硒对环磷酰胺致生精功能损伤小鼠精子发生的改善作用及机制

目的:基于溶质载体家族7成员11-谷胱甘肽过氧化酶4(SLC7A11-GPx4)信号通路探讨硒对环磷酰胺(CTX)致生精功能损伤(SI)模型小鼠精子发生的改善作用及机制。方法:将36只KM小鼠随机分为6组,每组6只,分别为SI模型对照组、缺硒模型(-Se SI)组、加硒模型(+Se SI)组,所有模型组均腹腔注射100 mg/kg CTX,正常对照组、-Se对照组、+Se对照组,对照组均注射生理盐水,注射周期为每周1次,连续6周。采用HE染色法观察各组小鼠睾丸组织形态学及病理学变化,并对附睾中精子进行计数,Western印迹试验检测GPx4和SLC7A11蛋白表达,RT-qPCR检测铁死亡相关基因变化。将GC2-spd细胞随机分为正常对照组,Ferrostatin(Fer-1)组,Erastin组,-Se组,亚硒酸钠(SeS)0.5、5.0μmol/L组,硒代蛋氨酸(SeM)5.0、50μmol/L组,SeS+Erastin组,SeS+Fer-1组,SeM+Erastin组,SeM+Fer-1组,观察GC2-spd细胞铁死亡相关蛋白和基因水平的变化。结果:CTX诱导的SI模型组小鼠睾丸和前列腺脏器指数明显低于正常对照组,生精细胞内层次减少,空洞增加,血清铁蛋白浓度下降(P<0.05),转铁蛋白浓度上升(P<0.05);+Se SI模型组、+Se对照组分别较-Se SI模型组、-Se对照组的脏器系数升高(P<0.05,P<0.01),且+Se组睾丸组织病理变化明显改善。SI模型对照组较正常对照组小鼠睾丸GPx4和SLC7A11基因表达量降低(P<0.01),而+Se SI模型组、+Se对照组分别较-Se SI模型组、-Se对照组小鼠睾丸GPx4和SLC7A11基因显著上升(P<0.01,P<0.05),但两种蛋白表达量却无明显差异。体外GC2-spd细胞实验结果显示,-Se组较正常对照组GPx4基因和GPx4蛋白水平均显著降低(P<0.05),SLC7A11基因水平下降(P<0.01);不同剂量的SeS和SeM均显著提高-Se组GPx4蛋白表达,低剂量SeM促进GPx4基因水平显著上升,高剂量SeS使SLC7A11基因和SLC7A11蛋白表达量增加(P<0.05,P<0.01)。-Se组较正常对照组,acsl4和ptgs2基因水平明显下降,SeM促进acsl4表达,SeS促进ptgs2和fth1的表达(P<0.01,P<0.05)。GC2-spd干预结果显示Erastin组较正常对照组ptgs2降低,SeS+Erastin、SeM+Erastin组较Erastin组ptgs2基因表达均增加,但Fer-1较正常对照组ptgs2表达降低,SeS+Fer-1、SeM+Fer-1组较Fer-1组ptgs2基因水平降低(P<0.05);SeM+Erastin、SeM+Fer-1组分别较Erastin、Fer-1组均GPx4的基因量增加(P<0.01,P<0.05);SeM+Erastin、SeS+Erastin较Erastin组和SeM+Fer-1、SeS+Fer-1组较Fer-1组SLC7A11均降低,且伴随着acsl4和fth1的升高(P<0.01)。结论:硒缺乏导致小鼠睾丸和精母细胞SLC7A11和GPx4基因水平降低,铁死亡相关基因表达异常,GPx4蛋白表达下降。硒促进GPx4基因和GPx4蛋白表达,提高SLC7A11基因表达量,改善生精功能损伤小鼠睾丸的精子发生,且有机硒SeM和无机硒SeS对铁死亡通路相关基因的调控存在差异。

