人工培养蛹虫草多糖的分离纯化及其结构的初步研究

目的人工培养蛹虫草多糖类成分的提取与纯化。方法采用SephadexG 10 0柱色谱法进行了分离纯化 ;通过理化常数测定、化学和光谱分析等方法研究了其化学结构特征。结果分离得到CPS 1、CPS 2和CPS 33种多糖 ,其单糖组成分别为 :CPS 1:鼠李糖 木糖 甘露糖 葡萄糖 半乳糖 (1∶6 .4 3∶2 5 .6∶16 .0∶13.8) ;CPS 2 :鼠李糖 葡萄糖 半乳糖 (1∶4 .4 6∶2 .4 3) ;CPS 3为只含葡萄糖的均一多糖。 3种多糖的分子量分别为 2 30 0 0、12 90 0和 5 0 0 0。CPS 1主要含有β糖苷键 ,CPS 2和CPS 3主要含有α糖苷键。 结论CPS 1为一种含有 5种单糖 ,糖苷键为 β构型的多糖 ;CPS 2是一种含有 3种单糖 ,糖苷键为α构型的多糖 ;CPS 3是一种仅含葡萄糖。

蛹虫草药理作用及化学成分研究进展

随着蛹虫草市场需求的不断扩大,蛹虫草作为一种药食两用菌已经被广泛接受。文章从蛹虫草的药理作用、化学成分及人工栽培3方面展开论述,为蛹虫草进一步研究与开发提供一定的理论依据。

蛹虫草培养液成分研究(Ⅰ)

目的对人工蛹虫草培养液的化学成分进行研究。方法采用常压、加压硅胶柱色谱、制备色谱进行分离 ,通过理化和波谱分析方法鉴定化合物结构。结果目前从氯仿部分分离得到 9个化合物 ,鉴定了其中的 5个化合物 ,分别为 :环 (苯丙氨酸 脯氨酸 ) [cyclo (L phenylalanyl L prolyl) ,Ⅰ ];环 (亮氨酸 脯氨酸 ) [cyclo (L leucyl L prolyl) ,Ⅱ ];环 (缬氨酸 脯氨酸 ) [cyclo (L valyl L prolyl) ,Ⅲ ];环 (丙氨酸 脯氨酸 ) [cyclo (L alanyl L prolyl) ,Ⅳ ];7,8 二甲基 异咯嗪 (7,8 dimethyl iso allox azine ,Ⅴ )。结论这 5个化合物均是从蛹虫草培养液中首次分离 ,且化合物Ⅰ、Ⅳ、Ⅴ

人工蛹虫草药材高效毛细管电泳指纹图谱研究

目的:利用高效毛细管电泳(HPCE)技术建立人工蛹虫草药材的指纹图谱。方法:采用50 cm×75μm毛细管柱,以0.5 mmol/L硼砂溶液为缓冲液,运行电压为20 kv,检测波长为254 nm,柱温25℃。结果:建立的指纹图谱中共有11个共有峰,且方法学考察符合规定的标准。结论:该法准确简便,可作为控制人工蛹虫草中药材内在质量的有效手段。

蛹虫草子实体和蛹虫草根醇提物抗氧化活性的对比

蛹虫草根作为人工蛹虫草的副产品未得到有效利用。本试验以10 mL体积分数70%乙醇分别提取1 g蛹虫草子实体和蛹虫草根,分析了二者的醇溶性总糖、还原力和清除自由基的能力。结果表明:蛹虫草子实体的醇溶性总糖含量为蛹虫草根部2倍;蛹虫草根部醇提物还原力和清除DPPH自由基能力要明显高于蛹虫草孢子头子实体醇提物;后者清除羟自由基的能力稍强于前者。说明人工蛹虫草根有潜在的开发利用价值。

人工培养蛹虫草高效液相色谱指纹图谱的初步研究

目的建立人工蛹虫草药材的高效液相色谱指纹图谱。方法利用Agilent ZOBAXSB-AqC18(250mm×4.0mm,5μm)色谱柱,甲醇5%～60%为流动相梯度洗脱,分析时间30min,检测波长260nm,进样量1μL,体积流量1.0mL/min;对样品超声提取条件以及流动相、检测波长等色谱条件进行了系统优化设计。结果建立的指纹图谱中有11个共有峰,且方法学考察符合规定的标准,并以"中药色谱图分析和数据管理系统"软件对11个人工蛹虫草样品进行了相似度评价。结论该法准确简便,可作为控制人工蛹虫草药材内在质量的有效手段。

