响应面优化西红花中西红花苷提取工艺的研究

建立了西红花药材中西红花苷-Ⅰ和西红花苷-Ⅱ的最优提取工艺。采用乙醇-水体系超声提取西红花苷(超声功率100W),在单因素实验基础上运用响应面法优化西红花苷-Ⅰ和西红花苷-Ⅱ提取工艺,最佳提取工艺参数为:乙醇浓度50%、提取时间30min、提取温度45℃。在此优化的提取工艺条件下,西红花苷-Ⅰ和西红花苷-Ⅱ得率分别为14.12%和4.98%。该提取工艺可用于西红花中西红花苷-Ⅰ和西红花苷-Ⅱ的提取。

HPLC法测定珍龙醒脑胶囊中西红花的含量

目的建立藏药珍龙醒脑胶囊中西红花的西红花苷Ⅰ、Ⅱ的高效液相色谱法（HPLC）含量测定方法。方法WatersC18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相为乙腈-体积分数比1％冰醋酸水溶液（25：75）；流速为1．0mL／min，检测波长440nm，柱温为室温。结果西红花苷I在6．03—60．30Ixg／mL，西红花苷Ⅱ在3．01～30．10μg／mL浓度范围内均与色谱峰峰面积呈良好的线性关系，相关系数r分别为0．9997、0．9999；西红花苷Ⅰ、Ⅱ的平均回收率分别为97．80％、97．44％，RSD分别为0．66％（n=6）、1．71％（n=6）。结论该方法可同时测定制剂中的西红花苷I、Ⅱ，可用于珍龙醒脑胶囊的质量控制。

基于多元统计方法和成分差异分析栀子及其炮制品质量

目的 建立栀子Gardenia jasminoides的UPLC指纹图谱,比较栀子及其炮制品之间的差异。方法 收集2个产地10批栀子,使用不同方法炮制,采用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm),栀子及其炮制品用甲醇超声提取制备溶液,以乙腈-0.2%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,进样量1μL,柱温30℃,体积流量0.2 mL/min,检测波长为239 nm与440 nm,建立其UPLC指纹图谱。运用总量统计矩相似度、灰色关联度、TOPSIS和主成分分析(principal component analysis,PCA)对栀子的UPLC特征指纹图谱进行数据分析。结果 栀子及其炮制品的UPLC特征指纹图谱的共有标志峰20个,其中4个鉴定为栀子苷、京尼平龙胆双糖苷、西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ。2产地的栀子经炮制成焦栀子后,栀子苷、西红花苷Ⅰ与西红花苷Ⅱ含量有所减少。湖南湘乡地区栀子经炮制后其京尼平龙单双糖苷含量有一定增加。结论 所建立的栀子不同炮制品特征指纹图谱共有20个标志峰,不同炮制品之间标志峰峰面积和含量存在差异,为栀子的不同炮制品的质量控制与评价提供了依据。

HPLC-DAD法同时测定加味逍遥丸中8种成分

目的建立同时测定加味逍遥丸（JXP）中栀子苷、甘草苷、丹皮酚、西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ、芍药苷、甘草酸、阿魏酸8种成分的HPLC-DAD方法。方法采用Plastisil ODS（250mm×4．6mm，5μm）；流动相为乙腈-0．2％磷酸水溶液，梯度洗脱，体积流量1．0mL／min，柱温37℃，检测波长栀子苷为238nm，甘草苷和丹皮酚为274nm，西红花苷Ⅰ和西红花苷Ⅱ为440nm，芍药苷和甘草酸为228nm，阿魏酸为324nm，进样量10μL。结果被测定的8种成分在设定的色谱条件下均有良好的分离度，方法精密度，重复性RSD值均〈2％，被测定样品在室温条件下12h内稳定，各成分均有较宽的线性范围和良好的线性关系，栀子苷、甘草苷、丹皮酚、西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ、芍药苷、甘草酸、阿魏酸线性范围分别为48～288μg／mL（r=0．9994）、60～360μg／mL（r=0．9992）、64～384μg／mL（r=0．9998）、19．2～115．2μg／mL（r=0．9995）、4～24μg／mL（r=0．9992）、96～576μg／mL（r=0．9996）、64～384μg／mL（r=0．9997）、20～120μg／mL（，=0．9994），平均加样回收率在99．13％～100．25％，RSD值均〈2．0％。6批JXP中栀子苷、甘草苷、丹皮酚、西红花苷Ⅰ、西红花苷Ⅱ、芍药苷、甘草酸、阿魏酸质量分数分别在2．34～2．82mg／g、2．63～3．28mg／g、3．66～4．55mg／g、1．05～1．41mg/g、0．34～0．41mg／g、4．78～5．32mg／g、2．83～3．37mg／g、1．36～1．73mg/g。结论本方法操作简单，经方法学验证测定结果准确可靠，是可用于JXP质量控制的一种有效方法。

