ET-1mRNA反义寡核苷酸治疗模式下糖尿病大鼠生存状况及肾脏病理进展研究

目的对糖尿病肾病(DN)大鼠模型利用内皮素反义寡核苷酸(ET-1AS-ODN)技术进行干预治疗,探讨ET-1AS-ODN在糖尿病肾病(DN)早期肾功能的保护作用。方法使用64只健康的SD雄性大鼠,通过腹腔注射链尿佐菌素(STZ)以剂量为55~60 mg/kg的方法制备糖尿病模型。随后,对其中32只大鼠给予ET-1AS-ODN 6 OD/kg/wk的治疗。在治疗过程中,对大鼠的生存状况及肾功能病理进展情况进行动态观察和测量。结果经过2、4、6、8周实验动物饲养后,与生理盐水对照组相比,8周后模型组(DM)生存率极低(P<0.05),肾功能检测血肌酐(Scr)、尿肌酐、尿素氮(BUN)水平、ET-1含量显著增高。ET-1AS-ODN治疗组在8周后效果显著,能够明显降低DN大鼠的血肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平,并提高肌酐清除率(Ccr),其差异有统计学意义(P<0.05)。结论经AS-ODN早期干预治疗可以有效改善糖尿病大鼠的生存状态,并对肾功能具有保护作用。

cyclin D1反义寡核苷酸对胃癌细胞生长和G_1期调控的影响

目的 研究cyclinD1反义寡核苷酸 (ASODN )对胃癌细胞SGC790 1和HS746T的生长、细胞周期和G1期调控的影响。方法 采用脂质体LipofectAMINE 2 0 0 0包裹硫代修饰的cyclinD 1ASODN转染细胞 ,观察量效曲线和生长曲线 ,应用RT PCR检测cyclinD1mRNA的表达 ,流式细胞仪检测细胞周期 ,并用免疫组织化学技术检测胃癌细胞中cyclinD 1、p2 1、p2 7、pRb蛋白的表达。结果 cyclinD 1ASODN对胃癌细胞产生剂量依赖性的抑制效应 ,0 .2 μmol/LcyclinD 1ASODN转染 2 4h能显著抑制胃癌细胞生长 ,cyclinD 1mRNA表达分别是对照组的 2 6.3 % (SGC790 1)和 17.3 % (HS746T ) ,G0 /G1期比例明显增加 ,并使 2种细胞中cyclinD 1、pRb表达降低 ,p2 1表达升高 ,在HS746T中p2 7表达下降 ,但在SGC790 1中 p2 7表达无改变。 结论 cyclinD1反义寡核苷酸能有效抑制胃癌细胞的生长 ,降低cyclinD1mRNA表达水平 。

Cyclin D1反义寡核苷酸对SGC7901胃癌细胞生长和化疗敏感性的影响

目的 研究 Cyclin D1反义寡核苷酸对胃癌细胞 SGC790 1生长和化疗敏感性的影响 ,并探讨其内在机制。方法 采用脂质体 lipofect AMINE2 0 0 0包裹硫代修饰的 Cyclin D1ASODN转染细胞 ,观察对 SGC790 1细胞的量效曲线及其生长曲线。 0 .2μmol/ L Cyclin D1ASODN转染细胞 2 4小时后 ,给予梯度浓度的 5 -氟尿嘧啶 (5 -FU )、氨甲喋呤 (MTX)、顺铂 (DDP) ,观察量效反应 ,计算 IC50 。应用 RT- PCR检测细胞转染后 2 4小时和 4 8小时时Cyclin D1、胸苷酸合成酶 (TS)、胸腺嘧啶磷酸化酶 (TP)、二氢叶酸还原酶 (DHFR) m RNA表达情况。结果 CyclinD1ASODN对 SGC790 1细胞产生剂量依赖性的抑制效应 ,0 .2μm ol/ L Cyclin D1ASODN转染 2 4小时能显著抑制胃癌细胞生长 ,降低 Cyclin D1m RNA表达。 Cyclin D1ASODN增加了胃癌细胞对 5 - FU ,MTX,DDP的敏感性 ,ASODN +化疗组对各化疗药物的 IC50 均有显著下降。 RT- PCR显示 Cyclin D1ASODN转染后 2 4小时时 TS、DHFRm RNA表达较对照组下降 ,而 TPm RNA表达较对照组升高 ,4 8小时时 TS、TP、DHFR m RNA表达的改变更加明显。结论 Cyclin D1ASODN能降低 Cyclin D1m RNA表达 ,抑制胃癌细胞 SGC790 1的生长 ,并通过改变5 - FU,MTX代谢相关酶的表达提高细胞对它们的?

