动物模型在周围性面神经麻痹实验研究中的应用

周围性面神经麻痹是临床常见病,目前已有大量实验研究围绕面神经麻痹的诊断、治疗展开。然而在实验研究中动物模型尤为关键,神经损伤的方式及损伤程度直接影响了后续治疗的有效性与实验结果的准确性。由于目前建立动物模型缺乏统一的操作标准,本文对现有实验研究的造模方法进行总结分析,并对周围性面神经麻痹动物模型的造模方法与神经元标本电镜观察进行详细描述,为实验研究中造模方法的选择提供参考。

脑弥漫性轴索损伤实验装置的研制及动物模型的建立

目的自制一种脑弥漫性轴索损伤(DAI)装置并成功建立DAI动物模型。方法自制头颅瞬间旋转损伤装置,使大鼠头颅在瞬间(<3 ms)旋转90°造成剪切损伤。观察损伤后大鼠的生命体征及行为学改变;于伤后2、6、12、24、36、72 h及10 d分别处死损伤组动物,制备脑石蜡切片,行镀银及HE染色,光镜下观察神经轴索变化。结果伤后大鼠均即刻出现原发昏迷,其中2只于损伤后20 min内死亡,余持续时间1-30 min不等;伤后大鼠呼吸节律紊乱,瞳孔对光反射减弱或消失,醒后均有程度不等的反应性下降,肢体活动迟缓;肉眼可见广泛蛛网膜下腔出血或脑室出血;光镜下可见皮髓交界区、胼胝体区、脑干、小脑白质等部位的神经轴索有不同程度的肿胀、断裂、轴索球形成,后期有小胶质细胞增生,局部呈巢样聚集。结论本装置能造成大鼠脑DAI,且具有简便、可控、确切的特点,适合进行中、小型动物DAI模型的实验研究。

丹参素对实验性肝细胞损伤的防护作用

在原代培养小鼠肝细胞上用氰化钾复制缺氧损伤模型。观察不同剂量的氰化钾对肝细胞的损伤及丹参素对损伤肝细胞的保护作用。结果表明:氰化钾对肝细胞具有毒性,丹参素能使含2.5mmol/L氰化钾肝细胞培养液中LDH活性明显降低,显著增强肝细胞SOD活力,降低LPO含量。提示氰化钾致肝细胞损伤与自由基毒性作用密切相关,丹参素具有稳定细胞膜、清除自由基的作用。

治疗乙型肝炎新药肝龙胶囊的药效学初步研究

目的观察肝龙胶囊对鸭乙型肝炎病毒的抑制效果和对实验性肝损伤的保护作用。方法(1)以鸭乙型肝炎病毒(DHBV)静脉注射感染雏鸭为模型,于感染第7天后分组灌胃肝龙(GL)胶囊浸膏0.5,1.5,3.0 g.k-g1.d-1,阳性对照组给予无环鸟苷(ACV)或磷羧基甲酸钠(PFA)。采用斑点杂交方法检测鸭血清DHBV-DNA,以病毒抑制率为疗效指标;(2)以昆明种小鼠腹腔注射CC l4肝损伤为模型,给予GL浸膏(200 mg.kg-1)。测定SGPT值,并取肝脏作病理形态学观察。结果(1)GL三个不同剂量组对DHBV均有不同程度的抑制作用,有一定的量效关系;(2)GL降低CC l4肝损伤小鼠血清SGPT值并减轻肝细胞损伤。结论肝龙胶囊可抑制雏鸭体内DHBV-DNA的复制并能保护CC l4所致的小鼠肝损伤。

创伤性脑损伤动物模型及其实验治疗学应用

创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI),亦称颅脑损伤或头部外伤,专指由外伤引起的脑组织损害。TBI发生机制以及神经损伤后的修复治疗是当前脑研究的热点问题。动物模型的复制对开展TBI的实验治疗学研究起了巨大的推动作用。该文就国内外已经建立的撞击脑损伤、非撞击加速脑损伤和爆炸冲击波致脑外伤三类动物模型的进展作系统综述,同时列举这些模型在实验治疗学上的应用,为神经保护药物的药效学筛选提供科学指导。

