榅桲果醋的制备工艺优化及风味成分分析

果醋是一种具有独特口感和风味的发酵型饮料或调味品。该研究以新鲜喀什榅桲为原料,采用液态发酵法,通过单因素试验和正交试验优化制备工艺,使用顶空固相微萃取联合气相色谱-质谱法(HS-SPME-GC-MS)测定果醋的挥发性风味成分。结果表明,榅桲果醋发酵的最佳工艺条件为醋酸菌接种量1.0%、初始酒精度8.0%、发酵温度34℃,此时果醋总酸含量为4.05 g/dL,感官评分为89.87分,颜色呈亮黄色,澄清,酸甜爽口。榅桲果醋中共鉴定出33种挥发性风味成分,其中醇类6种、酚类3种、酮类2种、醛类3种、酸类5种、酯类11种和其他类3种,酯类和醇类相对含量较高,赋予榅桲果醋独特的风味。该研究结果为新型果醋风味饮品的研发提供了参考。

盐胁迫对榅桲组培苗生长及其生理特征的影响

以榅桲组培苗为实验材料,采用不同质量分数的NaCl和Na2SO4处理后,观察盐胁迫对其生理生化指标的影响.结果表明:榅桲组培苗萌芽率、增殖倍数和平均株高均随2种盐质量分数的增大而降低,并在2种盐质量分数皆为1.0%时不再萌芽,平均株高降至试验最低值,而在NaCl和Na2SO4质量分数分别为0.8%和1.0%时不再增殖;榅桲组培苗叶片膜透性随着2种盐质量分数的增大而升高且与对照差异显著,并于盐质量分数为1.0%时均达到试验最大值,而当NaCl和Na2SO4质量分数分别为0.8%和1.0%时,组培苗致死率超过50%;组培苗叶片的超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性均随着2种盐质量分数的增大呈先上升后下降趋势,而过氧化物酶(POD)活性则随着2种盐质量分数的增加而持续增强.研究发现,盐胁迫榅桲组培苗的相关指标均与相应对照有显著差异,其中的叶片膜透性及其SOD、CAT以及POD均可作为鉴定榅桲耐盐性评价指标.

榅桲总黄酮降压作用及抗炎机制的实验研究

目的:研究榅桲总黄酮对自发性高血压大鼠血压的影响,并从抗炎角度初步探讨其作用机制。方法:自发性高血压大鼠分为模型组、卡托普利(25 mg/kg)组、杜仲平压片(30 mg/kg)组及榅桲总黄酮低(40 mg/kg)、中(80 mg/kg)、高(160 mg/kg)剂量组,以WKY大鼠为正常对照组。记录给药前(0 min)及给药后2、4、6、8、10、12、14、16 w各组大鼠的体质量与血压,并于各组大鼠灌胃给药16 w后,分别检测各组大鼠血清中IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α及CRP的含量,评价榅桲总黄酮对炎症因子的影响。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠血压及血清IL-1β、IL-6、TNF-α和CRP等炎症因子含量显著升高,IL-10含量显著降低;与模型组比较,榅桲总黄酮各剂量组血压及血清IL-1β、IL-6、TNF-α和CRP水平均有不同程度降低。结论:榅桲总黄酮可抑制自发性高血压大鼠血压升高,其作用机制可能与降低体内炎症因子水平,进而抑制高血压的发生发展有关。