STAT1反义寡核苷酸对肺纤维化大鼠肺泡巨噬细胞分泌TNF-α、IL-8和NO的影响

目的:探讨STAT1(signaltransducerandactivatoroftranscription1)反义寡核苷酸(ASON)对博莱霉素(BLM)致肺纤维化1周大鼠肺泡巨噬细胞(AM)分泌TNF-α、IL-8和NO的影响。方法:取Wistar大鼠5只,向气管内灌注BLM复制肺纤维化模型后7d处死动物,通过支气管肺泡灌洗获取AM,并分为STAT1ASON组、STAT1正义寡核苷酸(SON)组、地塞米松(dexamethasone,DEX)组和空白对照组。分别用ASON、SON和DEX干预AM(空白对照组只加培养基),然后检测AM分泌TNF-α、IL-8和NO的能力。结果:用STAT1ASON处理AM后的培养上清中,TNF-α、IL-8和NO的含量减少,与空白对照组、SON组及DEX组相比较差异显著(P<0.05);DEX组AM的培养上清中,TNF-α、IL-8和NO的含量明显低于空白对照组和SON组(P<0.05);而空白对照组和SON组培养上清中,TNF-α、IL-8和NO的含量却无统计学意义(P>0.05)。结论:STAT1ASON和DEX能使AM分泌TNF-α、IL-8和NO的能力下降,且STAT1ASON的作用强于DEX。STAT1可作为肺纤维化治疗的靶目标。

Plk1基因为靶的反义寡核苷酸对HepG2肝癌细胞的体内外抗肿瘤作用

目的:以Plk1基因为靶筛选抗肿瘤药物。方法:根据Plk1mRNA的二级结构设计8条反义寡核苷酸药物,以脂质体介导进行转染,MTT染色计算细胞生长抑制率,从中筛选出一条序列并对其进行优化。最后以最佳序列9号进行体外作用持续时间及裸鼠移植瘤细胞生长抑制率分析。结果:针对5'编码区的5号序列在0.2μmol/L、0.4μmol/L和0.8μmol/L时抑制率分别是59.1%、75.5%和90.7%。它抑制细胞增殖作用最强。5号序列的5'端向内移动3个碱基形成的9号序列的抑制率高于其它3条序列,9号的IC50是0.081μmol/L。终浓度为0.2μmol/L的9号药物经脂质体介导转染给药1次后,抑制活性逐渐增加,第4天抑制率达到93.0%的峰值,然后缓慢下降,到第6天抑制率为78.3%。荷瘤裸鼠每日腹腔注射9号药物(25mg/kg)用药28天,处死时对照组的瘤重为(1.536±0.196)g,用药组瘤重为(0.485±0.378)g,方差分析表明用药组与对照组相比有显著性差异(t=5.59P<0.01),用药组抑瘤率达68.42%。结论:靶向Plk1的反义治疗能够抑制肿瘤的生长,对正常细胞无明显毒性。Plk1可作为肿瘤治疗的新靶点。

反义FAK寡核苷酸抑制FAK-ERK1/2介导的平滑肌细胞迁移和粘附

目的 研究FAK ERK1 2信号通路在平滑肌细胞迁移和粘附中的作用及FAK反义寡核苷酸对其的调控作用。方法 通过纤粘连蛋白 (fibronectin ,FN)诱导平滑肌细胞迁移和粘附 ,以免疫沉淀和Westernblot方法检测粘着斑激酶 (focaladhesionkinase,FAK)和细胞外调控激酶 1 2 (extracellularregulationkinase ,ERK1 2 )及其磷酸化的表达量。将FAK反义寡核苷酸 (antisenseoligodeoxynucleotides,ODNs)经脂质体转染细胞 ,观察转染后反义ODN对FAK和ERK磷酸化、细胞粘附和迁移的影响。结果 FN在有效诱导平滑肌细胞迁移和粘附时FAK和ERK1 2也呈明显表达 ,FN2 0 μg·mL- 1 可使磷酸化处于较高表达量。脂质体可有效地介导ODNs转染。转染后FAK及ERK1 2磷酸化表达量明显减少。结论 由活化的FAK和ERK1 2介导的信号转导促进了细胞外基质诱导的SMCs迁移和增殖 ,反义FAKODNs可有效地对此进行抑制。

