌的包膜是细菌与外环境之间的屏障,也是许多重要生物过程发生的场所。外界环境的变化、毒性分子以及抗生素等均可破坏包膜结构,造成包膜功能紊乱。细菌感知外界压力并对压力做出反应依赖于包膜应激反应系统。革兰阴性菌的包膜应激反应系统由一系列的调节性水解级联反应组成,包括多种双组分信号转导系统以及RNA聚合酶相关的替代σ因子系统。包膜应激反应系统通过感知压力信号调控基因转录,从而对抗压力,维持细菌包膜结构和功能的完整性。