榅桲果实CAD基因的克隆、序列分析及表达

【目的】研究榅桲果实木质化与CAD基因的关系。【方法】基于GenBank报道的近缘物种CAD基因cDNA序列,应用Primer Premier 5.0软件设计PCR扩增引物。提取榅桲总RNA,经反转录后合成cDNA,应用RT-PCR方法成功扩增出CAD基因片段并克隆到pMD18-T载体。通过DNAstar软件进行同源序列比对,ClustalX结合MEGA4.1软件构建系统进化树,采用Protparam在线程序分析蛋白质的理化性质,用DNAstar的Protean程序预测二级结构。通过间苯二酚染色鉴定果肉发育时期木质素的积累程度,并利用RT-qPCR对CAD基因在发育期时期的表达规律进行检测。【结果】榅桲CAD基因其开放阅读框(ORF)序列为1 071 bp,编码356个氨基酸,与其他物种序列同源性最高达96%,进化关系上与苹果较近。在果实6个发育时期,木质素积累逐渐降低,而CAD基因表达与果实木质化程度紧密相关,随着木质素合成趋缓呈现一个逐步下调的趋势。【结论】CAD基因是调控榅桲果实木质化的关键基因。

沙尘胁迫对榅桲叶片光合和叶绿素荧光特性的影响

以榅桲(Cydonia oblonga Mill)为研究材料,以无沙尘覆盖为对照(CK),设置轻度沙尘胁迫(5mg·cm^(-2))和重度沙尘胁迫(12mg·cm^(-2))两个处理,并分别在处理第10、20、30和40天时,测定其叶片光合特性和荧光参数的变化。结果表明:沙尘处理下榅桲叶片的净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)、蒸腾速率(Tr)均随处理时间的延长呈下降趋势,胞间CO2浓度(Ci)呈先升后降的变化趋势;最大光量子效率(Fv/Fm)在处理第10天显著下降,此后随处理时间的延长逐渐回升至与对照一致水平。最大荧光(Fm)、非光化学淬灭(NPQ_Lss)、PSⅡ潜在活性(Fv/Fo)、光化学反应淬灭(q P_Lss)随处理时间的延长整体均呈上升趋势,初始荧光(Fo)呈下降趋势。说明榅桲在沙尘胁迫处理前期受非气孔因素的影响较大,沙尘胁迫导致榅桲叶片PSⅡ原初光能转换效率较低,对榅桲产生光抑制,导致Pn下降。而在处理后期,榅桲叶片主要通过增加q P_Lss、Fm、NPQ_Lss等来增强PSⅡ电子传递能力,提高非辐射性热耗散来消耗过剩光能,保护光合机构。

榅桲总黄酮对自发性高血压大鼠心肌肥厚的抑制作用及机制研究

目的研究榅桲总黄酮对自发性高血压大鼠心肌肥厚的抑制作用及可能的作用机制。方法自发性高血压大鼠分为模型组、卡托普利组(25μg·g^(-1))、杜仲平压片组(30μg·g^(-1))、榅桲总黄酮低(40μg·g^(-1))、中(80μg·g^(-1))、高剂量组(160μg·g^(-1)),WKY大鼠为正常对照组。给药16周后进行心脏组织病理学检查,评价靶器官损伤程度,测定血或心脏组织中血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)、醛固酮(aldosterone,ALD)水平,并分别通过RT-PCR和Western blot检测心肌组织ACE、ACE2和AT_1的mRNA和蛋白表达水平,评价榅桲总黄酮对RAAS系统的影响。结果与SHR组相比,榅桲总黄酮中剂量组(SHR+COMF-M)和高剂量组(SHR+COMF-H)心脏质量(HW)、心脏质量/体质量(HW/BW)、左室质量(LVM)、左室质量/体质量(LVM/BW)均有不同程度减小,榅桲总黄酮可抑制SHR心肌细胞肥大,使心脏和血液中的AngⅡ和ALD含量减少(P<0.01或P<0.05)。与SHR组相比较,榅桲总黄酮各剂量组心肌组织血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)和血管紧张素受体1(angiotensin receptor 1,AT_1)的mRNA和蛋白相对表达量有不同程度减少,ACE2的mRNA和蛋白相对表达量有不同程度增加(P<0.01或P<0.05)。结论榅桲总黄酮可抑制自发性高血压大鼠心肌肥厚,主要作用机制可能与抑制肾素-血管紧张素-醛固酮系统有关。