脊髓损伤动物模型的复制及其实验治疗学应用

脊髓损伤的机制和神经损伤后的修复治疗是当前神经科学研究的热点。动物模型的复制为开展脊髓损伤的实验治疗学研究起了很关键的作用。该文就国内外已经建立的脊髓挫伤、压迫损伤、横断损伤、缺血损伤、牵张损伤和化学损伤等模型的进展作系统综述,同时列举了这些模型在实验治疗学上的应用,为实验性新药的筛选提供科学指导。

腹部辐射诱发大鼠肠黏膜损伤模型的建立

目的建立稳定及符合辐射性肠黏膜屏障损伤研究的动物模型。方法将SD大鼠随机分为正常对照组(A组,10只)和B、C、D 3个照射组(每组20只)。照射组采用直线加速器一次性辐射腹部,照射剂量依次为8.5、9.09、.5 Gy,辐射范围为自剑突至肛门;A组不进行照射。于辐射后第4天取各组大鼠距屈氏韧带10 cm处小肠制作标本,光镜下测量绒毛-隐窝轴(CVA)长度,电镜下观察小肠黏膜结构;采用鲎试剂测定血浆内毒素水平。结果辐射后第4天,B、C、D组大鼠死亡率分别为10%、30%、60%。各组CVA长度比较,A组和B组差异无显著性(P>0.05),C组低于A、B组,D组低于A、B、C组,差异均有显著意义(F=100.480,q=4.617～18.560,P<0.05)。C组大鼠的血浆内毒素水平高于A、B组,D组高于A、B、C组,差异有显著意义(F=50.468,q=5.380～15.898,P<0.05)。电镜下可见各照射组大鼠肠黏膜上皮细胞脱落,溃疡形成,无正常细胞结构,基底层显露,并可见细菌穿透黏膜层。结论辐射性肠黏膜损伤大鼠模型建立成功,9.0 Gy剂量全腹照射所产生的大鼠放射性肠炎模型适用于辐射性肠黏膜屏障损伤的研究。

腰骶神经根牵拉损伤动物模型的建立

目的以拉力为参数建立不同程度的腰骶神经根牵拉损伤动物模型。方法将40只中国大白兔随机分为对照组、轻度牵拉组、中度牵拉组和重度牵拉组。全椎板切除显露双侧S1神经根,用测力神经根拉钩分别以不同的拉力造成神经根的牵拉性损伤。行体感诱发电位(somatosensory evoked potential,SEP)监测和神经功能评分,神经根和骶髓做组织病理学研究。结果轻度牵拉组SEP潜伏期比对照组稍延长(P>0.05),神经根和骶髓结构正常,Hashi-zume行为学测试正常;中度牵拉组SEP潜伏期明显延长(P<0.05),去除牵拉后潜伏期接近正常(P>0.05),神经根结构轻度异常,骶髓结构正常,Hashizume行为学测试轻度异常;重度牵拉组SEP潜伏期明显延长(P<0.01),去除牵拉后潜伏期稍缩短,和对照组的差异有统计学意义(P<0.05),神经根结构明显异常,骶髓轻度异常,Hashizume行为学测试异常。所有实验动物改良Tarlov运动功能评分均正常。结论以拉力为参数可以稳定地建立不同程度的腰骶神经根牵拉性损伤动物模型。

