碳氮营养和培养条件对芽孢杆菌(Bacillus sp.)A4生长的影响

芽孢杆菌(Bacillus sp.)A4是一株具有溶甲藻能力的菌株,为探究营养条件与培养条件对A4生长的影响,明确在多因素共同作用下菌株的生长特性,先以单因素方法比较不同碳、氮营养因子对其生长的影响,再以Plackett-Burman方法综合比较碳源、氮源、pH、接种菌量、温度、转速、装液量等因子对其生长的协同影响效应。结果显示,A4菌对有机碳源玉米浆和有机氮源大豆蛋白利用效果最好,培养24 h后菌量分别达到3.58×10~8、3.19×10~8 CFU/ml。各因子的重要性排序依次为大豆蛋白、温度、玉米浆、转速、接种菌量、pH、装液量,且大豆蛋白和温度对A4菌的生长影响显著(P<0.05)。研究表明,培养条件对菌株生长调控也有重要意义,在评估相关因素对菌株生长或生态功能的影响时,须将营养条件和培养条件协同分析。

丝孢酵母单细胞油脂的研究进展

单细胞油脂(single cell oil,SCO)是指单细胞产油微生物在菌体内大量积累的油脂。丝孢酵母是一种高产油脂的单细胞微生物。本文首先总结了丝孢酵母属常见的产油菌种及其脂肪酸组成,进而详细介绍了碳源、氮源、C/N比、无机盐等培养基成分和接种量、pH值、温度、培养时间等培养条件对其油脂生产的影响,并且全面归纳了丝孢酵母对木质纤维素水解物、工农业废弃物、淀粉类原料等廉价原料的利用,以及丝孢酵母SCO的应用。本文希望为丝孢酵母在SCO开发及利用领域的研究提供参考依据。

短杆菌(Brevibacteriumsp WX-10)产酶条件研究

研究了碳源、氮源、无机盐、金属离子等培养基组成和初始pH、通风量、温度等发酵条件对短杆菌(Bre vibacteriumspWX 10)产酶的影响,通过正校试验优化得到的产酶培养基组成及发酵条件:蔗糖1%,NaCl2 5%,牛肉膏0 05%,NaNO30 05%,pH7 5,500mL三角瓶装培养基50mL,30℃于220r/min旋转式摇床上培养72h.在该培养条件下WX 10产酶量是原培养条件下的1 85倍.

脂肪酶产生菌Aspergillus sp. FS132产酶条件的初步优化及其18S rRNA基因序列的比较分析

从新疆火焰山口土样中分离的一株脂肪酶产生菌FS132,菌落形态表明为霉菌。对其产酶条件的初步优化表明,产酶的最适培养时间为45h,培养基最适初始pH 7.0,最适培养温度36℃,最适摇瓶空气量25mL/250mL锥形瓶。为进一步鉴定该菌株,克隆测定了该菌18S rRNA基因序列。并对其进行系统进化树分析,结果表明该菌与已报道的Aspergillus tamarii具有最紧密亲缘关系。

Pseudomonadaceae sp.胆固醇氧化酶产酶条件优化及其初步纯化

Pseudomonadaceae sp.可以发酵生产胆固醇氧化酶。本文对Pseudomonadaceae sp.进行产酶条件的优化及产物的初步分离。确定其最适培养基及培养条件,优化后胆固醇氧化酶的酶活力可达1691.72U/L,比优化前839.35U/L有较大提高。经过(NH4)2SO4沉淀及Sephadex G-75凝胶过滤层析初步纯化后酶比活力达24.95U/mg,纯化倍数为9.18。

几丁质酶产生菌的筛选及产酶条件的研究

从３０１株几丁质降解菌包括细菌、放线菌和真菌中，筛选出一株产几丁质酶活力较高的链霉菌ＡＯ_（０４８）（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｓｐ． Ａ_（０４８））。其产酶的适宜条件是，培养温度 ３０℃，培养基 ｐＨ７．０～７．５，碳源几丁质，氮源ＮＨ_４ＮＯ_３，体积溶氧系数 ｋｄ值为 １．５６ ｘ １０^（－６）ｍｏｌ／（ｍＬ· ｍｉｎ· ａｔｍ），振荡培养 １２０ｈ，产酶可达 ２５．１Ｕ／ｍＬ。