榅桲子叶不定芽再生研究初报

以榅桲子叶为试材,研究了基本培养基、激素组合等对榅桲子叶初代培养、继代培养和生根培养的影响。结果表明:初代培养基以1/4MS+6-BA 5.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,诱导效果最好,芽诱导率达75.0%;继代培养基以MS+6-BA 0.6 mg/L+IBA 0.2 mg/L,组培苗叶绿,舒展;生根培养基蘸IBA 50.0 mg/L,时间3 s,30 d生根率最高,可达75%;驯化移栽,以锯末为介质,成活率为78%。

优良观赏果树榅桲的推广应用

榅桲的栽培具有悠久的历史,它具有较强的耐寒、耐旱、耐盐碱能力,适于我国北方大多数城市栽培;其树姿、叶片、花和果实均具有较高的观赏价值,是较好的观赏树种;同时,榅桲又具有很高的经济价值,是优良的果树。因此,在我国北方,榅桲具有很高的推广价值。

榅桲果实中生物碱粗提物的抑菌作用研究

经过定性实验确定榅桲中含生物碱,用分光光度法测定榅桲果实总生物碱含量为1.2%。又对榅桲果实生物碱粗提物对几种常见菌株进行体外抑菌实验。结果表明,榅桲果实生物碱粗提物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌有一定的抑制作用,但对黑曲霉、根霉、青霉和酵母菌的抑制效果不太明显。

维药榲桲提取物降压作用的实验研究

目的探讨榲桲对肾性高血压大鼠血压的影响及其作用机制。方法建立两肾一夹肾性高血压大鼠模型,60只高血压大鼠随机分为模型组、卡托普利对照组和榲桲高中低3个剂量组,另有10只大鼠作为假手术组,给药8w,每2w测定1次大鼠的血压,末次给药1h后处死动物,测定肾组织和血浆中AngII与ET含量,观察其降压作用。结果榲桲各剂量组和Cap组大鼠收缩压明显低于模型组(P<0.05);榲桲高中低剂量组肾组织中的AngII含量较模型组降低(P<0.05),榲桲高、低剂量组血浆ET水平明显升高与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论榲桲提取物具有降压作用,其作用机制可能与降低AngⅡ含量和ET水平有关。

榅桲总黄酮对自发性高血压大鼠心脏结构和功能的影响

目的研究榅桲Cydonia oblanga Mill.总黄酮对自发性高血压大鼠(SHR)心脏结构和功能的影响。方法大鼠分为模型组(SHR组)、卡托普利组[25 mg/(kg·d)]、杜仲平压片组[30 mg/(kg·d)]和榅桲总黄酮低、中、高剂量组[40、80、160 mg/(kg·d)]剂量组。WKY大鼠给予蒸馏水,作为正常对照组。灌胃给药16周后,进行超声心动图、心脏血流动力学和组织病理学检查,评价榅桲总黄酮对大鼠心脏结构和功能的影响。Masson染色后,光镜下观察心肌纤维化程度。结果超声心动图结果显示,与SHR组比较,榅桲总黄酮组左心室舒张末期内径、左心室收缩末期内径、室间隔厚度指数均有所降低,左心室质量、左心室质量指数、左心室质量/体质量比均明显减小,榅桲总黄酮中、高剂量组左心室内径缩短率、左心室射血分数增大,其中榅桲总黄酮高剂量组变化最大。血流动力学测定结果显示,与SHR组比较,榅桲总黄酮组收缩压、舒张压、左室收缩压、左室舒张末期压降低,室内压最大上升速率、室内压最大下降速率减小,收缩时间无明显变化,舒张时间延长,心率减小但无显著性差异。Masson染色结果显示,榅桲总黄酮高剂量组心肌纤维化明显减少。结论榅桲总黄酮可改善自发性高血压大鼠心脏功能,抑制心肌肥厚,并减轻心肌纤维化。

