对鞘翅目害虫高毒力Bt基因cry3Aa7的分离克隆及表达研究

从国内分离的对鞘翅目叶甲科害虫高毒力的Bt菌株中克隆了 3.0kbcry3Aa基因大片段 ,完成了该片段的亚克隆和全序列测定。该基因编码区为 1932bps,编码的蛋白质由 6 4 4个氨基酸残基组成 ,分子量 73.1ku ,等电点为 pH5 .16 5 ,为弱酸性蛋白。该蛋白中Ser、Leu、Thr含量最高 ,分别为 8.2 2 %、8.0 7%和 7.76 %。通过穿梭载体将该基因导入Bt无晶体突变株中 ,获得工程菌Biot2 0 5。cry3Aa7基因在其中能正常表达 ,并形成扁方形晶体。工程菌Biot2 0 5对榆蓝叶甲 (Pyrrhaltaaenescens)校正死亡率为 86 .2 1%。该基因序列已在EMBL、GenBank中登记 ,并被国际Bt δ 内毒素基因命名委员会正式命名为cry3Aa7。

转cry3Aa7和cry1Ba3双价基因抗虫马铃薯和工程菌的研制

马铃薯甲虫是世界上著名的毁灭性检疫害虫,常年造成马铃薯减产30％-50％,发生严重年份损失达90％以上,培育转基因抗虫马铃薯对我国马铃薯生产具有极其重要的意义。 本研究克隆了对鞘翅目害虫高毒力的cry3A基因和对鞘翅目、鳞翅目害虫高毒的cryIB基因。