β1-整合素反义寡核苷酸抑制胃癌细胞系SGC7901粘附侵袭的实验研究

目的:观察β1-整合素反义寡核苷酸对高侵袭性人胃癌细胞SGC7901粘附侵袭的抑制作用。方法:以脂质体为载体将硫代磷酸修饰的反义寡核苷酸转染SGC7901细胞,免疫化学方法观察转染后以Biotin标记的Inte鄄grinβ1asODN在细胞内的分布;RT-PCR及流式细胞术分别测定Integrinβ1mRNA和蛋白表达变化;MTT法和Boy鄄den小室模型分别测定其粘附力和侵袭力。结果:Integrinβ1asODN转染SGC7901后1h,胞浆及胞核内可见均匀分布的浅棕色颗粒,随着时间的延长,颗粒颜色不断加深;RT-PCR结果显示489bp处条带不同程度变浅;Integrinβ1蛋白表达曲线明显左移;粘附和侵袭实验证明,Integrinβ1asODN转染的SGC7901细胞的粘附力及侵袭力明显下降(P<0.001),抑制率分别为54%和76%,明显优于随机序列(P<0.001)。结论:Integrinβ1asODN转染SGC7901可降低其mRNA和蛋白表达水平,从而抑制其对细胞外基质(ECM)的粘附和侵袭。

以胰岛素样生长因子受体1基因为靶的反义寡核苷酸体内外抗肿瘤研究

以胰岛素样生长因子受体 - 1基因为靶筛选抗肿瘤药物 .根据IGF1RmRNA的二级结构设计了 9条反义寡核苷酸药物 ,以脂质体介导进行转染 ,MTT染色计算细胞生长抑制率 ,从中筛选出一条序列并对之进行优化 ,最后以最佳序列进行体外作用持续时间及体内细胞生长抑制率分析 .结果表明该序列在体内外具有良好的抗肿瘤活性 ,具有剂量依赖性关系 ,且对荷瘤裸鼠无明显的毒性 .

反义IRAK-2寡核苷酸抑制白介素-1生物学效应

目的 :研究白介素 1(IL 1)受体相关激酶 2 (IRAK 2 )的反义寡核苷酸对IL 1生物学效应的影响。方法 :Lipofectin介导反义IRAK 2寡核苷酸转染人脐静脉内皮细胞。用SandwichELISA法检测核因子 kappaB(NF kappaB)的活化 ,竞争ELISA法测定PGI2 合成 ,细胞ELISA法检测细胞间粘附分子 1(ICAM 1)蛋白表达水平 ,以逆转录PCR法检测ICAM 1mRNA和I RAK 2mRNA表达水平。结果 :①反义IRAK 2寡核苷酸呈浓度 (1～ 4 μg·ml-1)和时间 (5～ 2 4h)依赖性地抑制NF kappaB活化、PGI2 合成和ICAM 1蛋白表达 ,反义IRAK 2寡核苷酸 3 μg·ml-1与细胞共孵育 8h时抑制效果最好。②反义IRAK 2寡核苷酸抑制ICAM 1mRNA表达。③反义IRAK 2寡核苷酸抑制IRAK 2mRNA表达。结论 :反义IRAK 2寡核苷酸通过抑制IRAK 2表达抑制IL 1生物活性 ,预示反义IRAK 2寡核苷酸是一种可供选择的抗炎新策略。

C-erbB-2与c-raf-1基因反义寡核苷酸联合对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用

背景与目的:针对c-erbB-2与c-raf-1单基因的反义寡脱氧核苷酸(antisenseoligodexynucleotide,ASODN)治疗肿瘤的研究报道很多,这些研究往往局限于单个基因或细胞水平,从肿瘤发生的多基因学说上讲是不恰当的。本研究旨在探讨c-erbB-2与c-raf-1基因联合ASODN对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的治疗作用。方法:在BALB/c裸鼠上建立卵巢上皮癌模型,然后随机分成阴性对照组和6个实验组(分别为脂质体c-erbB-2SODN组、脂质体c-raf-1SODN组、脂质体c-erbB-2ASODN组、脂质体c-raf-1ASODN组、全剂量联合反义给药组、半剂量联合反义给药组)。检测裸鼠体重及肿瘤体积变化,计算抑瘤率及肿瘤缩小率。结果:给药后,全剂量联合反义给药组与半剂量联合反义给药组的肿瘤体积抑瘤率分别为72.5%和78.4%,肿瘤重量抑瘤率分别为70.7%和75.3%,肿瘤缩小率分别为29.7%和41.6%。在给药后,各组裸鼠体重变化无明显统计学差别。结论:C-erbB-2与c-raf-1基因联合ASODN在体内能明显地抑制肿瘤生长。