榅桲4CL基因的克隆与生物信息学分析

【目的】克隆榅桲果肉(Cydonia oblonga Mill)中4-香豆酸辅酶A连接酶(4-coumarate CoA ligase,4CL)基因,研究其序列特征,为该基因在榅桲果实发育过程中的作用和功能奠定基础。【方法】以榅桲果肉为试材,基于GenBank报道的近缘物种4CL基因cDNA序列,应用Primer Premier 5.0软件设计PCR扩增引物。提取榅桲总RNA,经反转录后合成cDNA,应用RT-PCR方法成功扩增出4CL基因片段并克隆到pMD18-T载体。通过DNAstar软件进行同源序列比对,ClustalX结合MEGA4.1软件构建系统进化树,采用Protparam在线程序分析蛋白质的理化性质,用DNAstar的Protean程序预测二级结构。【结果】榅桲4CL基因其开放阅读框(ORF)序列为1710 bp,编码570个氨基酸,蛋白分子质量为68.4 kD,与其他物种序列同源性最高达91.99%,进化关系上与水密桃较近;榅桲4CL蛋白为亲水性蛋白,二级结构中以无规卷曲(Random coil)为主,占比达到44.27%。【结论】获得了榅桲4CL基因全长编码区序列,探明了该序列的结构特征。

榅桲总多酚的纯化工艺及PTP1B抑制作用研究

通过采用11种大孔吸附树脂对榅桲多酚粗提物的静态吸附和解吸试验,筛选出适合分离纯化榅桲总多酚的最优树脂,并对其动态吸附特性和影响因素进行研究。结果表明:最佳纯化工艺条件为:AB-8大孔吸附树脂做吸附填料,上样液质量浓度0.04 g/m L,以2 BV/h的吸附速率进行吸附,上样量为11 BV,用3 BV蒸馏水除杂后,以50%乙醇溶液为洗脱剂,洗脱液用量为4 BV,洗脱流速控制在2 BV/h。经AB-8树脂吸附富集后,样品总多酚质量浓度达到了30.11 mg/g,是粗提物(9.55 mg/g)的3倍。对纯化前后的榅桲总多酚进行PTP1B的抑制作用研究,结果显示,榅桲总多酚对PTP1B有较强的抑制作用,即榅桲总多酚纯化前的IC50为78.14μg/m L,用AB-8树脂纯化后所得总多酚的IC50为16.12μg/m L。

榅桲的化学成分及其挥发油的GC-MS分析

采用常规水蒸气蒸馏法提取出榅桲挥发油，经气相色谱／质谱联用方法分析，分离鉴定出18种成分，主要成分有乙酸十二酯、环壬烷酸乙酯、14-十五碳烯酸、7，10，13-十二烷三烯酸甲酯、4．葵烯酸乙酯和5．甲基壬酸乙酯，并用化学方法分析了榅桲的化学成分。

榅桲的组织培养初报

以苹果型榅椁嫩枝茎段为试材，研究了不同灭菌剂、灭菌时间、基本培养基、激素组合等对榅桲外植体灭菌、初代培养、继代培养和生根培养的影响。结果表明：用0．1％升汞溶液消毒5min，灭菌效果最好；初代培养基以MS＋6-BA0．6mg／L效果较好,萌芽率和增殖倍数均较高，分别为93．3％和4．7倍；继代培养基以MS＋6-BA 0．6mg／L＋IBA 0．2mg／L和MS＋6-BA 0．6mg／L＋IBA 0．4mg／L组合交替使用更有利于组培苗的增殖和壮苗；生根培养基以1／2 MS（I）＋NAA1．0mg／L生根率最高达50％，平均根数为7～10根；短时间（7d）暗培养对诱导韫椁苗生根有利，随着暗培养天数的增加叶焦边现象逐渐加重甚至出现顶端枯死现象；6-BA对诱导韫柠组培苗生根无益且易出现畸形叶。

