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海南岛热带雨林区芽孢杆菌收集及Bt菌鉴定 被引量:13
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作者 张文飞 全嘉新 +6 位作者 谢柳 王茜 易艳桃 丰玫玫 朱麟 王锐萍 方宣钧 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期265-274,共10页
本研究系统地对海南岛热带雨林自然保护区进行了土壤样品的采集、芽孢杆菌的分离收集和Bt菌株的鉴定。从尖峰岭热带雨林区、五指山热带雨林区、吊罗山热带雨林区、霸王岭热带雨林区总共采集了土壤样品1882份,采用醋酸钠培养基结合高温... 本研究系统地对海南岛热带雨林自然保护区进行了土壤样品的采集、芽孢杆菌的分离收集和Bt菌株的鉴定。从尖峰岭热带雨林区、五指山热带雨林区、吊罗山热带雨林区、霸王岭热带雨林区总共采集了土壤样品1882份,采用醋酸钠培养基结合高温方法分离出芽孢杆菌3924份,鉴定出Bt分离株158份,Bt菌株的分离率和出菌率分别为4.03%和8.40%。结果分析表明,海南岛热带雨林区芽孢杆菌及Bt菌株分布对环境和生态表现出一定的规律性,一般海拔900m至1400m的Bt菌株含量高、植被覆盖率高,土壤腐殖质含量高的热带沟谷雨林带Bt菌株含量最高。显微观察发现,获得的Bt菌株其伴胞晶体有菱形、球形、方形、椭球形、不定性等多种形状。利用SDS-PAGE方法对获得的Bt分离株进行了伴胞晶体进行分析,发现伴胞晶体的分子量有20kD到150kD不等。进一步利用PCR-RFLP技术对Bt分离株进行了cry基因型的分析,初步发现这些Bt菌株含有cry1、cry3、cry4、cry6、cry30、cry40等基因型。我们还利用鳞翅目昆虫小菜蛾和鞘翅目昆虫椰心叶甲进行部分Bt分离株的生物测定,初步结果显示本研究鉴定出的Bt分离株具有不同的抗虫靶标,对同一靶标昆虫也表现出不同的杀虫活性。整体而言,本研究结果显示出海南岛热带热带雨林自然保护区因其独特的热带地理生境、自然的生物演化系统,使得热带雨林区蕴藏了Bt菌株资源多样化,值得期待挖掘出一些新的菌株和新的基因资源。 展开更多
关键词 芽孢杆菌 苏云金芽孢杆菌 伴胞晶体蛋白 cry基因型 海南岛热带雨林区
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黑龙江凉水自然保护区苏云金芽孢杆菌的收集与鉴定 被引量:1
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作者 张文飞 谢柳 +2 位作者 赵立仕 方宣钧 柳参奎 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期685-690,共6页
黑龙江凉水自然保护区是我国现有保存下来的较大片原始红松林基地之一,总面积6394hm^2,森林覆盖率95%以上。本研究从小兴安岭凉水自然保护区采集土样782份,采用醋酸钠培养基结合高温方法筛选土壤中的芽孢杆菌,通过光学显微镜观察... 黑龙江凉水自然保护区是我国现有保存下来的较大片原始红松林基地之一,总面积6394hm^2,森林覆盖率95%以上。本研究从小兴安岭凉水自然保护区采集土样782份,采用醋酸钠培养基结合高温方法筛选土壤中的芽孢杆菌,通过光学显微镜观察鉴定产生伴胞晶体的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis.Bt)。总计分离得到芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌分别为1735株和33株,Bt菌株的分离率和出菌率分别为1.90%和4.22%。利用SDS-PAGE和PCR—RFLP方法对筛选获得的成分离株进行了杀虫晶体蛋白和基因型分析,结果表明14株产菱形伴胞的&菌株,SDS-PAGE电泳分析芽孢后期产生分子量大小130kD蛋白带,PCR-RFLP分析初步鉴定为crylAc基因,其它产圆形或其它不定形晶体蛋白的&分离菌中,芽孢后期主要蛋白大小为20~150kD不等,PCR—RFLP方法鉴定结合PCR片段测序分析这些菌株含有新型cry4、cry39和cry40基因等。本研究是“中国助资源收鉴与利用”项目组成部分之一,凉水自然保护区苏云金芽孢杆菌的收集与鉴定目的是要对整个东北地区成资源分布和多样性作一个初步评估,实验结果表明东北森林地区具有丰富多样的威菌株和杀虫基因资源。 展开更多
关键词 苏云金芽孢杆菌 伴胞晶体蛋白 cry基因型 SDS-PAGE PCR-RFLP
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Bt伴孢晶体毒素对不同时期中华卵索线虫的毒力 被引量:1
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作者 吴鸿雁 饶祥军 +1 位作者 刘绪生 王国秀 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期405-409,共5页
