环状RNA hsa-circ-0001360在同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用

背景:同型半胱氨酸水平上升会诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡,但机制尚不清楚。目的:探讨hsa-circ-0001360在同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡中的作用。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,将其分为对照组、同型半胱氨酸组、干扰对照组、干扰对照+同型半胱氨酸组、干扰hsa-circ-0001360组、干扰hsa-circ-0001360+同型半胱氨酸组、过表达对照组、过表达对照+同型半胱氨酸组、过表达hsa-circ-0001360组和过表达hsa-circ-0001360+同型半胱氨酸组,同型半胱氨酸的干预浓度均为100μmol/L。干预细胞72 h后,应用Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达;流式细胞仪检测细胞的凋亡率;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测hsa-circ-0001360的表达水平。结果与结论:①与对照组相比,同型半胱氨酸组人脐静脉内皮细胞中Caspase-3和Bax的表达明显升高(P<0.01),Bcl-2的表达明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显增高(P<0.01);②与对照组相比,同型半胱氨酸组人脐静脉内皮细胞中hsa-circ-0001360的表达明显升高(P<0.01);③hsa-circ-0001360在人脐静脉内皮细胞的细胞质中表达显著高于细胞核(P<0.01);④与干扰对照组或干扰对照+同型半胱氨酸组相比,干扰hsa-circ-0001360组和干扰hsa-circ-0001360+同型半胱氨酸组人脐静脉内皮细胞中Caspase-3、Bax的表达明显降低(P<0.01),Bcl-2的表达明显升高(P<0.01),细胞凋亡率明显降低(P<0.01);⑤与过表达对照组或过表达对照+同型半胱氨酸组相比,过表达hsa-circ-0001360组和过表达hsa-circ-0001360+同型半胱氨酸组人脐静脉内皮细胞中Caspase-3、Bax的表达明显升高(P<0.01),Bcl-2的表达明显降低(P<0.01),细胞凋亡率明显升高(P<0.01);⑥以上结果表明,hsa-circ-0001360可以促进同型半胱氨酸诱导人脐静脉内皮细胞发生凋亡。

环状RNA同源性蛋白激酶3靶向微RNA-338促进胶质瘤细胞侵袭、迁移的实验研究

目的探讨人血清环状RNA同源性蛋白激酶3(CircHIPK3)靶向微RNA-338(miR-338)对胶质瘤细胞U251细胞侵袭、迁移的影响。方法2021年2-12月,在武汉大学人民医院科研中心将U251细胞分为空白(NG)组、CircHIPK3阴性对照(shcontrol)组、HIPK3敲减(sh-CircHIPK3)组,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测U251细胞中CircHIPK3、miR-338表达水平;Transwell检测细胞迁移与侵袭;划痕法检测细胞迁移;流式细胞术检测细胞周期;通过Circular RNA Interactome、RegRNA2.0、CircBank Database网站预测CircHIPK3(ID:hsa_circ_0000284)的靶向miRNA并用双萤光素酶实验验证,蛋白质印迹法检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达。结果与NG组、sh-control组比较,sh-CircHIPK3组中CircHIPK3(1.00±0.00、1.06±0.26比0.56±0.06)表达水平显著降低(P<0.05),miR-338(1.00±0.00、1.12±0.19比1.89±0.28)表达、G1期细胞比例[(58.72±0.36)%、(58.45±0.27)%比(64.72±0.47)%]升高(P<0.05),U251细胞侵袭数目[(164.89±12.55)个、(165.77±12.16)个比(80.13±11.37)个]、划痕愈合率[(25.66±2.37)%、(26.38±2.53)%比(10.36±1.53)%]、迁移细胞数目[(196.72±18.75)个、(194.65±17.86)个比(95.58±8.66)个]、S期细胞比例[(26.45±0.39)%、(26.57±0.41)%比(20.72±0.18)%]明显降低(P<0.05);miR-338是CircHIPK3的靶基因。与NG组、sh-control组比较,sh-CircHIPK3组MMP-2(1.31±0.23、1.33±0.20比0.61±0.05)、MMP-9(1.16±0.22、1.15±0.21比0.85±0.19)蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。结论沉默CircHIPK3通过靶向上调miR-338表达能抑制胶质瘤细胞U251细胞迁移和侵袭。

