重庆市输入性卵形疟原虫curtisi和wallikeri亚种分子特征分析

目的为了解重庆市输入性卵形疟原虫curtisi和wallikeri亚种的分子特征,对卵形疟病例的卵形疟原虫Cox1、Cytb、Tra、Dhfr、K13基因位点多态性进行分析。方法回顾性分析2013-2023年确诊的卵形疟原虫感染患者血样,PCR扩增卵形疟原虫Cox1、Cytb、Tra、Dhfr、K13基因的部分片段,利用测序技术及生物信息学方法区分2个亚种,分析卵形疟curtisi和wallikeri亚种核苷酸多态性位点以及氨基酸突变位点等多态性。结果以ssrRNA区分26例卵形疟(curtisi亚种14例;wallikeri亚种12例)与Cox1、Cytb、Tra基因分类结果一致。Cox1基因在145、153等13个位点呈现二态性,仅在528、862位点氨基酸M176I、I288V变异,单例N337H变异。Cytb基因亚种间发现12个位点发生碱基置换,仅248号氨基酸M248I突变。Tra基因发现49个核苷酸二态性位点,致18个氨基酸突变,curtisi型样本中poc1型比poc2型多PINTINPINTIN和TITPIS氨基酸单元。Dhfr基因突变率较高,25%样本出现S58R突变。K13基因亚种内不呈单态,1例样本为杂合。结论确认了重庆市输入性卵形疟在Cox1、Cytb、Tra、Dhfr、K13基因片段中curtisi和wallikeri亚种间的二态性位点、突变位点,丰富了输入性卵形疟原虫两个亚种基因多态性信息。

15例输入性卵形疟经典curtisi亚种的特征分析

目的分析15例输入性卵形疟经典curtisi亚种患者的流行病学、临床表现以及实验室检查结果,为减少输入性卵形疟的误诊和漏诊提供参考。方法对安徽省立医院感染病院2014年1月至2018年6月收治的15例输入性卵形疟经典curtisi亚种患者的流行病学、临床表现、实验室检查进行回顾性分析。结果15例患者均为出国劳务男性,年龄27~60岁,以尼日利亚最多(5例),大部分患者有疟疾既往感染史,最多高达7次。所有患者均有不同程度的发热症状(36.5~41℃),热退后15例(100.00%)伴有出汗,此外伴寒战12例(80.00%);脾肿大8例(53.33%);头晕头痛、急性面容各7例(46.67%);腰酸6例(40.00%);关节酸痛5例(33.33%);乏力4例(26.67%);深色尿3例(20.00%);食欲减退、胸腔积液、肺炎、有出血倾者各2例(13.33%)。实验室检查中镜检、免疫法和PCR法检测的阳性率分别为73.33%、66.67%和100.00%,并确诊输入性卵形疟经典curtisi亚种;患者血样疟原虫乳酸脱氢酶(pLDH)基因经测序比对共检测到2种突变:15例样本表现出共有的A122V突变;1例样本出现K245I突变。结论输入性卵形疟临床表现复杂多样,应综合镜检、免疫学和分子生物学等多种检测方法,必要时做基因测序的检查,避免误诊漏诊。

8例输入性卵形疟不同亚型的鉴定

目的鉴定并分析境外输入性卵形疟的2种亚型及其感染的临床特点。方法对在北京友谊医院2015年1月—2017年3月确诊的8例输入性卵形疟患者进行虫种亚型的鉴定,并分析比较不同亚型感染引起的实验室指标的差异。结果通过对8例患者进行巢氏PCR鉴定及序列分析,结果显示卵形疟curtisi及卵形疟wallikeri亚型各4例;与curtisi亚型感染相比,wallikeri亚型感染后引起血小板下降程度更低,乳酸脱氢酶及TBIL的上升程度更高。结论输入性卵形疟的亚型鉴定须通过巢氏PCR鉴定完成,wallikeri亚型感染导致的器官损害更为严重。

吉林省延边地区一例输入性卵形疟复发病例亚型鉴定及基因特征分析

为确诊一例输入性卵形疟复发病例并鉴定其亚型,采集已开始服用青蒿素哌喹片的输入性卵形疟复发病例患者静脉血,通过薄血膜涂片吉姆萨染色镜检查看其形态特征,采用巢式PCR方法扩增其18S rRNA特异性基因,鉴定其疟原虫种类,再通过基因测序进行同源性比对和遗传进化分析。薄血膜涂片吉姆萨染色镜检结果显示,该患者血液红细胞中疟原虫已开始萎缩破裂,形态不典型,巢式PCR检测为卵形疟原虫强阳性。基因序列分析显示其序列与NCBI GenBank卵形疟Curtisi亚型序列同源性达99%。