栀子炮制前后7种成分的比较研究

目的比较栀子Gardenia jasminoides全果、果仁、果皮中7种成分炮制前后的变化。方法利用HPLC/DAD对栀子全果、果仁、果皮生品及其炮制品中京尼平苷酸、去乙酰车叶草酸甲酯、京尼平龙胆二糖苷、栀子苷、绿原酸、西红花苷I和西红花苷II进行定量分析。结果栀子果皮中绿原酸和去乙酰车叶草酸甲酯的量较高,栀子果仁中京尼平龙胆二糖苷、栀子苷、西红花苷I和西红花苷II的量较高。栀子经过炮制后除京尼平苷酸的量升高外,京尼平龙胆二糖苷的量变化不大,去乙酰车叶草酸甲酯、栀子苷、绿原酸、西红花苷I和西红花苷II的量有所下降。结论栀子果仁、果皮中去乙酰车叶草酸甲酯、京尼平龙胆二糖苷、栀子苷、绿原酸、西红花苷I和西红花苷II的量分布存在差异;炮制可降低栀子中大多数有效成分的量,升高栀子中京尼平苷酸的量。

基于指纹图谱及多成分含量的化学模式识别法评价不同产地栀子药材的质量

目的基于HPLC指纹图谱与多成分含量测定,并结合化学模式识别法,评价不同产地栀子的质量,优选最佳产地。方法采用RP-HPLC切换波长法,流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液进行梯度洗脱,检测波长为234、440nm,对10个不同产地的30批栀子药材进行指纹图谱及5种有效成分含量测定研究,应用聚类分析与主成分分析等化学模式识别方法对栀子质量进行评价。结果 10个不同产地30批栀子的指纹图谱相似度均在0.95以上,去乙酰车叶草酸甲酯、京尼平龙胆双糖苷、栀子苷、西红花苷I和西红花苷II质量分数分别为0.61~4.26、1.73~12.92、51.79~82.76、5.03~12.80、0.71~2.28mg/g;聚类分析可分为3类,第1类为产地湖南永州、湖南永安、江西丰城、江西湖口、安徽广德和福建福鼎;第2类为产地江西黎川、江苏句容和河南唐河;第3类为产地安徽六安。通过主成分分析,进一步评价不同产地间质量的差异,从而发现安徽六安、江西湖口和湖南永安等地质量较优。结论不同产地之间栀子存在一定质量差异,同一产地不同批次间栀子质量较稳定。通过指纹图谱与含量测定相结合,应用化学模式识别方法可全面综合评价栀子质量。此方法的建立为栀子药材的质量控制及评价提供了有效的参考依据。

HPLC测定栀子中色素类化合物的含量

目的:建立栀子中西红花苷-Ⅰ和西红花苷-Ⅱ的含量测定方法。方法:采用HPLC-DAD法,Dikma Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈梯度洗脱,流速1 mL.min-1,检测波长440 nm。结果:西红花苷-Ⅰ在10.272～256.8 mg.L-1线性关系良好;平均回收率96.68%,RSD 1.2%。西红花苷-Ⅱ在2.544～63.6 mg.L-1线性关系良好;平均回收率102.94%,RSD 0.87%。结论:该方法可靠,重复性好,可作为栀子质量控制的进一步补充。

