环介导等温扩增技术快速检测脑膜炎奈瑟菌属方法的建立

目的应用环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术建立一种快速敏感的脑膜炎奈瑟氏菌属检测方法。方法针对脑膜炎奈瑟菌属(ctrA)基因序列的6个区域设计4条LAMP引物(2条内引物、2条外引物),同时设计2条环引物,并对反应条件和反应体系进行优化。分别验证该方法的特异性及敏感性,并与普通PCR进行了比较。结果在适宜反应条件所设计引物对脑膜炎奈瑟菌的扩增的特异性及敏感性均较好,与普通PCR方法比较,LAMP敏感性比普通PCR高10倍。结论 LAMP检测速度相比PCR更快速,在60 min内即可完成扩增反应。实验建立的LAMP方法能够快速、灵敏、特异地检测脑膜炎奈瑟氏菌,适合基层检验部门及小型实验室与现场监测等使用。

环介导等温扩增技术在脑膜炎奈瑟菌检测中的应用

目的应用环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术建立一种快速敏感的脑膜炎奈瑟菌属检测方法。方法对脑膜炎奈瑟菌种属基因(ctr A)序列的6个区域设计4条LAMP引物(2条内引物、2条外引物),同时设计2条环引物,并对反应条件和反应体系进行优化。分别验证该方法的特异性及敏感性,并与PCR检测方法进行比较。结果适宜反应条件所设计引物对脑膜炎奈瑟菌采用LAMP扩增技术,其特异性及敏感性均高于PCR检测。结论本实验建立的LAMP方法能够快速、灵敏、特异地检测脑膜炎奈瑟菌。相比普通PCR更快速,在60 min内即可完成扩增反应,扩增效率高,反应不需要精密控温设备和高级复杂的分析仪器,对操作人员的熟练度和专业水平要求不高,适合基层检验部门及小型实验室与现场监测等使用。