反相高效液相色谱法测定蛹虫草中腺苷和虫草素的含量

建立一种新的反相高效液相色谱方法,用于蛹虫草中腺苷和虫草素的定性定量分析。样品经水超声提取,以终浓度20mmol/L柠檬酸、40mmol/L醋酸、20mmol/L三乙胺的混合溶液-乙腈(体积比98:2)为流动相,流速1.0mL/min,色谱柱CapcellpakC18(150mm×4.6mm,5μm)分离,柱温40℃,进样量10μL,紫外检测波长260nm。在此条件下,腺苷在1～1000μg/mL范围内有良好的线性关系(Y=33574X+54.526,R2=0.9999),检测限0.2μg/mL,回收率93.75%～96.90%,RSD为0.116%;虫草素在2～1000μg/mL范围内有良好的线性关系(Y=34385X+23.103,R2=1.0000),检测限0.2μg/mL,回收率92.03%～97.35%,RSD为0.104%。该方法样品处理简便、分离度高、杂质干扰小、回收率高、重复性好,能够对蛹虫草中腺苷和虫草素进行准确的定性定量分析。

人工蛹虫草子实体多糖的提取与含量测定

目的建立人工蛹虫草子实体多糖的提取与含量测定方法。方法采用正交试验筛选提取条件,苯酚-硫酸法测定多糖的含量。结果多糖的最佳提取条件为80倍量纯化水,45℃提取1次,每次10 min;线性范围为10～100μg·mL^-1,r=0.9998,加样回收率为99.41%,RSD=2.36%。3批供试品中多糖的平均含量为22.12%。结论该提取和测定方法操作简单,重复性好,结果准确可靠,可用于人工蛹虫草中多糖的提取与含量测定。

蛹虫草菌丝体液体培养条件研究

研究蛹虫草液体发酵条件,以干菌体得率为指标,通过单因素试验确定适宜的碳源、氮源、培养温度和pH值。结果表明,最适液体培养基为:葡萄糖20 g/L,蛋白胨5.0 g/L,最适pH=6.0,最适培养温度24℃。

北虫草培养基中多糖的闪式提取工艺研究

为实现北虫草[Cordyceps militaris(L.Fr.)Link]培养基的高效利用,采用闪式提取技术从北虫草培养基中提取多糖。通过单因素试验考察了闪式提取的液料比、提取时间、转速对提取效果的影响,利用正交试验法,优化了北虫草培养基中多糖提取的工艺。结果表明,提取时间和转速对多糖提取效果有显著影响,最佳提取工艺为液料比35∶1(m L∶g),提取时间12 min,转速8 000 r/min。在该条件下,闪式提取多糖得率为3.52%,略高于传统热水回流提取的得率,且只需在室温下进行,提取时间大大缩短,说明闪式提取是一种快速有效提取北虫草培养基中多糖的方法。

人工蛹虫草子实体中游离麦角甾醇的提取及含量测定

目的:从人工蛹虫草子实体中提取游离型麦角甾醇,并测定其含量。方法:采用正交设计法筛选走角甾醇最佳提取条件,用HPLC法测定麦角甾醇含量。结果:走角甾醇在5.8～58.0μg·ml^(-1)范围内线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率为99.5%(RSD=1.3%)。结论:该提取方法快速、简便,结果准确、可靠。

蛹虫草菌种复壮方法比较

蛹虫草菌种退化是蛹虫草栽培的关键问题。本试验采用子囊孢子分离复壮法、分生孢子分离复壮法、蚕蛹回接复壮法、基内菌丝分离复壮法等4种复壮方法,通过比较不同复壮方法后代菌丝生长速度、转色速度及子实体形成情况,初步判定子囊孢子分离复壮法和蚕蛹回接复壮法都有明显复壮效果。

北冬虫夏草C-58菌株的生物学特性

研究了不同C/N、培养基pH、光照和温度对北冬虫夏草C 58菌株菌丝体生长量的影响.结果表明:C 58菌株的菌丝生长最适C/N为 30∶1,最适温度为 22-24℃,最适pH为 6. 5,暗培养对菌丝生长有明显的促进作用.菌丝转色与菌代数有关.