β_1整合素反义寡核苷酸抑制卵巢癌细胞粘附侵袭的实验研究

目的 观察β1整合素反义寡核苷酸对高侵袭性人卵巢癌细胞系CAOV3粘附侵袭的抑制作用。方法 合成的β1整合素反义寡核苷酸 (asODN)用脂质体转染入CAOV3细胞中 ,通过RT PCR、流式细胞术、MTT法、聚碳酸酯膜侵袭试验测定 β1整合素mRNA和细胞表面β1整合素蛋白表达及癌细胞粘附力、侵袭力的变化。结果 asODN组β1整合素 / β actinmRNA辉度值比值为 (0 .4 4 9± 0 .0 2 9) ,与对照组为 (0 .6 0 8± 0 .0 10 )相比 ,显著下降 (P <0 .0 1) ;流式细胞术检测asODN组平均荧光指数为(2 .4 30± 0 .10 4 ) ,较对照组 (6 .15 6± 0 .0 77)明显下降 (P <0 .0 1) ;asODN组粘附力为 0 .0 86± 0 .0 0 6 ,较对照组 (0 .137± 0 .0 19)显著下降 (P <0 .0 1)。asODN组穿透聚碳酸酯膜的细胞数为 16± 2 ,较对照组 (32± 4 )亦有显著差别 (P <0 .0 1)。而随机序列寡核苷酸 (rODN)组上述各指标较对照组无明显变化。结论 CAOV3细胞 β1整合素的表达与粘附侵袭能力密切相关 ,asODN能有效抑制CAOV3细胞 β1整合素基因的表达 ,从而抑制蛋白质合成 ,降低其粘附侵袭性。

内皮素-1反义脱氧寡核苷酸对糖尿病肾病大鼠肾组织形态学的影响

目的:研究内皮素-1反义脱氧寡核苷酸(ET-1AS-ODN)对链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导的糖尿病大鼠肾组织形态学的保护作用及其机制.方法:一次性腹腔注射STZ(60mg/kg),建立大鼠糖尿病模型,观察ET-1AS-ODN预防性给药对大鼠肾组织形态结构的保护作用.结果:ET-1AS-ODN可明显减轻糖尿病大鼠肾肥大指数,改善肾组织形态学损伤.结论:内皮素-1反义寡核苷酸可减轻STZ诱导的糖尿病肾病大鼠的肾损伤,对肾组织具有保护作用.其机制与减少内源性内皮素的产生有关.

β_1整合素反义寡核苷酸对人胰腺癌细胞BXPC-3生长和化疗敏感性的影响

目的:观察β1整合素反义寡核苷酸(ASODNs)对人胰腺癌细胞BXPC-3β1整合素mRNA表达及细胞生长和对化疗药物敏感性的影响。方法:采用脂质体将不同浓度β1整合素ASODNs转染到人胰腺癌细胞BXPC-3中,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞β1整合素mRNA表达水平,MTT法检测细胞相对存活率。转染β1整合素ASODNs24h后,给予梯度浓度5-氟尿嘧啶(5-FU)、阿霉素和健择,观察量效关系,计算IC50。结果:与对照组相比,32mg/L～128mg/LASODNs转染后可抑制胰腺癌细胞的生长,且呈量效依赖关系,64mg/L和128mg/L抑制作用最明显,其对应的β1整合素mRNA表达水平显著降低。转染β1整合素ASODNs能增加胰腺癌细胞对化疗药物的敏感性,ASODNs+化疗组对各化疗药物的IC50均有显著下降。结论:靶向β1整合素的反义寡核苷酸可有效阻断其在人胰腺癌细胞中的表达,抑制胰腺癌细胞生长,增强对化疗药物敏感性。