环状RNA Hsa_circ_0006948对口腔鳞状细胞癌细胞恶性生物学行为的影响

目的探讨环状RNA Hsa_circ_0006948(circ_0006948)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞恶性生物学行为的影响。方法qRT-PCR检测SCC-15、CAL27和HIOEC细胞circ_0006948的表达;将SCC-15细胞分别转染pc-NC、pc-circ_0006948、si-NC、si-circ_0006948,记为pc-NC组、pc-circ_0006948组、si-NC组以及si-circ_0006948组,取正常培养的细胞作为NC组。CCK-8法检测细胞存活率;平板克隆法检测细胞克隆情况;Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测细胞E-Cadherin、N-Cadherin、MMP-2、MMP-9蛋白表达。结果与HIOEC细胞相比,CAL27细胞和SCC-15细胞中circ_0006948表达明显升高(P<0.05),由于SCC-15细胞中circ_0006948的表达最高,后续使用SCC-15细胞进行后续转染实验。与NC组和pc-NC组相比,pc-circ_0006948组细胞存活率、克隆个数、迁移和侵袭个数以及细胞N-Cadherin、MMP-2、MMP-9蛋白表达明显升高(P<0.05),细胞凋亡率以及E-Cadherin蛋白表达明显降低(P<0.05);与NC组和si-NC组相比,si-circ_0006948组细胞存活率、克隆个数、迁移和侵袭个数以及细胞N-Cadherin、MMP-2、MMP-9蛋白表达明显降低(P<0.05),细胞凋亡率以及E-Cadherin蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论circ_0006948在OSCC细胞中呈高表达,过表达circ_0006948会促进SCC-15细胞增殖,克隆,迁移,侵袭,并抑制细胞凋亡,其作用机制可能与调控上皮间充质转化(EMT)有关。

下调环状RNA Hsa-circ-PVT1对子宫腺肌病异位子宫内膜间质细胞增殖、侵袭及血管生成作用机制的影响

目的:探讨环状RNA浆细胞瘤变体易位1(Hsa-circ-PVT1)对子宫腺肌病异位子宫内膜间质细胞增殖、侵袭和血管生成的影响,以及其对微小RNA145(miR-145)和丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)基因的调控机制。方法:qRT-PCR检测子宫腺肌病异位子宫内膜中Hsa-circ-PVT1、miR-145表达。双荧光素酶实验检测Hsa-circ-PVT1和miR-145的关系。生物信息数据库TargetScanHuman、miRDB、miRactDB预测miR-145的下游靶点。细胞分组:Hsa-circ-PVT1-inhibitor-NC+miR-145-antagomir-NC+si-MAPK1-NC(NC)、Hsa-circ-PVT1-inhibitor(inhibitor)、Hsa-circ-PVT1-inhibitor+miR-145-antagomir(inhibitor+antagomir)、Hsa-circ-PVT1-inhibitor+miR-145-miR-145-antagomir+si-MAPK1(inhibitor+antagomir+si)、正常细胞(normal组)。EDU检测各组细胞增殖,Transwell小室检测各组细胞侵袭能力;小管形成实验检测各组细胞血管生成能力;Western blot法检测各组细胞中MAPK1、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和血管内皮生长因子(VEGF)表达水平。结果:子宫腺肌病异位子宫内膜中Hsa-circ-PVT1表达明显升高,miR-145表达明显下降,双荧光素酶证实Hsa-circ-PVT1靶向miR-145的表达,miR-145下游靶标为MAPK1。与normal组Y14细胞相比,inhibitor组细胞增殖、侵袭及血管新生的性能明显降低,inhibitor+antagomir组能部分逆转这一抑制作用,而inhibitor+antagomir+si组能部分恢复这一作用,差异均有统计意义(均P<0.05)。结论:子宫腺肌病异位子宫内膜中Hsa-circ-PVT1表达明显升高,Hsa-circ-PVT1能靶向miR-145调控MAPK1表达,抑制Hsa-circ-PVT1表达能明显抑制间质细胞的增殖、侵袭及血管生成。