2013-2021年长沙市输入性卵形疟原虫亚种特征分析

目的 分析长沙市2013-2021年18例输入性卵形疟原虫感染患者的资料,为卵形疟原虫的防治提供参考。方法 对长沙市疾病预防控制中心收集的2013-2021年输入性感染卵形疟原虫患者的血液样本、流行病学调查、临床表现进行回顾性分析。结果 2013-2021年(除2014年外)长沙市每年都有输入性卵形疟原虫病例,2021年检出率最高,达30.0%;在所有检出的18例卵形疟原虫病例中,其中curtisi亚种5例、wallikeri亚种13例;wallikeri亚种原虫感染患者全部出现发冷症状,而curtisi亚种原虫感染患者发冷症状表现不相同;5例curtisi亚种原虫感染患者从西非国家输入1例(20.0%),其余4例(80.0%)从中非国家输入。13例wallikeri亚种原虫感染患者由西非、中非和东非国家分别输入3例(23.1%)、8例(61.5%)和2例(15.4%);18例患者中有两例为复发病例,均为wallikeri亚种原虫感染患者。结论 2013-2021年各年度长沙市输入性卵形疟原虫检出率呈现增高趋势。wallikeri亚种引起的临床症状可能更为严重,患者应当遵循医嘱规则用药,同时预防复发。

福建省2009—2019年输入性卵形疟及亚型的回顾性分析

目的分析福建省2009—2019年输入性卵形疟及亚型curtisi和wallikeri的流行分布,加强防治措施降低危害。方法收集聚合酶链式反应(PCR)确诊的80例输入性卵形疟及个案信息资料,回顾性分析输入性卵形疟及亚型的流行分布。结果福建省2009—2019年卵形疟检出率呈增高趋势(趋势χ^(2)=14.07,P<0.01),年均检出率8.2%(80/978),2015年检出率最高,达18.6%;80例卵形疟中,其中curtisi亚型28例(35.0%)、wallikeri亚型37例(46.2%)、二者混合感染15例(18.8%);感染来源地区分布:来自西非者32例(40.0%),其中curtisi16例、wallikeri 11例、混合感染5例;来自中非者33例(41.3%),其中curtisi 9例、wallikeri 18例、混合感染6例;来自东非者15例(18.7%),其中curtisi 3例、wallikeri8例、混合感染4例;复发率为5.0%(4/80),从国内首次发作到复发,4个病例分别间隔22 d、35 d、180 d和28 d。结论福建省2009—2019年输入性卵形疟呈增高趋势,两个亚型的地理分布散在、广泛,无明显区别。

河南省输入性卵形疟原虫2个亚种富色氨酸抗原基因的多态性分析

目的分析河南省2015年输入性卵形疟原虫富色氨酸抗原(Plasmodium ovale tryptophan-rich antigen,Po TRA)基因序列。方法采集河南省2015年22例输入性卵形疟患者的血样,收集患者相关信息。提取血样DNA,用巢式PCR方法扩增Po TRA基因,连接至p MD18-T载体,提取质粒进行测序,在Gen Bank中进行同源性比对,判断卵形疟原虫的亚种,并对其基因长度及种类进行分析。对Po TRA基因的氨基酸序列进行比对,分析氨基酸的差异。用邻接法构建系统进化树,分析样本间的亲缘关系。结果 22例卵形疟中,8例为卵形疟原虫wallikeri亚种(P.ovale wallikeri),占36.4%,Po TRA基因长度有245和299 bp 2种类型,以245 bp为主;14例为卵形疟原虫curtisi亚种(P.ovale curtisi),占63.6%,Po TRA基因长度有299、317和335 bp等3种类型,以299 bp为主。氨基酸序列比对显示,wallikeri亚种的2种基因类型相差2个氨基酸单元(MANPINMANPIN和AITPIN),curtisi亚种的3种基因类型间相差2个氨基酸单元(TITPIS和TINPIN)。系统进化树显示,22例样本分为curtisi和wallikeri 2个亚群,其中curtisi亚群又分为2个亚支,299 bp的样本在同一亚支内,317和335 bp的样本在另一亚支内,亲缘关系更近。结论 2015年河南省输入性卵形疟有curtisi和wallikeri 2个亚种,其Po TRA基因存在多态性,curtisi亚种有3种基因类型,wallikeri亚种有2种基因类型。