海洋红酵母RH1菌株发酵培养条件的研究

该研究比较了不同碳源、氮源、无机盐对海洋红酵母菌(Rhodotorula sp.)RH1菌株发酵产量的影响,通过葡萄糖、蛋白胨、酵母膏和硫酸镁(MgSO4)4因素3水平的正交试验,确定了RH1菌株的最优培养基为蛋白胨10 g.L-1,酵母膏15 g.L-1,葡萄糖20 g.L-1,MgSO40.25 g.L-1,磷酸二氢钾(KH2PO4)0.25 g.L-1,氯化钠(NaCl)10 g.L-1。结果显示,该菌株最佳摇瓶发酵条件为接种量10%,初始pH 5.0,摇瓶装液量80 mL/500 mL三角瓶,培养温度28℃,经48 h培养,菌量可达10.46×108cfu.mL-1,比优化条件前提高23.9%。还进行了RH1菌株25 L发酵罐扩大培养试验,在接种量为8%、初始pH 5.0、搅拌速率350～400 r.min-1、通气量9 L.min-1、温度28℃的条件下,经28 h的培养,菌量可达33.6×108cfu.mL-1。预计通过连续补料的方式进行培养,有望进一步提高菌量。

放射型根瘤菌WSH2601生产辅酶Q_(10)的摇瓶发酵条件

以放射型根瘤菌 (Rhizobusradiobacterium ,WSH2 6 0 1)作为辅酶Q10 的生产菌株 ,研究了氮源、碳源、接种量、溶氧、初始 pH、发酵温度及添加物等因素对细胞生长与产物辅酶Q10 合成的影响 .结果表明 :玉米浆和酵母膏是较好的氮源 ,葡萄糖与蔗糖是辅酶Q10 发酵的较好的碳源 ,接种量对辅酶Q10 发酵的影响不大 ,为 4 % .适宜的初始 pH值为 7,番茄汁能较好地促进细胞的生长 ;添加玉米浆、L 甲硫氨酸、番茄汁和异戊醇有利于产辅酶Q10 ;溶氧对细胞生长与产物辅酶Q10 合成的影响较显著 .通过正交试验初步确定了发酵条件 :碳源为 1.5 g/dL葡萄糖和 2 .5 g/dL蔗糖混合物 ,酵母膏 0 .8g/dL ,初始pH 7,每 5 0 0mL装液量为 5 0mL .最后经综合优化条件 ,在摇瓶发酵条件下 :菌体生长量 (以干重计 )为 13.8g/L ,发酵液中辅酶Q10 产量达到 2 2 .7mg/L ,比优化前分别提高 34%和 5 3% .

假单细菌GX_4-1利用鱼粉废水产絮凝剂的研究

研究了假单胞菌 (Pseudomonassp .)GX4 1利用鱼粉废水产生絮凝剂的条件 ,结果表明 ,适宜条件为废水COD浓度为 1 0g/L左右、初始pH为 7～ 9、培养温度为 30℃、摇床转速为 1 0 0～ 2 50r/min ,此时的絮凝率可高达 99 5%。同时发现在废水培养基不灭菌的条件下 ,该菌仍能产生高效的絮凝剂。该菌利用鱼粉废水产生的絮凝剂对高岭土悬液、土壤悬液和细活性炭粉末悬液和电瓷厂污水均有较好的絮凝作用。

微生物转谷氨酰胺酶的生产菌种诱变和发酵生产分析

对本研究室从土壤分离得到的链霉菌(Streptomyces sp.)WZFF.W-12菌株的斜面孢子预培养处于初萌发状态后,以亚硝基胍(NTG)进行诱变育种试验,并根据诱变处理后菌落的某些形态变化状况与产酶能力相结合的特征。初步判断产酶性能,挑选高酶活菌株,再经过初筛和复筛,获得一性能良好的产酶突变菌株WZFF.W-12.varMN-35,转谷氨酰酶活达0.53 U/mL,比原始菌株提高了1.2倍。然后在摇瓶条件下,对其发酵过程中的主要培养基组成及各种培养条件对菌体生长和产酶的影响作用进行了研究,结果表明该菌株发酵生产转谷氨酰酶的适宜碳源为可溶性淀粉+葡萄糖,氮源是多价胨外加少量的酵母膏,优化工艺条件为种龄时间24 h、接种量10％、初始pH值6.5、温度30℃和搅拌速度200 r/min,产酶能力显著提高,用小型生化反应器可以稳定生产2.0U/mL以上的酶产品。