Cyclin D_1反义寡核苷酸对人黑色素瘤细胞周期的影响及对细胞增殖抑制作用的研究

目的 探讨cyclinD1反义寡核苷酸对人黑色素瘤的潜在治疗作用。方法 合成针对cyclinD1翻译起始部位序列的 2 0bp硫代反义寡核苷酸 (AS ODN)。采用流式细胞仪检测细胞周期的分布 ,用台盼蓝计数、集落形成抑制试验体外观察AS ODN对人黑色素瘤细胞增殖的影响。结果 cyclinD1反义寡核苷酸能增加G1期细胞百分比 ,降低S期细胞百分比 ,且明显抑制人黑色素瘤细胞生长和集落形成。结论 CyclinD1反义寡核苷酸能有效抑制人黑色素瘤细胞的增殖。

Cyclin D1反义寡核苷酸对Tca8113/CDDP细胞基因转录表达的影响

目的:构建细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的反义寡核苷酸真核表达载体,并检测其转染Tca8113/CDDP细胞系后的表达情况。方法:以Tca8113/CDDP细胞总RNA为模板,应用RT-PCR法扩增cyclin D1全长,通过克隆至pUCm-T载体中,测序完全正确;经IPTG诱导,可正确表达蛋白。上下游分别利用H ind III和EcoRI的酶切位点插入真核表达载体pcDNA3.1,测序鉴定;并构建表达cyclin D1反义寡核苷酸的2个重组载体,通过Lipofectam ine将其导入Tca8113/CDDP细胞系中,G418筛选获得阳性稳定表达细胞系;通过RT-PCR、免疫组化检测cyclin D1基因转录和蛋白表达。结果:成功构建pcDNA3.1-cyclin D1真核表达载体,分别命名为pcDNA3.1空载体(Co)、cyclin D1m RNA5’端为靶区的反义载体(C5’)、cyclin D1m RNA3’端为靶区的反义载体(C3’)、cyclin D1正义载体(CD1)。3’端反义寡核苷酸转染细胞后,cyclin D1m RNA表达水平降低58.8%,m RNA5’端反义寡核苷酸组无明显抑制。免疫组化结果显示,转导正义寡核苷酸组cyclin D1阳性表达为最高,转导m RNA3’端、m RNA5’端反义寡核苷酸组为弱阳性表达。结论:cyclin D1m RNA3’端反义寡核苷酸能明显抑制cyclin D1在Tca8113/CDDP中的表达,为进一步研究逆转Tca8113/CDDP耐药性提供了实验工具。

缺氧诱导因子-1α反义寡核苷酸抑制HBx诱导的血管内皮生长因子的表达

目的 探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)反义寡核苷酸对乙型肝炎病毒x蛋白(HBx)诱导的人肝癌组织中血管内皮生长因子(VEGF)表达的抑制作用。方法 用编码HBx基因全长的pHA-HBx质粒转染肝癌HepG2细胞;Western Blot方法鉴定HBx基因的整合和表达;用转染后的细胞建立表达HBx的裸鼠人肝癌模型。实验组用HIF-1α反义寡核苷酸作肿瘤组织内注射,对照组以相同体积的生理盐水作瘤体注射,观测不同时间点裸鼠肿瘤的生长状况。采用免疫组织化学染色方法检测肿瘤组织中HIF-1α、VEGF表达水平和微血管密度。结果 HBx基因成功整合人肝癌HepG2细胞基因组并表达;实验组经反义寡核苷酸处理后肿瘤体积和重量均低于对照组,两组间差异有显著性意义(P<0.05);实验组肿瘤组织中HIF-1α表达下调;实验组肿瘤组织中VEGF表达为(21.6±6.7)％,低于对照组的(78.6±10.2)％(P<0.01),微血管密度为19.75±7.38,低于对照组的36.64±12.25(P<0.01)。结论 HIF-1α反义寡核苷酸肿瘤组织注射可以抑制肝癌组织中HBx诱导的VEGF表达,抑制表达HBx的肿瘤生长。