UPLC-DAD法同时测定珍龙醒脑胶囊中的9种成分

目的 建立同时测定珍龙醒脑胶囊中没食子酸、肉桂酸、甘草苷、西红花苷I、西红花苷II、桂皮醛、丁香酚、甘草次酸、麝香酮等9种成分的UPLC-DAD方法。方法 采用RP-UPLC法,Agilent Zorbax C18色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.8μm）,流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈,体积流量0.3 m L/min,梯度洗脱,柱温35℃,进样量为1μL。分别对待测物考察其提取溶剂、线性范围、精密度、重复性、稳定性、加样回收率等方法学内容。结果 9种指标成分没食子酸在0.2-20.0mg/L（r=0.999 0）、西红花苷I在0.022-2.200 mg/L（r=0.999 3）、西红花苷II在0.02-2.00 mg/L（r=0.999 6）、甘草苷在0.093-1.860 mg/L（r=0.999 4）、肉桂酸在0.020 4-2.040 0 mg/L（r=0.999 9）、桂皮醛在0.042-4.200 mg/L（r=0.999 9）、丁香酚在0.95-95.00 mg/L（r=0.999 9）、甘草次酸在0.012 9-1.290 0 mg/L（r=0.998 9）、麝香酮在0.073 8-7.380 0 mg/L（r=0.999 0）线性关系良好;精密度RSD≤1.02%;重复性良好,RSD≤1.13%;加样回收率在93.8%-112.1%,RSD≤1.28%。供试品溶液在室温条件下24 h内稳定。3批次供试品中没食子酸、西红花苷I和II、甘草苷、肉桂酸、桂皮醛、丁香酚、甘草次酸、麝香酮质量分数分别为0.422-0.448、0.093-0.105、0.096-0.112、0.026 8-0.028 5、0.142-0.153、0.140-0.158、1.519-1.547、0.007 55-0.008 04、0.117-0.121 mg/g。结论 本法快速、灵敏度高、准确度高、专属性好,为珍龙醒脑胶囊的质量控制提供依据。

多波长HPLC法测定加味逍遥丸中多种成分含量及化学计量学分析

目的:建立多指标含量测定结合化学计量学分析法,评价加味逍遥丸质量。方法:样品经甲醇超声提取,采用Kromasil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.2%磷酸水溶液进行梯度洗脱,234nm和440 nm双波长检测,并使用雷达图分析、聚类热图分析和夹角余弦相似度分析方法对数据进行统计。结果:样品中芍药苷、丹皮酚、阿魏酸、甘草苷、甘草酸、栀子苷、西红花苷Ⅰ和西红花苷Ⅱ的含量分别为1.484~5.508、0.94~3.28、0.014~0.147、0.23~1.79、0.353~2.488、2.40~11.33、0.008 6~0.731 1和0.001 6~0.072 3 mg·g^(-1)。化学计量学分析表明各厂家的样品间存在一定差异,同一厂家的样品较为一致。区分各类样品的强特征峰为栀子苷峰、芍药苷峰、丹皮酚峰、栀子peak 6、甘草苷峰、西红花苷Ⅰ峰和牡丹皮peak2。结论:该法准确、专属,适用于加味逍遥丸整体质量评价。

市售栀子饮片的质量评价研究

目的考察市售栀子饮片的质量。方法收集50批不同厂家生产的栀子,应用RP-HPLC波长切换法同时测定栀子苷、西红花苷Ⅰ与西红花苷Ⅱ的含量;依据中国药典2015年版一部品种项下规定的方法测定水分、总灰分;采用原子吸收分光光度法测定其中18批样品中镉元素的含量。结果 50批栀子中总灰分和栀子苷均符合标准规定;水分有2批不符合标准规定;西红花苷Ⅰ的含量为0.31%~1.35%、西红花苷Ⅱ的含量为0.04%~0.63%;18批栀子中镉元素有3批超出千万分之三的限度。结论大部分栀子饮片符合中国药典标准,质量情况较为乐观。栀子成分复杂多样,仅以其中环烯醚萜类的栀子苷作为质控指标稍欠全面,无法很好地反应出该品种的质量优劣,建议修订完善标准。