降烟碱节杆菌发酵条件研究

在12种发酵培养基、不同温度、pH和培养时间条件下,对细菌生长能力和降烟碱能力进行测定,初步筛选出适宜4#菌株生长的为11号培养基,在5号、7号、9号培养基中4#菌株降烟碱能力强;适宜9#菌株生长的为8号培养基,在7号、9号、11号、12号培养基中9#菌株的降烟碱能力较强。适宜4#和9#的培养条件分别为30℃、pH6.5、48h和35℃、pH6.5、56h。

一种野生羊肚菌的驯化栽培研究

北京地区采集、分离得到的野生羊肚菌菌株羊CP,鉴定为Morchella owneri,其菌丝培养条件研究发现,羊CP菌丝生长最适碳源为乳糖;生长最适氮源为蛋白胨和黄豆粉;最适温度为25℃;最适培养基pH为8.0。通过出菇试验比较,羊CP鲜菇平均产量(1.235 kg·m-2)较目前大规模生产使用的菌株羊1 (0.880 kg·m-2)和羊4 (1.150 kg·m-2)分别提高40.34%和7.40%,表明其在日光温室条件下具有较高的栽培推广价值。

不同苜蓿—根瘤菌结瘤固氮能力变异的研究

从新疆、重庆和北京3个地区收集了7株苜蓿,从每株苜蓿上分离和纯化出1个根瘤菌菌株。通过抗生素筛选,得到了抗链霉素、新霉素、壮观霉素和卡那霉素的菌株4个,分别是HSmr、ANeor、ⅠSpr和XKmr。4个菌株和7个苜蓿品种做竞争结瘤实验和固氮能力实验结果表明:根瘤菌的竞争结瘤能力是根瘤菌本身的遗传因素和它长期所处的生态环境共进化的结果。几个菌株同时接种时,双感染或多感染普遍发生,并且双感染或多感染发生率受到多种因素的作用,培养条件、苜蓿品种、根瘤菌菌株以及培养条件与苜蓿品种相互作用都影响其发生率。苜蓿的固氮能力受到菌株、苜蓿品种以及两者相互作用的影响。菌株XKmr竞争结瘤能力最差,但固氮能力最强。

产紫杉烷类物质的链格孢1011菌种的培养和发酵条件

用真菌学方法对产紫杉烷类物质的链格孢1011菌种培养和发酵条件进行了研究,结果表明:该菌易培养,生长发育迅速。用固体培养基培养,划破菌落或变温交替培养,可促进大量产孢。发酵条件优化结果:种子培养的最佳时间为 3d,发酵最佳培养时间为 8d,前体物苯甲酸纳可促进化合物Ⅰ的合成,通过氮、碳源优化组合,发酵培养基的最佳氮、碳源每100mL萄糖2.2g,花生饼粉2.6g,黄豆饼粉0.2g,淀粉2.2g,蛋白胨0.48g,酵母膏0.5g,氯化铵0.58g,硫酸镁0.3g,磷酸二氢钾0.3g。采用最佳发酵条件优化培养,可使发酵产物化合物Ⅰ的组分比原始培养条件下产量提高了262％。

贺兰山紫蘑的分离、鉴定与培养条件

从采集自内蒙古贺兰山青海云杉林下的紫蘑子实体中分离获得纯培养菌丝体,结合形态学特征与ITS序列分析鉴定其分类学地位,研究了菌丝生长的最适培养基、温度和pH,并结合其菌根菌特性,进一步考察了宿主植物青海云杉根、枝、针叶浸提物对菌丝生长的影响。结果表明:Cortinarius sp.菌株的ITS序列与GenBank中报道的采集于加拿大的Cortinarius rufoolivaceus(GenBank登录号为FJ039645)的ITS序列同源性最高,为98%,结合其形态学特征,确定该菌株为丝膜菌属(Cortinarius sp.)真菌;菌丝体生长的最适温度为15~20℃,最适pH为5.5~6.0;合适浓度的青海云杉枝及针叶浸提物对菌丝生长有显著的促进作用,菌丝干质量最大分别达到(8.62±0.27)mg和(6.93±0.27)mg,分别比对照提高了45.85%和17.26%。

