小鼠孕早期Cyclin-E表达规律及意义

目的:探讨细胞周期素E(Cyclin-E)在早孕小鼠子宫内膜的的表达及其对小鼠胚胎着床数的影响。方法:应用RT-PCR及免疫组织化学的方法检测早孕小鼠子宫内膜细胞Cyclin-E基因和蛋白的表达规律;观察子宫角注射抗Cyclin-E抗体后对小鼠胚胎着床数的影响。结果:妊娠第1～7d小鼠子宫内膜组织均有Cyclin-E表达,自妊娠2d起表达增强,5d表达量达高峰。小鼠妊娠期Cyclin-E在子宫内膜腔上皮、腺上皮及内膜基质中均有表达。单侧子宫抗Cyclin-E抗体注射后双侧胚胎着床数差值较对照组(注射等体积生理盐水)明显增大。结论:在小鼠胚胎着床过程中,Cyclin-E可能参与调节子宫内膜的增殖分化,在子宫内膜蜕膜化及胚胎着床过程发挥作用。

肌苷对脑缺血再灌注后脑组织细胞周期蛋白D1基因表达的影响

目的:观察大鼠局灶性脑缺血再灌注后细胞周期蛋白D1(CyclinD1)mRNA的表达与神经细胞凋亡的关系以及肌苷的干预作用,从细胞增殖角度探讨肌苷的神经保护作用机制。方法:应用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)再灌注模型,腹腔注射肌苷注射液,应用原位末端标记(TUNEL)和原位杂交技术分别检测大鼠脑缺血再灌流不同时间点皮质区和纹状体区神经细胞CyclinD1mRNA的表达与凋亡的变化。结果:脑缺血再灌注2h后皮质区与纹状体区即出现少量凋亡神经细胞,皮质区1d达高峰(72.8±2.66)个/视野,纹状体区2d达高峰(96.75±4.37)个/视野,之后逐渐减少,至再灌注14d(5.50±0.65)个/视野接近假手术组水平(3.75±0.85)个/视野;肌苷治疗组凋亡神经细胞较对照组显著减少;脑缺血再灌流后皮质区与纹状体区的缺血周围区神经细胞CyclinD1mRNA的表达于2h逐渐增强,皮质区和纹状体区分别于12h和1d达高峰,以后逐渐下降;肌苷治疗组CyclinD1mRNA表达较对照组显著减弱。结论:脑缺血再灌流CyclinD1mRNA的表达时序先于凋亡细胞的出现,其异常表达可能诱导了神经元的凋亡。肌苷可在脑缺血再灌注后抑制CyclinD1mRNA的表达,从而减少神经细胞凋亡,起到神经保护作用。

Cyclin D_1和CDK4在子宫颈上皮内瘤样变和宫颈鳞癌中的表达及意义

目的:探讨C yclin D1和C D K4在正常宫颈上皮、宫颈上皮肉瘤样变(C IN)和宫颈鳞癌中表达状况。方法:收集子宫颈活检及手术标本118例,其中正常鳞状上皮14例,C IN25例,宫颈鳞癌79例。采用SP免疫组织化学方法,检测Cyclin D1和C D K4蛋白的表达情况。结果:C yclin D1和C D K4在正常宫颈上皮、C IN和宫颈鳞癌中的表达水平差异有显著性(P<0.05),在不同分化程度的宫颈鳞癌间无显著性差异(P>0.05)。结论:在宫颈鳞癌发生过程中伴有C yclin D1和C D K4表达水平的增高,检测其含量改变有助于宫颈鳞癌诊断。

SKP2和P27^(kip1)在泌尿系肿瘤中的研究进展

SKP2是新发现的一种癌基因,属于Fox蛋白家族,作为泛素连接酶复合物(SCF)的底物识别序列,通过对P27kip1进行泛素化降解而对细胞周期进行调控,促进细胞增值、分化、并可能变异及癌变。P27kip1抑制细胞周期正性调节蛋白如cyclin、CDK及cyclin-CDK复合物等,抑制细胞增值。二者在细胞周期的调控机制中发挥重要的作用,在很多实体恶性肿瘤中表达异常,且和肿瘤的分级、分期、预后、有无转移等诸多临床病理参数有着密切的关联。

PTEN和p27及cyclin D1蛋白在大肠癌组织中的表达及相关性研究

目的:研究大肠癌组织中PTEN、p27和cyclin D1蛋白的表达及三者间的关系。方法:应用免疫组织化学方法检测58例大肠癌组织、58例癌旁组织和14例正常大肠黏膜中PTEN、p27和cyclin D1蛋白的表达情况。结果:大肠癌组织中PTEN和p27蛋白的阳性表达率分别为65.52%(38/58)和53.45%(31/58),较癌旁组织和正常组织明显降低(P<0.05);cyclin D1蛋白的阳性表达率为60.34%(35/58),较癌旁组织及正常组织显著升高(P<0.05)。三者在大肠癌组织中的表达存在相关性,且均与肿瘤的分化程度、有无淋巴结转移和Dukes分期有关(P<0.05)。结论:PTEN、p27和cyclinD1基因的异常改变参与大肠黏膜细胞的恶性转化过程,且三者之间存在相关性。联合检测三者表达水平可作为评价大肠癌病理生物学行为的客观指标之一。