HIF-1α反义寡核苷酸对骨肉瘤细胞系MG-63 HIF-1α和VEGF表达的影响

目的:观察缺氧诱导因子HIF-1α反义寡核苷酸(antisenseoligonucleotides,ASODN)在缺氧环境下对骨肉瘤细胞系MG-63HIF-1α和血管内皮生长因子VEGF表达的影响。方法:设计针对HIF-1αRNA亚基模板序列的反义﹑正义寡核苷酸(senseoligodeoxynucleotides,SODN),并建立骨肉瘤细胞体外缺氧培养模型,观察缺氧培养不同时相HIF-1α反义寡核苷酸对骨肉瘤细胞系MG-63HIF-1α和VEGF的表达的影响。RT-PCR方法检测HIF-1α和VEGFmRNA水平,免疫组化和免疫印迹方法检测HIF-1α和VEGF蛋白表达情况。结果:与常氧组比较,单纯缺氧组及SODN缺氧组的HIF-1α转录水平未见明显改变,蛋白表达水平却随缺氧时间延长明显升高;而VEGFmRNA以及蛋白的表达水平较常氧组均显著增强。然而在ASODN缺氧组,HIF-1α、VEGFmRNA活性以及蛋白的表达水平明显减弱,且HIF-1α蛋白水平与VEGF转录活性有明显的相关性。结论:在缺氧环境下,转染HIF-1α反义寡核苷酸能够抑制HIF-1α活性,从而使VEGFmRNA和蛋白的表达水平明显下降。

LMP-1 mRNA反义寡核苷酸抑制大鼠成骨细胞的分化

为深入探讨LIM矿化蛋白 1(LMP 1)在成骨细胞分化中的作用 ,体外培养大鼠成骨细胞 ,在培养基中加入LMP 1反义寡核苷酸 (LMP 1antisense终浓度为 0 8mol L) ,以阻断大鼠成骨细胞中LMP 1mRNA的表达。对照组加nonsense(终浓度为 0 8mol L)。测定细胞的碱性磷酸酶 (ALP)活性、培养基中骨钙素 (OC)的含量 ,免疫组化分析Ⅰ型胶原蛋白的表达 ,Northernblotting检测Ⅰ型胶原mRNA的表达。结果显示 :LMP 1mRNA被LMP 1antisense阻断后 ,ALP活性降低、OC分泌减少、Ⅰ型胶原蛋白和mRNA的表达下降。上述结果表明 :LMP 1mRNA被LMP 1反义寡核苷酸阻断后 ,成骨细胞分化受到明显的抑制 ,提示LMP 1是成骨细胞分化必不可少的正调节因子。

E-selectin和ICAM-1反义寡核苷酸对内皮细胞黏附肝癌细胞的影响

目的 :探讨反义寡核苷酸 (ASODN)对内皮细胞表达E selectin和ICAM 1的抑制及黏附肝癌细胞的影响。方法 :应用ASODN转染内皮细胞 ,通过流式细胞技术测定TNF α诱导后内皮细胞膜E selectin和ICAM 1的表达 ,RT PCR半定量测定E selectin和ICAM 1mRNA的表达 ,细胞黏附实验测定肝癌细胞与内皮细胞的黏附率。结果 :裸ASODN和脂质体 ASODN均降低了内皮细胞E selectin和ICAM 1分子及其mRNA的表达 ,后者尽管浓度低 ,作用更为明显 ;E selectin的ASODN显著降低了内皮细胞黏附肝癌细胞的黏附率。结论 :ASODN能竞争性地抑制内皮细胞黏附分子的表达 。

ERCC1反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞增殖、周期、药物敏感性及侵袭能力的影响

目的探讨体外ERCC1反义寡核苷酸(ERCC1-ASODNs)对人卵巢癌细胞耐药株SKOV3/DDP生长周期、增殖及侵袭力改变的影响及其逆转顺铂耐药的机制。方法将设计合成的特异性ERCC1-ASODNs片段以及无义寡核苷酸序列(NSODNs)转染至SKOV3/DDP细胞后实验分组,采用流式细胞学技术(FACS)检测细胞生长周期,MTT法检测转染前后细胞的生长抑制情况及对顺铂敏感性的差异,应用RT-PCR法检测各组细胞ERCC1 mRNA的表达情况;Transwell小室实验检测转染前后其侵袭力的改变。结果 ERCC1-ASODNs可下调SKOV3/DDP细胞的ERCC1基因的表达;抑制其细胞的生长;促使其细胞周期发生改变,S期细胞增多,G0/G1期细胞减少;转染后SKOV3/DDP细胞的侵袭力减弱,穿过基质膜细胞数目减少。结论运用ERCC1反义寡核苷酸能特异、高效抑制靶基因ERCC1的表达;且减弱卵巢癌耐药细胞的增殖及侵袭能力,增强其对顺铂的敏感性。