外泌体源性环状RNA Tousled样激酶1与老年急性脑梗死病情严重程度及预后的关系

目的探讨血清外泌体源性环状RNA Tousled样激酶1(circTLK1)与老年急性脑梗死病情严重程度及预后的关系。方法选取2021年10月至2022年11月恩施土家族苗族自治州中心医院脑病科收治的老年急性脑梗死患者128例(急性脑梗死组),采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分评估病情严重程度。急性脑梗死组90 d时又根据改良的Rankin量表(mRS)评分分为预后不良组46例和预后良好组82例。另选取健康体检者80例(对照组)。RT-PCR检测血清外泌体源性circTLK1表达。出院后对老年急性脑梗死患者进行随访,90 d时用mRS评分对预后进行评价。结果急性脑梗死组血清外泌体源性circTLK1表达明显高于对照组(1.86±0.46 vs 0.87±0.12,P<0.05)。轻度、中度和重度急性脑梗死患者血清外泌体源性circTLK1表达逐渐升高(1.34±0.28 vs 1.78±0.19 vs 2.35±0.33,P<0.05)。预后不良组入院时NIHSS评分和circTLK1表达明显高于预后良好组[(13.21±3.24)分vs(9.55±2.16)分,P=0.001;2.15±0.77 vs 1.47±0.58,P=0.001]。多因素logistic回归分析显示,入院时NIHSS评分和circTLK1表达是老年急性脑梗死患者不良预后的独立影响因素(OR=4.123,95%CI:1.109~12.520,P=0.001;OR=2.734,95%CI:1.067~6.135,P=0.001)。ROC曲线分析显示,血清外泌体源性circTLK1表达预测急性脑梗死患者预后的曲线下面积为0.831,敏感性和特异性分别为96.19%、85.20%。结论老年急性脑梗死患者血清外泌体源性circTLK1表达升高,其表达越高,病情可能越重,且预后不良。

糖尿病肾病中环状RNA circHIPK3的表达和生物学作用分析

目的:探讨和分析糖尿病肾病中环状RNA circHIPK3的表达和生物学作用。方法:回顾性收集2017年01月—2020年06月来我院就诊的糖尿病肾病患者90例,同期收集体检健康的志愿者30例,分别提取两组研究对象外周血RNA,检测两组circHIPK3的表达差异,并分析其表达水平与蛋白尿、空腹血糖、糖化血红蛋白和三酰甘油等病理指标的相关性。以肾系膜细胞SV40-MES13为研究对象,沉默circHIPK3,观察其增殖、侵袭和纤维化水平的变化,并对其分子机制进行探索。结果:糖尿病肾病患者外周血circHIPK3的表达水平明显高于正常对照组(P<0.001),大量蛋白尿患者外周血circHIPK3的表达水平亦高于微量蛋白尿组(P<0.001),circHIPK3的表达水平和蛋白尿、空腹血糖、糖化血红蛋白、三酰甘油等糖尿病肾病的临床病理参数均存在明显的正相关性(P<0.05)。circHIPK3沉默后,细胞活力、侵袭力和纤维化相关指标胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅳ和纤连蛋白的表达水平均明显降低,进一步的机制研究发现circHIPK3具有miR-508-3p吸附作用。结论:糖尿病肾病中存在显著的circHIPK3高表达,circHIPK3通过miR-508-3p吸附作用可促进系膜细胞增殖、侵袭和肾脏纤维化。

聚乳酸-羟基乙酸共聚物负载siRNA-circCALN1治疗鼻咽癌的初步研究

目的:为了提高疗效,我们在前期研究的基础上开发了一种小干扰核糖核酸(Small interfering RNA,siRNA)和聚乳酸-羟基乙酸共聚物[poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA]结合点的纳米复合药物,为开发新的抗鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)药物提供新方法和思路。方法:设计并合成三个针对circRNA CALN1后剪接区的siRNA序列(siRNA1 circ CALN1、siRNA2 circ CALN1和siRNA3 circ CALN1)和非功能性siRNA(Nonfunctional siRNA,siRNA NC),通过RT-PCR进行抑制circ CALN1探究。对合成好的PLGA-siRNA circ CALN1进行SEM、TEM、DLS、Zeta电位等表征。通过绘制标准曲线,计算siRNA负载率。通过CCK-8对两种鼻咽癌抗癌作用进行验证。结果:通过RT-PCR验证了siRNA3 circ CALN1对circ CALN1抑制作用最强。通过SEM和TEM进行形貌表征,PLGA-siRNA-circ CALN1呈均匀球形。DLS显示水合粒径205 nm左右,Zeta电位-14 mV,说明已经成功负载。通过绘制标准曲线,计算siRNA负载率为(92.3±5.4)%。在培养24、48、72、96 h后,与PLGA-siRNA NC组和对照组比较,PLGA-siRNA3 circ CALN1可显著抑制鼻咽癌细胞(CNE1和HNE1)的增殖。结论:本研究开发的治疗鼻咽癌的抗癌药物获得初步成功,开发了鼻咽癌的新靶点,丰富了抗癌药物的工具箱。