三氧化二砷诱导A549细胞凋亡及对survivin、cyclin D1表达的影响

目的:了解三氧化二砷对肺腺癌A549细胞株细胞增殖、细胞凋亡以及survivin、cylin D1基因表达的影响。方法:分别以不同浓度的三氧化二砷作用于A549细胞,作用不同时间对细胞增殖活性、细胞凋亡及细胞survivin、cylin D1基因表达的变化进行检测。结果:稍高浓度(>2μmol/L)的三氧化二砷可抑制A549细胞增殖,并有剂量和时间依赖性。逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测survivin、cylin D1基因转录水平和细胞爬片免疫组化检测survivin、cyclin D1基因蛋白表达的相对强度,发现三氧化二砷作用组survivin和cyclin D1基因的表达与对照组相比明显减低(P<0.01)。结论:三氧化二砷可有效抑制A549细胞增殖,诱导A549细胞凋亡,与作用剂量和作用时间呈正相关,这一过程可能与三氧化二砷抑制survivin、cyclin D1表达有关。

曲古菌素A对K562细胞周期蛋白的影响

目的探讨曲古菌素A(TrichostatinA,TSA)对K562细胞增殖和细胞周期的影响。方法50～400nmol/L的TSA分别处理K562细胞12～60h后,MTT法检测K562细胞的生长活性;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡;免疫组化检测24h不同浓度(100～300nmol/L)细胞周期素(cyclinE)、Rb(retinoblastoma,Rb)基因在K562细胞中的表达。结果TSA可呈时间及剂量依赖性抑制K562细胞的增殖,抑制率为37.83%～78.57%(P<0.01)。流式细胞仪检测K562细胞,凋亡率为14.38%～61.18%。免疫组化结果显示cyclinE的吸光度值分别为0.2154±0.2015、0.1501±0.1978、0.1183±0.0521与对照组0.3274±0.1093比较,差异有显著性(P<0.05);Rb蛋白的吸光度值分别为0.3017±0.1356、0.2134±0.1283、0.1527±0.0216与对照组0.4186±0.1870比较,差异也有显著性(P<0.05);随着TSA浓度增高而表达下调,呈剂量依赖性下调。结论TSA能干扰细胞周期进程,其作用机制诱导K562细胞的凋亡,下调cyclinE的表达,从而抑制其相应基因Rb的表达,调控G1/S期检测点有关。

Wnt信号通路在非小细胞肺癌中的研究进展

Wnt信号通路是一条非常保守的信号转导途径,在许多生理过程中发挥了重要作用。Wnt信号通路与细胞的生长、分化、迁移及凋亡等诸多过程相关。由于该通路的异常活化与非小细胞肺癌(NSCLC)的发生、发展密切相关,因此揭示该通路的分子生物学机制与基因表达调节规律有重要意义。该文就Wnt信号通路与NSCLC研究近况予以综述。

cyclin E、p16ink4、ki67在宫颈脱落细胞中的表达及其与HPV_(16/18)感染的相关性

目的 研究cyclinE、p16ink4、ki6 7在宫颈脱落细胞中的表达水平及其与HPV1 6 1 8感染的相关性,探讨其对宫颈癌高危人群筛查的意义。方法 采用免疫组织化学方法对78例宫颈脱落细胞标本进行cyclinE、p16ink4、ki6 7检测,同时应用多重引物PCR技术检测HPV1 6 1 8。结果 cyclinE、p16ink4、ki6 7在宫颈癌细胞中的表达水平均较鳞状上皮非典型增生(ASCUS)差异有统计学意义(P <0 0 0 5 ) ;各级宫颈癌细胞中HPV1 6 的阳性率均较ASCUS差异有统计学意义(χ2 =2 5 2 7,P <0 0 0 5 ) ,且随着宫颈上皮细胞损伤程度加重阳性率升高,差异也有统计学意义(P <0 0 1)。p16ink4和ki6 7在宫颈癌细胞中的表达水平与HPV1 6 高度相关(rs=1 0 ,P <0 0 5 ) ;而cyclinE的表达与HPV1 6 相关性较小(rs=0 4 ,P <0 0 5 )。HPV1 8阳性例数较少,在各项分析中差异均无统计学意义(χ2 =3 6 8,P >0 0 5 )。结论 宫颈癌细胞中cyclinE、p16ink4及ki6 7的高度表达与HPV1 6 感染有关;它们均可能作为有价值的诊断指标应用于宫颈癌高危人群筛查,且cyclinE对宫颈癌的早期诊断意义更大。

斑蝥酸镁抑制人胃癌细胞BGC-823增殖及其机制

目的探讨斑蝥酸镁在体外对人胃癌细胞BGC-823增殖的抑制作用及其机制。 方法分别加入0.52、1.04、2.08、4.17、8.34 μmol/L的斑蝥酸镁作用24 h后，细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测BGC-823细胞增殖的影响；光学显微镜和透射电镜观察细胞形态学和细胞超微结构的变化；碘化丙锭（PI）单染色法检测细胞周期变化，膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素（Annexin V-FITC）/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡水平；Western blot检测细胞周期蛋白依赖性激酶1（CDK1）、细胞周期蛋白（Cyclin） B1蛋白的表达。 结果不同浓度斑蝥酸镁作用24 h后，BGC-823细胞均出现抑制现象，且呈剂量-效应关系（P＝0.000），其半数抑制浓度（IC50）为4.868 μmol/L；IC50的斑蝥酸镁作用24 h后，BGC-823的细胞核异形、裂解，内质网及线粒体肿胀；加入4.868 μmol/L斑蝥酸镁作用24 h后，BGC-823细胞的凋亡率明显增加（P＝0.010），且表现出明显的G2/M期阻滞（P＝0.009）；加入2.434、4.868、7.302 μmol/L斑蝥酸镁作用24 h后，BGC-823细胞的CDK1、Cyclin B1表达明显下降（P＝0.000）。 结论斑蝥酸镁能够抑制胃癌细胞BGC-823增殖，并将细胞阻滞在G2/M期。