放射性胸腺损伤小鼠模型的建立

背景:胸腺对于维持机体免疫功能起着重要的作用,在放射性损伤发生时的损伤和修复机制有待于进一步研究,但目前缺乏相应的动物模型。目的:单纯照射小鼠胸腺以构建放射性胸腺损伤模型。方法:160只雌性BALB/C小鼠随机分为4组,每组40只,对照组予以假照射;6Gy照射组给予60Coγ射线6Gy胸腺单次照射,9Gy照射组给予胸腺单次照射9Gy,12Gy照射组给予胸腺单次照射12Gy。观察各组小鼠照射后1-7d体质量及进食水量变化,照射后1,7,14,21,28d检测各组小鼠血象、胸腺指数及胸腺病理变化,并于照射后7d检测小鼠食管、肺、气管病理组织学变化,照射后14d检测小鼠外周血T细胞亚群和胸腺T细胞亚群表达。结果与结论:与对照组相比,照射组小鼠各项指标均发生变化,但6Gy照射组由于损伤相对较轻,在照后1周内就开始修复;12Gy照射组出现了放射性食管、气管损伤,而9Gy组即保留了放射性损伤的特点,也避免了其他脏器损伤带来的干扰,能反映胸腺放射性损伤后的改变。以9Gy60Coγ射线单次纵膈照射可成功制作小鼠放射性胸腺损伤模型。

脑损伤动物模型制作方法的研究现状

成功的实验 ,有赖于一个成功的动物模型的建立。本文通过对有关文献的复习 ,将建立脑损伤动物模型的方法分为加速损伤法、机械损伤法、打击损伤法、落体撞击法、压缩气击法和液压损伤法六种 ,并指出各自的优缺点及主要应用范围。文中还对理想的脑损伤模型制作方法进行了展望 ,认为液压损伤法是目前较为可行的方法之一。

兔骨折合并脑外伤模型血清对鼠骨折愈合影响的实验研究

目的在鼠单纯骨折模型中应用兔骨折合并脑外伤模型血清,分析其骨折愈合过程。方法制备兔骨折合并脑外伤模型8只,并制备兔骨折合并脑外伤模型动物不同时段血清(实验血清),分术后1w、2w、3w、4w分别保存,冻干处理;从2只健康兔动脉血制备血清(阴性对照血清),冻干处理;制备鼠单纯股骨干骨折模型72只,骨折行克氏针髓内固定;将单纯股骨干骨折模型鼠随机分成3组,即实验组、阴性对照组和空白对照组,每组24只,据鼠与兔体表面积比计算血清用量,实验组在术后1天(第1周)、8天(第2周)、15天(第3周)、22天(第4周)分别臀肌内注射相应时段实验血清,阴性对照组对应时间肌注阴性对照血清,空白对照组不予任何处理;每组术后1w、2w、3w、4w处死6只鼠,X线摄片比较各组骨折固定术后1w、2w、3w、4w骨折愈合情况。软件分析骨痂形成情况。结果术后2w、3w、4w实验组较对照组骨折处骨痂形成明显加速,骨痂灰度明显致密。结论肌注相应时段兔骨折合并脑外伤模型血清,能明显加速鼠单纯骨折模型的骨折愈合。

实验性肝损伤动物模型制备及指标测定的评价

目的：综合实验性肝损伤的动物模型及指标测定的特征，以评价他们的优缺点。方法：对国内外文献进行归纳、分析及总结。结果：系统阐述该领域在国内外的研究现状，为今后的研究起到指导作用。结论：实验性肝损伤的模型及测定的指标很多，各有其特点。

一种用于动物挤压伤实验仪的研制与应用

根据临床研究治疗挤压伤-挤压综合征的需要,研制了一种适用于进行小型动物挤压伤实验的专用仪器。该实验仪具有操作简单,使用方便,挤压重量、挤压时间能够精确控制等特点。

不同程度弥漫性轴索损伤动物模型建立研究

目的自制一种弥漫性轴索损伤(DAI)装置,建立不同程度的DAI动物模型。方法选取成年雄性清洁级SD大鼠70只,分为正常对照组(10只)与致伤组(60只),进一步将致伤组分为A、B、C 3组,各20只。运用自制的实验装置致伤,使大鼠的头颅同时产生瞬间超大角加速度和线加速度,在恒定气压下通过不同的旋转往返加速运动次数,造成轻型(A组)、中型(B组)、重型(C组)3种不同程度的大鼠DAI损伤模型,进行行为及病理效应评价。结果随着损伤程度的加重,损伤急性期致伤组大鼠的神经生理反射恢复的时间间隔与苏醒时间均增加(P<0.05),致伤7d后致伤组大鼠的神经功能评分降低(P<0.05);致伤后14d内A、B、C 3组大鼠死亡率分别为5.0%、25.0%、50.0%。随着损伤程度的加重,DAI病理特征改变更为明显。结论该装置能有效建立不同损伤程度的DAI动物模型。