血清circVMA21水平对脓毒症患者预后评估的价值

目的 探讨血清环状RNA液泡ATP酶组装因子(circVMA21)水平对脓毒症患者预后评估的价值。方法 将2020年7月至2022年12月该院收治的200例脓毒症患者纳入研究作为脓毒症组。对患者进行随访,根据脓毒症患者治疗后28 d是否存活将患者分为预后良好组(128例)和预后不良组(72例)。另外,选取200例同期本院收治的普通感染患者作为对照组。收集所有纳入研究者的临床资料,用实时荧光定量PCR(qPCR)检测血清circVMA21水平,Spearman法分析circVMA21与序贯性器官衰竭评估(SOFA)评分、急性生理学及慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析circVMA21对脓毒症患者预后不良的预测价值,Kaplan-Meier法分析circVMA21与脓毒症患者生存预后的关系,Logistic回归分析脓毒症患者预后的影响因素。结果 与对照组比较,脓毒症组血清circVMA21水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。脓毒症患者血清circVMA21水平与SOFA评分、APACHEⅡ评分均呈负相关(r=-0.553、-0.543,P<0.05)。与预后良好组比较,预后不良组circVMA21水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。预后不良组肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞计数(WBC)、中性粒细胞计数(NEU)、SOFA评分、APACHEⅡ评分高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析显示,circVMA21的曲线下面积(AUC)为0.848(95%CI:0.793~0.902),截断值为0.55,灵敏度为83.30%,特异度为78.90%,约登指数为0.622。Kaplan-Meier法分析显示,circVMA21>0.55与circVMA21≤0.55患者生存预后比较,差异有统计学意义(Log-rank χ^(2)=5.138,P=0.023)。多因素Logistic回归结果显示,APACHEⅡ评分是脓毒症患者预后不良的危险因素,circVMA21为预后良好的保护因素(P<0.05)。结论 脓毒症患者血清circVMA21水平降低,血清circVMA21是脓毒症患者预后良好的保护因素,可作为评估脓毒症患者预后的生物标志物。

可乐定对严重烫伤大鼠心肌Gsα mRNA表达的影响

目的 研究可乐定对严重烫伤大鼠心肌GsαmRNA表达的影响。方法 将大鼠置于 95℃水浴中烫 10s,造成背部皮肤 3 0 %体表面积III度烫伤。分别用dotblotting杂交 ,原位杂交、放射免疫分析及间接方法测定心肌GsαmRNA表达水平、cAMP生成量与adenylcyclase (AC)活性。结果 烫伤后 3h心肌GsαmRNA表达水平明显减少 ,0 3 ,1 0 ,3 0mg·kg- 1 可乐定 (ip)可增加烫伤后心肌GsαmRNA表达 ,表达相对量与可乐定剂量呈正相关。I1 咪唑啉受体拮抗剂efaroxan可部分逆转可乐定增加烫伤后心肌GsαmRNA表达的作用 ,减少量与efaroxan剂量呈显著正相关。AC和cAMP的变化与GsαmRNA类似。结论 可乐定可增加烫伤后早期大鼠心肌GsαmRNA表达。