芪苓通络方联合甲泼尼龙与环磷酰胺治疗特发性膜性肾病中高危患者临床观察

目的：观察芪苓通络方联合甲泼尼龙与环磷酰胺治疗特发性膜性肾病中高危患者临床疗效。方法：采用随机、对照的临床研究方法,将80例患者随机分为治疗组和对照组。对照组给予甲泼尼龙＋环磷酰胺,治疗组在对照组基础上予中药汤剂芪苓通络方加味治疗,比较两组患者疗效、24 h尿蛋白定量、血浆白蛋白、肾功能、血脂、纤维蛋白原、D-二聚体等指标的变化。结果：治疗组经6个月治疗后疗效优于对照组（P〈0.05）,24 h尿蛋白定量、纤维蛋白原、D-二聚体均下降,血浆白蛋白升高,与对照组比较差别有统计学意义（P〈0.05）;肾功能、血脂指标均改善,治疗过程中不良反应少。结论：中西医结合方案治疗特发性膜性肾病中高危患者疗效较好,安全性更高。

广枣总黄酮对小鼠免疫功能的影响

证实广枣总黄酮(TFC)40.32mg/kg和20.16mg/kg均可明显增强正常和环磷酰胺所致免疫功能抑制小鼠细胞免疫和体液免疫功能。表现为增加免疫器官重量,使溶血素、溶菌酶含量和再次抗原刺激抗体的效价升高,增加淋巴细胞ANAE(+)细胞百分率,促进腹腔巨噬细胞吞噬功能等。

贵州野生多汁乳菇对小鼠免疫功能影响

目的观察贵州野生多汁乳菇对正常及环磷酰胺(CP)损伤免疫系统小鼠的免疫调节作用。方法实验设多汁乳菇组9.0 mg/(kg.bw)、多汁乳菇组9.0 mg/(kg.bw)+CP、CP组、正常对照组。灌胃给小鼠多汁乳菇提取液35 d,CP腹腔注射造成小鼠免疫损伤。观察小鼠体重的生长情况、小鼠脏器系数、血清溶血素、小鼠足趾迟发型超敏反应(DTH)、碳粒廓清指数α等指标。结果小鼠胸腺系数、血清溶血素(HC50)、小鼠足趾DTH、碳粒廓清指数α明显高于CP组(P<0.01)。其中小鼠足趾DTH,碳粒廓清指数α恢复至正常对照组水平。结论贵州野生多汁乳菇对CP所致的免疫损伤小鼠的细胞免疫、体液免疫、非特异性免疫功能有明显的改善作用。

汰可分手消毒液毒性评价

为了解汰可分手消毒液的安全性,对其进行了急性经口毒性、蓄积毒性、皮肤刺激性、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验和精子畸形试验。结果,汰可分手消毒液对雌、雄小鼠急性经口毒性LD50均大于5000 mg/kg体重;对小鼠蓄积毒性蓄积系数K>5;对家兔皮肤刺激指数<0.4,无皮肤刺激性;对小鼠骨髓嗜多染红细胞无致微核作用;对小鼠精子无致畸作用。因此,在本实验条件下,该消毒液为实际无毒物质,对皮肤无刺激性,没有致突变作用。

PROMACE和CYTBOM方案治疗中高度非霍奇金淋巴瘤疗效及毒性观察

目的 评价PROMACE和CYTBOM方案治疗中高度非霍奇金淋巴瘤疗效及毒性。方法 44例经组织学证实的NHL患者分为PROMACE和CYTBOM方案治疗组 ,CHOP方案对照组。结果 治疗组总缓解率为 90 9% ,对照组为 73 9% ,两组差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;治疗组CR率 45 5 % ,对照组为 3 4 8% ,两组差异无显著性。初治病例CR率 :治疗组 5 3 3 % ,对照组为 3 8 5 % ,两组差异无显著性 (P >0 .0 5 )。治疗组 2年生存率及中位生存期分别为 5 0 % ,2 2 5月 ;对照组为 40 5 %和 19 5月 ,两组差异无显著性。两组毒副反应均为骨髓抑制及轻度消化道反应 ,均能耐受。结论 对于中高度恶性非霍奇金淋巴瘤 ,PROMACE和CYTBOM方案是一个疗效及安全性较高的第三代化疗方案。