类胡萝卜素对蛹虫草子实体形成的影响

类胡萝卜素对蛹虫草子实体形成有很大影响。为了探讨类胡萝卜素与蛹虫草子实体形成的关系,选取三种典型菌落形态的蛹虫草菌株,研究其在光照黑暗交替条件下不同菌落形态和类胡萝卜素含量对子实体形成的影响。采用酸热法和吸收光谱法提取测定类胡萝卜素含量。结果表明三类蛹虫草在沙氏平板上均有可形成子实体的菌株,说明形态与子实体形成无直接关系。类胡萝卜素含量在3000μg/g以下的菌株在沙氏培养基上无子实体形成,3000~3500μg/g有子实体形成平均为2个/cm2,3500~6500μg/g菌株子实体形成能力较强平均为7个/cm2,含量在6500μg/g以上菌株形成子实体平均在5个/cm2,全黑暗培养菌株未检测到类胡萝卜素,也无子实体形成。

蛹虫草菌丝体中单核苷酸类组分的高效液相色谱分析

目的测定蛹虫草菌丝体中5-′CMP(5′-胞苷酸)、5-′UMP(5′-尿苷酸)、5-′GMP(5′-鸟苷酸)、5-′IMP(5′-嘌呤核苷酸)、5-′XMP(5′-黄嘌呤核苷酸)、5-′AMP(5′-腺苷酸)等六种核苷酸的含量。方法用反相高效液相色谱法,以SH IMAD-ZU C18(150 mm×4.6 mm I.D,5μm)为色谱柱;以缓冲盐(KH2PO4-H3PO4)-甲醇(99.5∶0.5,V/V,pH3.75)体系为流动相,在流速0.8 mL/m in,柱温26°C,检测波长260 nm,进样量20μl的条件下对样品中5′-核苷酸的含量进行了分析测定。结果蛹虫草菌丝体中上述6种核苷酸含量分别为173.0,824.9,92.9,2114.0,79.6,231.4μg/g。结论该法快速简便,重现性好,能有效的测定样品中核苷酸类成分。

正交法优化蛹虫草子实体多糖的提取工艺

[目的]采用正交法优化蛹虫草(Cordyceps militaris L.Link)子实体多糖的提取工艺。[方法]采用优化煎煮法、水热回流提取法和碱法提取蛹虫草子实体多糖的工艺。[结果]煎煮法提取蛹虫草子实体多糖的最优条件为:加入40倍体积的水,提取3次,每次3.0h,各因素影响得率的主次顺序为:料液比>煎煮时间>煎煮次数。水热回流法提取蛹虫草子实体多糖的最优条件为:加入20倍体积的水,80℃下提取2次,每次1.0h,各因素影响得率的主次顺序为:提取次数>提取时间>提取温度>料液比。碱法提取蛹虫草子实体多糖的最优条件为:加入8倍体积的0.7mol/LNaOH溶液,提取3次,每次0.5h,各因素影响多糖得率的主次顺序为:浸提次数>NaOH浓度>料液比>浸提时间。[结论]该研究找出了煎煮法、水热回流提取法和碱法提取蛹虫草子实体多糖的工艺,可为下一步研究及工业生产提供参考资料。

蛹虫草提取物对H22小鼠抗氧化能力的影响

目的探讨蛹虫草提取物抗肿瘤作用的特点。方法采用化学比色法分别测定蛹虫草提取物对H22荷瘤小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),过氧化氢酶(CAT),丙二醛的影响(MDA),对肝脏中SOD,GSH-Px的影响。结果蛹虫草提取物可使小鼠血清中SOD,GSH-Px,CAT,肝脏中SOD,GSH-Px水平明显升高;使血清中MDA水平降低。结论蛹虫草提取物通过调整荷瘤动物的抗氧化能力而达到抗肿瘤作用的目的。

响应面法优化北虫草产多糖液体发酵培养基

采用响应面法(RSM)对北虫草(Codyceps militaris(L.)Link.)液体发酵培养基的3种主要成分蔗糖、蛋白胨和KH2PO4进行优化,采用多元二次回归方程拟合3种因素与多糖产量之间的函数关系。通过岭脊分析,获得培养基中3因素最佳浓度为:蔗糖3.23%蛋白胨1.05%,KH2PO4 0.08%,培养液多糖含量为1.977 970×10-2 g/ml。

高效液相色谱法测定蛹虫草子实体中腺苷的含量

目的建立测定蛹虫草子实体中腺苷含量的方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱(4.6mm×250 mm,5μm);流动相:水-甲醇(体积比85∶15),流速:1.2 mL/m in;检测波长:260 nm。结果腺苷平均加样回收率为100.23%,RSD=1.43%。结论该方法简便、准确,适用于该产品质量检验分析。

蛹虫草功效成分测定方法研究进展

蛹虫草功效成分主要有虫草素、虫草多糖、虫草酸、超氧化物歧化酶(SOD)、硒、植物甾醇等。近几年,对于蛹虫草的研究逐渐增多,其成分测定方法不断改进。本文综述了虫草素、虫草多糖、虫草酸、超氧化物歧化酶(SOD)、硒的经典测定方法,以及一些全新测定方法研究进展。