铜绿假单胞菌单PilZ结构域蛋白PA0012和PA4324突变体生物学表型的初步筛选

目的 本研究以铜绿假单胞菌单PilZ结构域的环二鸟苷酸受体蛋白PA0012和PA4324为研究对象,研究这2个蛋白对生物学表型的影响。方法 本研究首先利用同源重组的方法对编码PA0012和PA4324蛋白的基因进行了敲除,得到敲除突变体菌株ΔPA0012和ΔPA4324。然后,将实验分为3组,以野生型菌株PAO1为对照,用这2个突变体进行了表型筛选,包括群集运动能力、感染生菜的能力、对线虫的致病力和蛋白酶活性等,采用单因素方差分析对各组间的差异进行统计分析。随后对这2个突变体和野生型菌株进行了RNA测序,分析2个单PilZ结构域蛋白突变导致的基因差异表达,在转录水平上综合分析2个蛋白对生物学表型的影响。结果 本研究发现这2个单PilZ结构域蛋白的突变均能导致铜绿假单胞菌的群集运动增强,感染生菜的能力减弱,对线虫的毒性和蛋白酶活性的影响则无显著变化。RNA测序结果表明,这2个蛋白突变均可导致铜绿假单胞菌中大量基因的差异表达,且有一些共同的差异基因。结论 铜绿假单胞菌的PA0012和PA4324突变均能增强其群集运动和减轻其对生菜的感染,为后续机制研究奠定了基础。

环状RNA的海绵活性作为肿瘤新型生物标志物可行性的研究进展

目前多项研究表明不同的环状RNA(circRNA)作为特殊的非编码RNA可以通过与特定的miRNA结合发挥海绵活性,并因此抑制miRNA功能,从而影响相关通路的进行,对特定肿瘤的发生发展产生影响。本文通过收集已有实验研究,对内源性circRNA海绵的生物发生、性质和功能进行总结,并对circRNA海绵与人类肿瘤发生发展的影响作一综述。

三七总皂苷对烫伤大鼠心肌Gsα mRNA表达的影响

目的 研究三七总皂苷 (panax notoginseng saponins,PNS)对烫伤早期大鼠心肌 Gsα m RNA表达的影响。方法 通过 30 %体表面积皮肤 度烫伤大鼠模型 ,应用 dot blotting杂交、心肌组织原位杂交、放射免疫分析等技术观察三七总皂苷对严重体表烫伤大鼠心肌 Gsα m RNA表达水平、c AMP产生量、腺苷酸环化酶 (adenylylcyclase,AC)活性的影响。结果 大鼠心肌组织中 Gsα m RNA表达量、c AMP含量、AC活性在烫伤后 3h均明显降低。 10 0 ,2 0 0 m g/ kg PNS明显增加烫伤大鼠心肌组织 Gsα m RNA的表达 ,增加量与 PNS剂量呈显著正相关(r=0 .95 ,P<0 .0 5 )。 10 0 ,2 0 0 mg/ kg使烫伤大鼠心肌组织 c AMP含量分别增加 2 1% ,36 % ,AC活性分别增强40 % ,6 3% (P<0 .0 1)。结论 PNS可增加烫伤大鼠心肌 Gsα m RNA表达 ,增强 AC活性 ,增加 c