缺血再灌注后糖尿病家兔与正常家兔钙电流的比较

目的:比较糖尿病与正常家兔的L型钙通道电流(ICa,L),探讨糖尿病家兔在缺血再灌注(I/R)时心室肌细胞ICa,L的变化。方法:糖尿病组以四氧嘧啶制作糖尿病模型,成模后4周行电生理实验;正常组家兔饲养1周后直接行电生理实验;所有家兔均以胶原酶Ⅱ分离单个心室肌细胞。所得细胞分正常对照组和糖尿病对照组(台式液灌流10min)、正常缺血再灌注组和糖尿病缺血再灌注组(缺血液灌流5min,再灌注液灌流5min),每组分别记录基础状态及灌流后10min的ICa,L,比较各组的电流密度。结果:I/R、时间均对ICa,L有影响(P<0.01),糖尿病对ICa,L无明显影响(P>0.05),I/R和时间有交互作用(P<0.01),I/R、时间和糖尿病没有交互作用(P>0.05)。时间-电流密度线上糖尿病缺血再灌注组I/R后直线斜率较正常缺血再灌注组小。结论:I/R后ICa,L减少的程度可能为糖尿病对缺血预适应的影响提供离子通道学证据。

化瘀生脉方对内皮细胞缺血缺氧保护作用的实验研究

为研究化瘀生脉方对体外培养的内皮细胞缺血缺氧损伤模型的保护作用。将化瘀生脉中药兔血清培养液、正常兔血清培养液分别加入缺血缺氧损伤的内皮细胞培养,分别称为化瘀生脉组、空白对照组。另外,将正常兔血清培养液加入正常内皮细胞培养,称为正常组。进行细胞死亡率的检测,细胞培养液中乳酸脱氢酶的测定,并于透射电镜下观察内皮细胞的形态结构变化。结果显示,3组细胞死亡率、LDH漏出量方差分析均为P<0.001;正常组内皮细胞死亡率、LDH漏出量最小,空白对照组最高,化瘀生脉组低于空白对照组。3组均数两两比较,P<0.01,差异均有显著性。透射电镜下见,化瘀生脉组较空白对照组粗面内质网数目较多,无扩张,其上附着的核糖体存在,平滑内质网扩张程度减弱。表明化瘀生脉方对内皮细胞有一定的保护作用。

Wistar大鼠的咬肌放射损伤模型

背景:构建稳定可靠的咬肌放射损伤模型对颌面部肿瘤放疗的相关研究有重要意义。目的:以放射剂量40Gy照射后Wistar大鼠咬肌构建大鼠咬肌放射损伤模型。方法:成年Wistar大鼠20只,随机分成正常对照组和放射损伤组。放射损伤组采用直线加速器照射大鼠咬肌区累积40Gy制造咬肌放射损伤。在28d后,在光镜及电镜下观察咬肌放射区病理改变,RT-PCR检测转化生长因子β1的基因表达。结果与结论:40Gy照射后28d大鼠咬肌区出现结构受损、血管密度减低(P<0.01)等放射损伤表现,同时引起转化生长因子β1的基因表达升高(P<0.001)等机体被动修复表现。结果证实Wistar大鼠咬肌区直线加速器40Gy照射可以作为咬肌放射损伤模型。

