ROC曲线对ELISA法检测HBsAg阳性判断值的确定及应用评价

目的 应用受试者工作特征（ROC）曲线对ELISA法定性检测乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的cut-off值进行确定,并将确定结果应用于低水平HBsAg阳性标本进行综合评价.方法 采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测1 021例乙型肝炎HBsAg血清学标志物,对从中筛选出的195例低水平HBsAg阳性标本进行化学发光微粒子免疫分析法定量,并对两种方法的结果进行评价.结果 195例HBsAg低水平阳性标本,经化学发光微粒子免疫分析法定量阳性190例（97.4%）,阴性1例（0.5%）,不确定4例（2.1%）.ROC曲线分析结果显示,当ELISA检测HBsAg的A值在0.11时,灵敏度和特异度的比例较为合适,特异度为97.1%,敏感度为98.6%,用0.11作cut-off值对195例低水平HBsAg阳性标本重新判读结果,与应用试剂盒本身根据公式计算的cut-off值判读结果进行比较结果差异无统计学意义.结论 ELISA实验目前广泛使用的根据公式计算cut-off值判读结果的方法是可行的,能够满足临床的基本需求.

儿童地中海贫血复合缺铁性贫血表型及临床意义

目的了解地中海贫血(地贫)患儿合并缺铁性贫血(IDA)时血液学各指标的变化,为临床治疗和筛查提供理论依据。方法通过外周血细胞计数和毛细管电泳筛查确定可疑阳性患儿,采用反向点杂交(RDB)和跨越缺口PCR(Gap-PCR)方法确定初筛阳性患儿的基因突变类型。同时应用化学发光方法检查患儿的血清铁蛋白情况。利用统计学方法比较单纯地贫患儿与地贫复合IDA患儿以及单纯缺铁患儿在血液学各参数上的差异。结果静止型地贫或轻型地贫复合IDA后会加重地贫患儿的症状,中重度地贫患儿在其复合缺铁后血液学指标改变并不明显。结论应该关注地贫患儿的缺铁情况,达到有效预防,合理治疗目的。

四种结核抗原的诊断效能分析与建立结核抗原诊断效能的评价体系

目的通过对4种结核分枝杆菌抗原的诊断效能分析,初步建立其诊断效能评价体系,为结核病免疫学诊断筛选特异、有效抗原提供根据。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和受试者工作特征曲线法(Receiver Operating Characteristic,ROC)建立结核抗原诊断效能评价体系。然后,对4种重组结核抗原的诊断效能进行分析,得出各种抗原组合的检测阳性率,进而评价得出最佳的抗原组合方式。结果该结核抗原诊断效能的评价体系包括最佳ELISA反应体系、ROC曲线的建立、确定各种抗原最佳临界值(Cut-off value)、最佳抗原组合方式的确定。ELISA检测体系的中CFP10、38kDa、MPT64和Ag85B的最佳蛋白包被浓度分别为0.5μg/mL、2μg/mL、2μg/mL和1μg/mL,最佳血清稀释度分别为1∶250、1∶225、1∶225和1∶225;对这4种结核抗原及其不同组合的ELISA检测诊断效能进行了评价,以组合抗原的诊断效能较好,最佳组合为38kDa+CFP10+MPT64,阳性率为64.7%。结论成功建立了结核抗原诊断效能评价体系。结果显示ELISA检测中以多组分抗原组合为宜。

结核分支杆菌特异性抗原重组蛋白MPT63检测系统的建立

目的建立规范的结核分枝杆菌（MTB）特异性抗原重组蛋白MPT63酶联免疫吸附试验（EHSA）检测系统。方法采用方阵法确定蛋白包被浓度和酶标二抗浓度，以ROC曲线法确定MPT63蛋白EHSA法检测的cut一0ff值。探讨规范的EHSA检测系统建立的方法。结果EUSA检测系统M蹦3蛋白包被浓度1：128000，酶浓度1：1000时为最佳；在cut—ofr值为0．35—0．40时检测MPT63蛋白抗体的灵敏度和特异性最为理想，分别是75．0％和78．6％。结论用方阵法确定蛋白包被浓度和酶标二抗浓度，并以ROC曲线法确立cut—ofr值是建立规范化的EMSA检测系统的关键环节。