类芽孢杆菌木聚糖酶产生菌株的筛选及其产酶条件优化

以木聚糖为唯一碳源,从富含半纤维素的土壤中分离纯化出115株产木聚糖酶的菌株,以DNS法从中筛选出一株木聚糖酶酶活最高的细菌,经16S rDNA鉴定其为类芽孢杆菌。经单因素试验和正交设计试验,得出该菌株的最佳产酶培养基为:玉米芯木聚糖30.0g/L、胰蛋白胨6.0g/L、K2HPO45.0g/L、吐温803.0g/L。用此配方对菌株进行摇瓶培养,最佳培养条件为:初始pH=7.0、温度32℃、摇床转数220r/min,在此条件下培养96h,发酵液中木聚糖酶活力达到194.67IU,是未经优化的基础产酶培养条件产酶能力的1.58倍。

培养条件对海洋假单胞菌脂肪酸的影响

研究了不同温度条件下一株海绵附生假单胞菌(Pseudomonassp.)在不同碳源培养基中的生长情况及脂肪酸变化.结果表明,该海洋菌生长最适温度为30℃,在以淀粉作为外加碳源的培养基中生长最好;实验菌含13种脂肪酸,主要是c16:1(n7)、c15:0、c16:0、c17:0、c18:1(n6)、c18:1(n9)、9,10cp c17:0和其同分异构体.在30℃温度条件下,不饱和脂肪酸的相对含量急剧减少.在有外加碳源(葡萄糖和淀粉)的培养基中生长的细菌,奇数脂肪酸和环丙基脂肪酸含量远比未外加碳源的低.聚类分析结果表明,两种环境因子中,温度比碳源的影响更明显.

八种因素对头孢霉菌丝脂肪酸不饱和指数的影响

为了探讨环境胁迫和真菌脂肪酸不饱和度的关系 ,用合成培养基探讨 8种单一因子对头孢霉(Cephalosporiumsp .)菌丝体脂肪酸不饱和指数的影响。结果表明 ,低起始 pH值 (4 .0～ 5 .0 ) ,低培养温度 (10～ 15℃ ) ,有利于获得高不饱和指数 ;随着三角瓶装液量的增加 ,脂肪酸不饱和指数逐步降低 ;接种量对脂肪酸不饱和指数影响不大 ;葡萄糖或蔗糖作为碳源 ,NH4 Cl或 (NH4 ) 2 SO4 作为氮源 ,低碳源浓度 (10～ 2 0g/L)有利于获得高不饱和指数 ;随着培养时间增加 ,脂肪酸不饱和指数逐步增加 ,至 10d时脂肪酸不饱和指数可达最高 ,为 170 .

自选梨酒酿造用酵母YJ-60培养条件优化

以培养液OD值为评价指标,通过单因素和正交试验对自选梨酒酿造专用酵母Saccharomyces sp.YJ-60的培养条件进行研究。结果表明,控制培养基中加糖量为3.6%、初始pH值为5.0、培养温度30℃、摇床转速220r/min时,菌株YJ-60代谢旺盛、性状良好,培养16h其OD值达到2.033,比优化前提高了13.4%。

培养条件对杜氏藻β-胡萝卜素含量的影响

为了优化杜氏藻的培养条件,对采自山西运城盐湖的杜氏藻（Dunaliella sp.）采用单因素和正交实验方法,研究了温度、盐度和氮、磷、铁元素对其细胞增殖和β-胡萝卜素积累的影响。结果显示杜氏藻的β-胡萝卜素含量与吸光度OD453nm之间存在良好的线性关系,利用吸光值表征杜氏藻β-胡萝卜素含量步骤简单,数据准确,适于高效快速对样品进行测定。杜氏藻在20～25℃,1.0～2.0mol/L Na Cl时,较有利于β-胡萝卜素积累。杜氏藻生长至对数期后,高浓度的氮源、磷源都不利于β-胡萝卜素的积累,而铁源在实验期间,对杜氏藻β-胡萝卜素的积累无影响。进一步优化,培养基中有利于β-胡萝卜素积累的Na NO3、KH2PO4和Fe C6H5O7的浓度最优组合为0.6200、0.0256、0.0010g/L。本实验得到了较适合杜氏藻积累β-胡萝卜素的培养基,为今后当地开发利用高产β-胡萝卜素藻株奠定了理论基础。