蕨菜组织培养的消毒方法比较

以蕨菜[Pteridium aquilinum(L.)Kuhn var.latiusculum(Desv.)Underw.ex Heller]粗壮、幼嫩的茎段为外植体实施组织培养,比较了不同的消毒步骤及洗刷处理对蕨菜茎段的消毒效果。结果表明,用柔软毛笔对蕨菜茎段表面洗刷1 min,再用75%的乙醇浸泡15 s,接着用1.0 g/L的HgCl2溶液处理5min,取得了组织培养最佳的消毒效果,其污染率为15.0%,成活率达66.7%,是试验范围内效果最佳的消毒方法。

猫尾射的组织培养

以猫尾射无菌播种苗(去除根部)为外殖体,对其愈伤组织诱导和分化及其不定芽增殖进行研究。结果表明,外殖体在MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基上,愈伤组织诱导和分化的效果较好,愈伤诱导率为82.0%,分化率为74.5%;经不定芽增殖培养基MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L培养,不定芽增殖倍数为8.2,平均株高为4.7cm。组培苗在MS+IBA0.5mg/L培养基上生根率达90%。生根苗移栽成活率达84%。

虎尾轮根化学成分及其体外抗肾间质纤维化活性

目的研究虎尾轮根Uraria crinita(L.)Desv.ex DC的化学成分及其体外抗肾间质纤维化活性。方法虎尾轮根乙醇提取物采用硅胶、Sephadex LH⁃20进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。采用MTT法进行体外抗肾间质纤维化活性筛选。结果从中分离得到16个化合物,分别鉴定为divaricataester A(1)、pyrrolezanthine⁃6⁃ethyl ether(2)、5,7⁃二羟基⁃2′⁃甲氧基⁃3′,4′⁃亚甲基二氧异黄酮(3)、dehydroespeleton(4)、pleuchiol(5)、1,6⁃desoxypipoxide(6)、p⁃coumaroyl⁃β⁃phenethylamine(7)、isolugrandoside(8)、紫苜蓿烷(9)、二氢木豆异黄酮(10)、8⁃O⁃4⁃dehydrodiferulic acid(11)、8,9⁃dehydropellitorine(12)、6⁃O⁃(E)⁃肉桂酰基⁃α/β⁃D⁃吡喃葡萄糖苷(13)、trans⁃3′,4′⁃diacetylkhellacton(14)、3⁃甲氧基⁃4⁃O⁃β⁃D⁃吡喃葡萄糖基苯甲酸甲酯(15)、euparone(16)。化合物5、8对胶原纤维Ⅳ、Ⅲ型前胶原蛋白、层粘连蛋白;化合物11、14对胶原纤维Ⅳ、Ⅲ型前胶原蛋白;化合物2、7对Ⅲ型前胶原蛋白;化合物4、12对胶原纤维Ⅳ、层粘连蛋白均具有体外抑制作用。结论除化合物3外,所有化合物均为首次从该植物中分离得到,化合物2、4~5、7~8、11~12、14对肾间质纤维化指标有不同程度的抑制作用。

蕨菜孢子人工繁殖的初步研究

本文论述了在青海高原干旱高寒条件下蕨菜孢子的形成状况及最佳采集期，对蕨菜孢子的人工繁殖进行了初步的研究。

虎尾轮转录组测序及生物信息学分析

虎尾轮(Uraria crinita(L.)Desv.ex DC)为闽南民间常用保肝护肝中草药,是一种极有使用、研究、开发价值的天然药用植物资源,但对其分子机制研究严重滞后,在一定程度上限制了该民间资源的利用和开发。本实验通过Illumina Hiseq对虎尾轮的根和茎转录组测序,采用Trinity软件完成虎尾轮高质量数据转录本拼装,而后进行生物信息学分析。研究结果表明:总共获得的高质量unigene有255407896个,N50的长度是992 bp,其平均长度是559.07 bp;将虎尾轮的122207条unigene与NR、GO、KEGG等7个重要的数据库系统进行比对,获得了虎尾轮基因功能的注释信息,结果表明,有75530条unigene至少注释到1个数据库,占61.8%;虎尾轮的根对茎的差异表达unigene有19714个,其中有9038个上调表达,10676个下调表达。在对虎尾轮根与茎差异基因分析中,利用KEGG数据库代谢途径对132个显著性KO途径分析,发现共挖掘出114个unigene与虎尾轮黄酮类生物合成途径密切相关。提取虎尾轮转录组中与黄酮类生物合成密切相关基因的TPM值,60.71%的基因在根中的TPM值高于茎中的TPM植,根中的表达远高于茎的表达,符合民间习用其根的用法。以上结果为今后进一步挖掘虎尾轮药用活性成分的功能基因、生物合成调控、品质改良等提供参考依据。