BMP-4在卵巢早衰小鼠卵巢中的变化

目的分析BMP-4在化疗后卵巢早衰（POF）小鼠卵巢中的表达,探索BMP-4与卵巢早衰卵巢中卵泡发育的关系,为卵巢早衰的发病机制及临床治疗的研究提供参考依据。方法选用48只4~5周龄具有正常动情周期的雌性昆明小鼠随机分为3组：POF组,腹腔注射环磷酰胺,皮下注射白消安建立卵巢早衰模型;对照组,腹腔注射0.9%的生理盐水;正常组。观察并记录小鼠的一般情况,应用HE染色、免疫组织化学技术和Western blot技术,观察卵巢形态学变化、各级卵泡数的变化及BMP-4的分布情况。结果 1POF组小鼠体重下降,卵巢体积缩小,HE染色显示卵泡数目减少,原始卵泡数目（15.44±2.16）与正常组（55.25±16.09）和对照组（53.37±18.11）相比明显减少（P〈0.05）。2免疫组化结果显示BMP-4在正常组卵巢和对照组卵巢中的表达比在POF组卵巢中的表达高。3免疫组化结果显示BMP-4在POF卵巢中的表达明显减少,其中原始卵泡（39.83±6.50）减少最为明显,与正常组（68.61±5.25）和对照组（66.72±6.26）相比差异有统计学意义（P〈0.05）。4Western blot结果显示POF卵巢中的BMP-4表达最低,约为正常组的0.6倍（P〈0.05）。结论 POF组的BMP-4表达降低明显,在原始卵泡中降低最为明显,推测其对原始卵泡的存活和发育及调控卵泡闭锁有促进作用。

利妥昔单抗联合氟达拉滨和环磷酰胺治疗慢性淋巴细胞白血病的疗效和安全性

目的评价利妥昔单抗联合氟达拉滨和环磷酰胺（FCR）方案治疗慢性淋巴细胞白血病（CLL）的疗效和安全性。方法回顾性分析2003年4月至2012年1月应用FCR方案治疗的26例CLL患者病例资料。根据患者的Rai危险度分层、β2-微球蛋白（β2-MG）、LDH、ZAP-70表达、CD38表达、细胞遗传学和免疫球蛋白重链可变区基因（IgVH）突变状态等指标进行分组，行疗效和生存分析。同时评价FCR方案的安全性。结果26例患者完全缓解（CR）10例（38．5％），部分缓解（PR）10例（38．5％），总反应率（ORR）76．9％。中位随访30（3—98）个月，中位无进展生存（PFS）时间42（16～68）个月，总生存（OS）时间63（41～85）个月。曾治疗疗程数〈2个、2个疗程骨髓淋巴细胞比例下降I〉50％、低LDH、低β2-MG和ZAP-70阴性与高CR率相关（P值分别为0．014、0．008、0，027、0．035和0．013）。微小残留病（MRD）阴性、LDH正常和2个疗程骨髓淋巴细胞比例下降≥50％的患者PFS时间和Os时间明显优于相应对照组（P值均〈0．05），非遗传学高危组患者PFS时间优于遗传学高危组患者（P=0．005），OS时间差异无统计学意义。FCR方案的主要不良反应为胃肠道反应（88．5％）；其次为骨髓抑制（80．8％），包括中性粒细胞减少、贫血和血小板减少；感染发生率为30．8％，主要为肺部感染。结论FCR方案是治疗CLL患者的一种有效而安全的方案。MRD阳性、LDH升高、2个疗程骨髓淋巴细胞比例下降〈50％和高危遗传学异常患者应在获得治疗反应后尽快寻求更加有效的治疗方案。

鬼臼噻吩甙、环磷酰胺和地塞米松治疗Ⅲ期多发性骨髓瘤21例报告

目的 总结 VCD方案 :鬼臼噻吩甙 ( VM- 2 6)联合环磷酰胺 ( CTX)和地塞米松 ( DXM)治疗 期多发性骨髓瘤 ( MM)的疗效和毒副作用。方法 2 1例可评价的 期 MM患者中 , A 期 16例、 B期 5例。VM- 2 630 mg/ m2静滴、d1～ 3;CTX2 0 0 mg/ m2静注、d1,3,5;DXM10～ 2 0 mg/ d口服、d1～ 7。 2 8天为一疗程。结果 总反应率为 76% ( 16/ 2 1) ,其中部分缓解占 38% ( 8/ 2 1)、进步占 38%( 8/ 2 1)、无效占 2 4 % ( 5/ 2 1)。全组生存期 3～ 31个月 ;中位生存期 ( MST) 13个月 ,其中 A、 B期中位生存期分别为 11,12个月。全组中位缓解期 5个月 ,呈现反应的中位数为 2个疗程。白细胞毒性反应 0°、 °、 °、 °分别占 10 %、54%、31%、5% ;血小板毒性则分别占 67%、17%、13%、3%。全组胃肠道反应轻微 ,未见心、肝、肾毒性。结论 我们认为 ,VCD方案是治疗 期 MM的有效方法。