衰老髓核细胞中环状RNA浆细胞瘤转化迁移基因1的表达及调控机制

背景:研究发现环状RNA浆细胞瘤转化迁移基因1(cyclic RNA plasmacytoma variant translocation 1,circPVT1)与成纤维细胞的衰老有关,但circPVT1与髓核细胞衰老的关系及机制目前尚不清楚。目的:观察circPVT1在衰老髓核细胞中的表达,并探究其可能作用机制。方法:体外培养人髓核细胞,电离辐射(5 Gy,6 d)诱导髓核细胞衰老,qRT-PCR检测细胞circPVT1、let-7 mRNA表达;circPVT1 siRNA、anti-let-7共转染至正常髓核细胞,分为空白组、si-NC+anti-NC组、si-circPVT1+anti-NC组、si-NC+anti-let-7组、si-circPVT1+anti-let-7组,qRT-PCR检测细胞circPVT1、let-7 mRNA表达,CCK-8法检测细胞增殖抑制情况,平板细胞克隆形成实验检测克隆形成数量,SA-β-gal染色检测细胞衰老情况,免疫印迹法检测细胞衰老相关蛋白p21、p27以及let-7靶标HMGA2、KRAS表达,双荧光酶素活性实验验证let-7对HMGA2、KRAS靶向调控关系。结果与结论:①与正常髓核细胞相比,辐射组细胞中circPVT1 mRNA表达降低,let-7 mRNA表达升高,SA-β-gal染色阳性率升高(P<0.05);②与空白组、si-NC+anti-NC组相比,si-circPVT1+anti-NC组circPVT1 mRNA表达降低,let-7 mRNA表达升高,细胞增殖抑制率升高,克隆形成数量降低,SA-β-gal染色阳性率升高,p21、p27蛋白表达升高,HMGA2、KRAS蛋白表达降低(P<0.05);而si-NC+anti-let-7组正好相反(P<0.05);③si-circPVT1+anti-let-7组circPVT1 mRNA表达、克隆形成数量、HMGA2、KRAS蛋白表达高于si-circPVT1+anti-NC组,低于si-NC+anti-let-7组;let-7 mRNA表达、细胞增殖抑制率、SA-β-gal染色阳性率、p21、p27蛋白低于si-circPVT1+anti-NC组,高于si-NC+anti-let-7组(P<0.05);④双荧光酶素活性实验显示HMGA2、KRAS是let-7的靶标;⑤结果表明,抑制circPVT1表达后加速髓核细胞衰老,其机制可能是通过结合let-7进而抑制靶向HMGA2、KRAS蛋白实现的。

长链非编码RNA XR007793在病理性高张应变诱导平滑肌细胞增殖中的作用

目的探讨高血压条件下异常升高的周期性张应变刺激对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖活性的影响以及VSMCs中一种长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)XR007793在其中可能的作用。方法应用体外周期性张应变加载系统Flexcell-4000对VSMCs分别施加5%生理性张应变和15%病理性高张应变,加载频率为1.25 Hz,加载时间24 h。荧光实时定量PCR检测XR007793及其共表达基因:信号转导与转录激活因子2(STAT2)、细胞分裂相关蛋白8(CDCA8)、原癌基因LMO2和干扰素调节因子(IRF7)的表达变化,Western bloting方法检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达变化,RNA干扰技术抑制VSMCs的XR007793表达,静态条件下流式细胞术检测VSMCs周期变化,牵拉条件下Brdu检测VSMCs增值变化情况。结果与5%生理性张应变组相比,15%病理性高张应变显著下调XR007793表达水平,促进VSMCs增值活性并上调STAT2和CDCA8的表达水平。静态条件下干扰XR-007793,VSMC增殖水平显著上升。高周期性张应变条件下干扰XR-007793,VSMC增殖水平上升,CDCA8表达水平上升。结论病理性高张应变可能通过降低XR007793表达来影响CDCA8表达变化,进而调控VSMCs增殖功能变化过程。研究结果为阐明高血压条件下血管重建机制和药物治疗靶标的研究提供新的实验依据。

环状RNA特性及其在原发性肝癌中的研究进展

原发性肝癌是一种常见的肝脏恶性肿瘤,发病率和死亡率较高,且由于早期难以被诊断,以致于错失有效治疗机会。环状RNA (circRNA)是内源性长链非编码RNA家族中的一员,因其具有稳定性,高度保守性和时间、空间特异性等特征,故其广泛累积表达于真核细胞的细胞质中。近年来发现circRNA在原发性肝癌的细胞增殖、凋亡、侵袭转移及预后等多方面发挥着巨大作用。目前circRNA已是继LncRNA后作为多种肿瘤早期诊断标志物和新治疗靶点的研究热点。本文对circRNA特征及其在原发性肝癌中的相关研究进展进行概述,以便于进一步探究其在原发性肝癌的临床诊疗过程中的潜在应用。