新疆榅桲中黄酮的提取及抗菌活性测定

本实验分别用水和70%乙醇从榅桲中提取其活性成分黄酮,测试其抑菌作用。结果表明,榅桲提取物对微生物有不同程度的抑制作用。5种受试菌中,铜绿假单胞菌对样品的抗菌活性较为敏感,榅桲的醇提液比水提液具有更明显的抑菌效果。这将为榅桲开发为新型抗菌药物提供一定的理论依据。

维药榅桲叶总黄酮对血糖、肝功能和脂代谢紊乱的影响

目的观察榅桲叶总黄酮(Cydonia Oblonga Mill.leaf total flavonoid)对糖尿病大鼠血糖、肝功能和脂代谢紊乱的影响。方法采用高脂高糖饲料连续喂养4w、小剂量链脲佐菌素(STZ)腹腔注射的方法建立SD糖尿病大鼠模型,造模成功后将大鼠按照血糖及体质量随机分为模型组、二甲双胍组(200 mg/kg体质量)及榅桲叶总黄酮高(160mg/kg体质量)、中(80mg/kg体质量)、低(40mg/kg体质量)剂量组,并取同批正常大鼠作为空白组。灌胃给药5w后,观察榅桲叶总黄酮对糖尿病模型大鼠空腹血糖(FBG)、糖化血清蛋白(GSP)、血清胰岛素(Ins)的影响,计算肝脏指数,测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平,并且用全自动生化分析仪检测大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C),观察肝脏的组织病理学改变。结果(1)榅桲叶总黄酮高剂量组肝脏指数(P<0.01)和肝脏体积明显降低;(2)与模型组比较,榅桲叶总黄酮中、高剂量组血清TC、TG、LDL-C的含量均显著降低(P<0.01),ALT与AST的活性均明显降低(P<0.05);(3)榅桲叶总黄酮中、高剂量组空腹胰岛素(FBG)水平均显著降低(P<0.05),总黄酮高剂量组血清胰岛素(Ins)水平(P<0.01)和糖化血清蛋白(GSP)的含量均明显降低(P<0.05)。结论榅桲叶总黄酮在降血糖及调血脂方面具有一定的作用,并能够改善糖尿病大鼠的肝功能。

维药“比也”中总黄酮及微量元素含量的分析

用紫外可见分光光度法测定维药"比也"(榅桲)中的总黄酮含量,并用火焰原子吸收光谱法测定了K,Na,Ca,Fe,Cu,Co,Zn,Mn,Mg等9种元素含量。测定结果表明:"比也"(榅桲)中总黄酮量为3.87%,平均回收率为97.1%,RSD值为2.6%,并含有丰富的人体必需的微量元素,其中Na,K,Ca,Mg的含量更显著。微量元素测定方法的回收率在95.2%—104.1%之间,RSD值在0.42%—2.2%之间。通过本实验为榅桲的进一步研究和综合开发利用提供了新的科学依据。

新疆榅桲中总生物碱的测定

以溴酚蓝作为测试用酸性染料,在总生物碱与其生成稳等络合物时间范围内,利用色法测定了榅桲中总生物碱的含量,首次测得榅桲中生物碱的含量1.4%左右。并认为此法快速简便,准确度好。

盐胁迫对榅桲种子萌发率、成苗率和酶活性的影响

以新疆苹果型榅桲成熟种子为试材,探讨了Na2SO4和NaCl两种盐胁迫对榅桲种子萌芽率、成苗率、SOD、POD、CAT酶活性的影响,结果显示:随着两种盐浓度的增大,发芽率和成苗率均呈下降趋势;NaCl胁迫时,SOD、CAT活性均随着盐浓度的增大呈先上升后下降趋势,POD活性呈上升趋势;Na2SO4胁迫时,随着盐浓度的增大,POD、CAT活性呈先上升后下降趋势,SOD活性呈降低趋势。不同种类盐胁迫下,榅桲种子的耐盐机制不同。