糖皮质激素联合环磷酰胺治疗原发性IgA肾病伴肾病综合征及肾功能不全的疗效分析

目的 探讨糖皮质激素联合环磷酰胺（cytoxan,CTX）治疗原发性免疫球蛋白A肾病（Immuno-globulin A nephropathy,IgAN）伴肾病综合征及肾功能不全的疗效.方法 选取70例原发性IgA肾病伴肾病综合征及肾功能不全患者作为研究对象,遵循单盲随机分配原则将患者分为各两组,每组35例,对照组给予单纯糖皮质激素治疗,观察组患者给予糖皮质激素、环磷酰胺联合治疗,比较两组肾功能指标、24 h尿蛋白水平、血清白蛋白水平、不良反应发生情况.结果 治疗后,两组患者的内生肌酐清除率、肾小球滤过率与治疗前比较均未出现下降（t=0.368、0.186、0.234、0.200,均P〉0.05）,其24 h尿蛋白均明显降低（t=4.417、9.576,均P〈0.05）,血清白蛋白水平明显增高（t=5.922、9.433P〈0.05）,而两组治疗后内生肌酐清除率[（16.23±7.57）mL/min比（16.09±7.69）mL/min]、肾小球滤过率[（37.12±9.52）mL/min比（37.64±9.67）mL/min]差异均无统计学意义（t=0.077、0.227,均P〉0.05）,观察组治疗后的24 h尿蛋白水平（1.18±0.30）g、血清白蛋白水平（36.24±2.39）g/L优于对照组[（1.50±0.27）g、（33.92±2.07）g/L,t=4.691、4.341,均P〈0.05）];治疗期间,观察组的不良反应发生率（25.71％）与对照组（22.86％）比较差异无统计学意义（χ2=0.078,P〉0.05）.结论 糖皮质激素与环磷酰胺联用可在一定程度上减少IgA肾病伴肾病综合征及肾功能不全患者的尿蛋白,提高血清白蛋白浓度,但其与单纯应用糖皮质激素相比,对肾功能并无明显的额外改善作用,且不良反应较为严重,临床上应谨慎使用.

环磷酰胺抑瘤作用及含药血清对肿瘤细胞凋亡水平的影响

目的:采用小鼠腋下接种瘤株的方法,建立肝癌荷瘤小鼠动物模型;利用血清药理学的方法,观察环磷酰胺(CTX)含药血清体外的抑制肿瘤细胞生长及调亡作用的研究。方法:小鼠肝癌细胞混悬液用生理盐水按1∶1进行稀释制成含瘤腹水混悬液,在给药前24h,每只小鼠腋窝皮下接种0·2ml。CTX对小鼠肝癌抑瘤实验连续给药10d,测定肿瘤作用端粒酶活性与细胞凋亡表达。结果:(1)CTX能够明显抑制肝癌肿瘤的生长(P<0·01);(2)30%、20%和10%含药血清高中低剂量含药血清对HepG2肿瘤细胞具有明显的抑瘤作用,Hochest染色肿瘤细胞出现凋亡形态;而流式细胞仪检测可见含药血清高中低剂量的促肿瘤凋亡率,明显高于正常血清组。CTX能够明显升高肝癌荷瘤小鼠体内bcl-2的水平(P<0·01);(3)CTX能够明显促进肝癌细胞的凋亡。结论:CTX具有抑制小鼠肝癌的作用;能够明显促进肝癌细胞的凋亡;CTX的抑瘤作用可能与升高动物体内的bcl-2水平及促进癌细胞的凋亡有关,从而表现抗肿瘤的作用。