妊娠期糖尿病患者血清circFOXP1和circMAP3K4基因表达变化及临床意义

目的探究妊娠期糖尿病(GDM)患者血清环状RNA叉头框蛋白P1(circFOXP1)和circMAP3K4基因表达变化及临床意义。方法选取2021年11月—2022年11月武汉科技大学附属汉阳医院妇产科收治的GDM患者128例为GDM组,同期选择在医院孕检的健康孕妇128例为对照组,采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测血清circFOXP1和circMAP3K4基因表达;Pearson法分析GDM患者血清circFOXP1和circMAP3K4表达的相关性。受试者工作特征曲线(ROC)分析血清circFOXP1和circMAP3K4对GDM的诊断价值。Logistic回归分析影响GDM发生的危险因素。结果与对照组比较,GDM组三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)水平均显著升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平显著降低(t/P=23.019/<0.001、7.081/<0.001、36.805/<0.001、22.069/<0.001、3.341/0.001)。与对照组比较,GDM组患者血清circFOXP1基因表达降低,circMAP3K4基因表达升高(t/P=11.630/<0.001、12.061/<0.001)。GDM患者血清circFOXP1与circMAP3K4基因表达呈负相关(r/P=-0.302/0.001)。血清circFOXP1、circMAP3K4二者联合诊断GDM发生的AUC显著高于单独诊断(Z/P=2.207/<0.001、2.029/0.023)。FPG高、circFOXP1低表达和circMAP3K4高表达为GDM发生的危险因素[OR(95%CI)=2.017(1.280~3.178)、2.955(1.454~6.008)、3.154(1.735~5.734)]。结论GDM患者血清中circFOXP1呈低表达,circMAP3K4呈高表达,二者可以作为GDM的辅助诊断标志物。

结直肠癌组织中circMYH9、PHLDA2基因表达与患者临床病理特征和预后的关系

目的探讨结直肠癌(CRC)组织中环状RNA(circ)MYH9、人普列克底物蛋白同源域家族A成员2(PHL-DA2)基因表达与患者临床病理特征和预后的关系。方法选取CRC患者98例,术中采集CRC组织及癌旁组织,荧光定量PCR法检测circMYH9、PHLDA2 mRNA表达,Pearson相关法分析CRC组织中circMYH9与PHLDA2 mRNA表达的相关性,分析circMYH9、PHLDA2 mRNA表达与CRC患者临床病理特征的关系;随访3年,分析circMYH9、PHL-DA2 mRNA表达与CRC患者预后的关系。结果CRC组织中circMYH9、PHLDA2 mRNA相对表达量均高于癌旁组织(P均<0.05)。CRC组织中circMYH9与PHLDA2 mRNA表达呈正相关(r=0.756,P<0.05)。CRC组织中circ-MYH9、PHLDA2 mRNA表达与肿瘤TNM分期、分化程度及淋巴结转移有关(P均<0.05),与患者性别、年龄、肿瘤最大径、肿瘤位置无关(P均>0.05)。98例CRC患者随访过程中死亡31例。circMYH9高表达组、低表达组生存时间、3年累积生存率比较差异均有统计学意义(P均<0.05);PHLDA2 mRNA高表达组、低表达组生存时间、3年累积生存率比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论CRC组织中circMYH9、PHLDA2高表达,二者表达变化与TNM分期、分化程度、淋巴结转移及预后有关。

炎症与肿瘤微环境

炎症与肿瘤之间存在联系。炎症是肿瘤的标志之一,影响肿瘤的进展、向恶性表型的转变以及肿瘤化学治疗药物的疗效,肿瘤微环境通过多种特定因素和信号机制影响肿瘤的生物学特性。炎症与肿瘤微环境之间相互作用,炎症通过诱导免疫抑制来影响肿瘤微环境,急性炎症通过产生抗肿瘤免疫反应来抑制肿瘤。本综述从肿瘤微环境的组分、炎症小体、细胞因子和非编码RNA等方面出发,阐述炎症如何通过影响肿瘤微环境,从而影响肿瘤的进展及治疗。炎症因子在调节炎症反应和免疫应答发挥重要的作用,同时它在肿瘤微环境中通过多种途径影响肿瘤的发展,它可以通过抑制免疫细胞的活性,使肿瘤逃避免疫监视,从而促进肿瘤细胞的增殖和转移。炎症也会引起氧化应激,生成活性氧和活性氮等氧化剂,这些氧化剂会损害核酸、蛋白质和脂质,诱导基因的突变和肿瘤转化。此外,非编码RNA在肿瘤微环境中扮演重要角色,对肿瘤和炎症起调控作用。它们通过多种途径参与调控肿瘤的发生、发展和炎症的过程,也参与调节炎症诱导的肿瘤或肿瘤相关的炎症,以及调节肿瘤微环境、炎症因子和免疫细胞之间的相互作用。因此,更深入地了解炎症与肿瘤微环境之间的相互作用与肿瘤发生、发展之间的联系,可以为肿瘤的治疗提供理论基础和策略。