心房肽Ⅲ对离体大鼠心肌缺血再灌注后冠脉流量的影响

目的观察心房肽Ⅲ(APⅢ)对离体大鼠心肌缺血再灌注后冠脉流量的影响。方法将36只健康雄性SD大鼠腹腔内注射肝素,15 min后开胸取出心脏,立即置于0℃冷Krebs-Henseleit灌流液中,使其停跳。在液面下经主动脉断端行主动脉逆行插管,以线结扎固定,立即开始灌流。共选取36个心脏,随机分为正常对照组、模型对照组、阳性药对照组及APⅢ高、中、低剂量组6组,每组6个。阳性药对照组给予维拉帕米(浓度1×10-7 mol/L),APⅢ高、中、低剂量组APⅢ给药浓度分别为1×10-7、3×10-8、1×10-8 mol/L。除正常对照组持续灌流90 min外,其余各组均停灌30 min,复灌60 min。时测量冠脉流量(CF),计算CF恢复率。结果 APⅢ高、中、低剂量组和阳性药对照组均能促进再灌注后CF恢复。模型对照组复灌后各时间点CF恢复率均显著低于同时期正常对照组(P<0.01)。阳性药对照组各时间点CF恢复率均高于正常对照组(P<0.01,P<0.05);APⅢ高剂量组各时间点CF恢复率均高于模型对照组(P<0.01,P<0.05);APⅢ中剂量组除第10、50、60 min外均可显著增加CF恢复率(P<0.01,P<0.05);APⅢ低剂量组在第1、50、60 min显著增加CF恢复率(P<0.01,P<0.05);APⅢ高剂量组较阳性药对照组差异无统计学意义(P>0.05),APⅢ低剂量组和APⅢ中剂量组在1～20 min低于阳性药对照组。结论 APⅢ可以减少再灌注,"无复灌"现象,对离体心脏缺血再灌注后的冠脉具有保护作用。

高温应激致麒麟鸡(卷羽鸡)肝损伤试验动物模型的建立

本试验旨在建立急性应激致禽类肝损伤的试验动物模型。对麒麟鸡(卷羽鸡)进行持续高温应激后,检测血清中的肝损伤酶谷丙转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、胆碱脂酶(CHE)和乳酸脱氢酶(LDH)活性的改变,观察肝脏病理组织学变化。结果显示,高温应激前期,麒麟鸡血清肝损伤酶AST和ALT活性极显著升高(P<0.01),高温应激后期,AST活性显著低于正常水平(P<0.05),而ALT活性极显著低于正常水平(P<0.01);持续高温应激期间,CHE的活性一直低于正常水平,高温应激后期,CHE活性极显著低于正常水平(P<0.01);在高温应激下LDH活性呈先下降后上升再下降的变化趋势,高温应激后期,LDH活性极显著高于正常水平(P<0.01)。高温应激引起麒麟鸡肝细胞出现水泡变性、肝细胞核浓缩现象。结果表明,采用急性热应激可诱导麒麟鸡肝损伤试验模型,试验模型具备肝脏水泡变性和核浓缩病理特征。

高温气体吸入致豚鼠急性肺损伤动物模型制备的实验研究

目的制备高温气体吸入致豚鼠急性肺损伤(ALI)动物模型。方法选择20只雄性豚鼠随机分为2组,每组10只,其中健康豚鼠为对照组、急性肺损伤豚鼠为实验组。实验组吸入150℃高温气体制作豚鼠ALI动物模型,然后处死2组豚鼠并取豚鼠右肺的大体标本,称重计算豚鼠肺湿/干重比(W/D),选取2组豚鼠左上肺组织进行HE染色,利用光学显微镜观察肺组织病理变化情况,及时记录其病理变化的结果;对豚鼠动脉血液进行血气分析并比较。结果实验组豚鼠肺组织病理结构呈现明显的急性炎症性改变;实验组豚鼠肺W/D比值显著高于对照组[(5.72±0.31)vs(4.88±0.11),P<0.05];实验组豚鼠pH、PaO_2显著低于对照组[(7.02±0.12)vs(7.38±0.04),(98.80±62.60)mm Hg vs(177.30±24.70)mm Hg,P<0.05],而PaCO_2显著高于对照组[(74.70±23.23)mm Hg vs(31.10±8.77)mm Hg,P<0.05]。结论成功制作豚鼠ALI实验动物模型。该模型达到ALI要求,仿真性能高、重复性好、稳定性高,为今后研究高温气体吸入致ALI的临床及基础研究提供了可靠的动物模型。