Vero细胞微载体不同培养方法的评价

对三种不同培养方法进行细胞生长速度、密度、营养及代谢产物浓度的比较分析 ,以优化和筛选最佳培养条件与方式。用同体积生物反应罐 ,基本培养条件相同 ,采用批培养、再循环培养、灌流培养三种方式进行了Vero细胞微载体 (CytodexI)的周期培养。三种培养方法均达到预期效果 ,最终细胞密度分别为每毫升 2 .0 9× 10 6 、3 .3 7×10 6 、4 .3 4× 10 6 。灌流培养倍增水平最高 ( 5 .5 9) ,倍增时间最少 ( 3 0 .0 5h)。表明灌流培养优于再循环培养 ;而再循环培养兼容批培养及灌流培养的特点 ,又优于批培养。

胰腺疾病体外细胞模型研究进展

不健康的饮食、吸烟、饮酒会引起多种胰腺疾病,包括胰腺炎、糖尿病和胰腺癌等,严重威胁人体健康。构建体外细胞模型在研究胰腺疾病的病因病机及其药物的开发及筛选中具有重要意义。目前,国内外学者已开发出多种体外胰腺疾病模型。该文概括了常见胰腺疾病的体外细胞模型,并从模型细胞的特性、培养方式、造模方式、评价指标等方面进行综述,以期为胰腺疾病相关研究人员提供参考。

新生大鼠海马神经元原代培养方法的优化与鉴定

目的 建立一种简单、高效、稳定的海马神经元原代培养方法,以获得高纯度、高活力的海马神经元。方法 24h内新生鼠,用含B27的Neurobasal无血清培养基培养,显微镜下观察神经元的生长状态,MTS法测定不同时间神经元细胞的活力,并用Tau-1和MAP-2抗体鉴定海马神经元的纯度。结果 1接种24h后,细胞完全贴壁,可见双突起和多个突起的神经元;72h后,海马神经元胞体饱满,立体感较强,突起之间相互形成突触联系,神经元极性完全建立;5～6d的神经元,突起形成密集的神经纤维网络。2MTS法测定结果显示,在培养1～8d时间内,海马神经元随着培养时间的延长,活力增加,第8d细胞活性到达高峰,继续培养时,活力开始下降。3Tau-1和MAP-2免疫荧光检测神经元,海马神经元纯度达到（85.5±5.4）%。结论 本实验方法简单易行,神经元纯度高、细胞活性好,且体外存活时间长,是神经疾病体外研究的良好细胞模型。

纳米材料的神经毒性作用机制及评价方法

近年来,纳米材料在多种生物医学领域被广泛应用,其生物安全性也受到越来越多的关注。多种纳米材料可穿透血脑屏障进入中枢神经系统,产生神经毒性。本文讨论了纳米材料进入中枢神经系统的方式及因素;纳米材料的特异性以及非特异性的中枢神经毒性效应、外周神经毒性及其作用机制;并论述了国内外用于体内神经毒性、体外神经细胞培养模型的神经毒性以及替代的评价方法,为纳米材料的安全性评价及神经毒性探究提供参考。

病毒唑抑制流行性出血热病毒的实验研究

报道了国产病毒唑在 Vero-E6细胞培养中对流行性出血热病毒的抑制作用。实验证明在病毒感染细胞1,2,3,4,5,6天后,加入药物均有明显抑制病毒繁殖的作用。最小有效浓度为62.5μg/ml,最大抑制指数为4.75。无直接灭活病毒作用。感染前预先加药处理细胞,不能防止病毒在细胞内繁殖。此结果为病毒唑治疗流行性出血热提供依据。

改良DNA染色法对支原体检测的效果评估

目的评估改良的DNA染色法检测支原体的效果。方法使用无水乙醇为固定液和DAPI为荧光染料进行改良的DNA染色法,通过改变细胞接种浓度、细胞培养时间、接种支原体的浓度以及接种猪鼻支原体、口腔支原体和精氨酸支原体,观察支原体污染细胞进行DNA染色后的效果变化。结果Vero细胞接种浓度在1.0×10^(5)个/mL时,DNA染色效果最好;支原体在传代培养5 d后进行DNA染色效果更好;接种支原体污染的细胞上清,胞核外有较少的蓝色荧光,而接种支原体污染的细胞培养物的胞核外可见大量的蓝色荧光;猪鼻支原体的DNA染色效果比口腔支原体和精氨酸支原体的DNA染色效果好。结论改变细胞接种浓度、细胞培养时间、支原体浓度以及种类,都能观察到不同的DNA染色结果,从而证明改良的DNA染色法也能用于支原体DNA染色检查。