采用不同浓度的10株Bt伴孢晶体蛋白分别作用于中华卵索线虫受精卵及各期幼虫,探讨该类Bt蛋白对多种农林害虫天敌中华卵索线虫的安全性。结果表明:S1-1、S1-4、S3-2、S3-3、S7-1、S7-6和S8-1等7个菌株同时表达cry1Ac和cry5基因,S1-8、S2-... 采用不同浓度的10株Bt伴孢晶体蛋白分别作用于中华卵索线虫受精卵及各期幼虫,探讨该类Bt蛋白对多种农林害虫天敌中华卵索线虫的安全性。结果表明:S1-1、S1-4、S3-2、S3-3、S7-1、S7-6和S8-1等7个菌株同时表达cry1Ac和cry5基因,S1-8、S2-1和HD-1等3个菌株只表达cry1Ac基因。含Cry5蛋白的菌株对线虫卵表现出一定的杀灭毒性,其中S1-4菌株的毒力最强,LD50作用24、48和72h时分别为0.1503、0.1313和0.0182μg/mL。而Bt伴孢晶体蛋白对感染期幼线虫和寄生后期幼线虫无明显致死效应;经Bt处理的感染期幼线虫对棉铃虫的感染率及平均感染强度与对照组无显著性差异(P>0.05),寄生后期幼线虫能正常蜕皮和交配产卵。将含上述浓度Bt蛋白的棉花叶片喂食已感染线虫的棉铃虫,线虫能够正常发育并从宿主体内脱出。 展开更多
关键词 中华卵索线虫 昆虫天敌 Bt伴孢晶体蛋白 cry基因型 毒力 农林害虫
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Identification of medaka magnetoreceptor and cryptochromes
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作者 Yunzhi Wang Jianbin Chen +1 位作者 Feng Zhu Yunhan Hong 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2017年第3期271-278,共8页
Magnetoreception is a hallmark ability of animals for orientation and migration via sensing and utilizing geomagnetic fields.Magnetoreceptor(MagR) and cryptochromes(Cry) have recently been identified as the basis for ... Magnetoreception is a hallmark ability of animals for orientation and migration via sensing and utilizing geomagnetic fields.Magnetoreceptor(MagR) and cryptochromes(Cry) have recently been identified as the basis for magnetoreception in Drosophila.However,it has remained unknown whether MagR and Cry have conserved roles in diverse animals.Here we report the identification and expression of magr and cry genes in the fish medaka(Oryzias latipes).Cloning and sequencing identified a single magr gene,four cry genes and one cry-like gene in medaka.By sequence alignment,chromosomal synteny and gene structure analysis,medaka cry2 and magr were found to be the orthologs of human Cry2 and Magr,with cry1 aa and crylab being coorthologs of human Cry1.Therefore,magr and cry2 have remained as single copy genes,whereas cry1 has undergone two rounds of gene duplication in medaka.Interestingly,magr and cry genes were detected in various stages throughout embryogenesis and displayed ubiquitous expression in adult organs rather than specific or preferential expression in neural organs such as brain and eye.Importantly,magr knockdown by morpholino did not produce visible abnormality in developing embryos,pointing to the possibility of producing viable magr knockouts in medaka as a vertebrate model for magnet biology. 展开更多
关键词 magnetoreception MagR cryptochrome magnetogenetics
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