晚期NSCLC放疗前后血清circPVT1和miR-486-5p水平变化及临床意义

目的探讨晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者放疗前后血清环状RNA浆细胞瘤转化迁移基因1(circPVT1)、微小RNA-486-5p(miR-486-5p)水平变化及对放疗疗效的评估价值。方法研究纳入137例晚期NSCLC患者作为NSCLC组,另选取健康体检者140例作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测血清circPVT1、miR-486-5p表达水平,比较放疗前后及不同放疗疗效患者血清circPVT1和miR-486-5p水平;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清circPVT1、miR-486-5p水平对放疗疗效的诊断价值。结果与对照组相比,NSCLC组放疗前血清circPVT1表达水平升高,miR-486-5p表达水平降低(P<0.05);经Targetscan在线分析显示,circPVT1与miR-486-5p有靶向关系;鳞癌与腺癌NSCLC患者放疗前血清circPVT1、miR-486-5p表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05);与TNM分期Ⅲ期患者相比,Ⅳ期患者血清circPVT1表达水平升高,miR-486-5p表达水平降低(P<0.05);与放疗前相比,放疗后患者血清circPVT1表达水平降低,miR-486-5p表达水平升高(P<0.05)。与放疗有效组相比,无效组放疗前和放疗后血清circPVT1表达水平升高,miR-486-5p表达水平降低(P<0.05);与放疗前相比,放疗有效组和无效组在放疗后均显示血清circPVT1水平降低,而miR-486-5p水平升高(P<0.01)。血清circPVT1、miR-486-5p联合诊断放疗无效的AUC为0.918(95%CI:0.859~0.958),敏感度为80.65%,特异度为88.00%,联合诊断效能优于单独诊断。结论血清circPVT1、miR-486-5p水平对晚期NSCLC放疗疗效有一定评估价值。

血清circNRIP1、miR-181、CDH-17对胃癌的早期诊断价值探讨

目的:探讨血清环状RNA核受体相互作用蛋白1(circNRIP1)、微小RNA-181(miR-181)、肝肠钙黏着蛋白17(CDH-17)对胃癌的早期诊断价值。方法:选取2021年1月—2022年6月湖南省肿瘤医院收治的胃癌患者88例和癌前病变患者80例,同时选取健康体检者80例作为对照组。比较三组血清circNRIP1、miR-181、CDH-17差异,同时分析不同临床特征的胃癌患者血清circNRIP1、miR-181、CDH-17差异,以及circNRIP1、miR-181、CDH-17诊断胃癌的价值。结果:胃癌组血清circNRIP1和miR-181相对表达量、CDH-17分别为(3.75±1.01)和(2.81±0.90)、(120.45±21.43)pg/mL,明显高于癌前病变组和健康组,差异有统计学意义(P<0.05);肿瘤直径≥5 cm患者血清CDH-17为(125.43±22.13)pg/mL,明显高于肿瘤直径<5 cm患者,差异有统计学意义(P<0.05);低分化患者血清circNRIP1和miR-181相对表达量分别为(4.10±0.90)和(3.32±0.85),明显高于中高分化患者,差异有统计学意义(P<0.05);TNM分期Ⅲ~Ⅳ患者血清circNRIP1和miR-181相对表达量、CDH-17分别为(4.16±0.94)、(3.07±0.90)和(125.69±23.10)pg/mL,明显高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ患者,差异有统计学意义(P<0.05);有淋巴结转移患者血清circNRIP1和miR-181相对表达量分别为(3.95±0.81)和(3.08±0.87),明显高于无淋巴结转移患者,差异有统计学意义(P<0.05);散点图示胃癌组血清circNRIP1、miR-181和CDH-17无显著相关性;血清circNRIP1、miR-181和CDH-17单独及联合诊断胃癌的AUC分别为0.759、0.705、0.835和0.751,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:胃癌患者血清circNRIP1、miR-181、CDH-17明显升高,与肿瘤直径、分化程度、临床分期及淋巴结转移有关,三者在诊断胃癌方面有一定应用价值。