蛴螬提取物诱导人肺癌A549细胞凋亡的机制研究

目的:观察蛴螬提取物对人肺癌A549细胞增殖的影响及其机制。方法:采用MTT法检测蛴螬提取物对人肺癌A549细胞的生长抑制率;用HE染色方法观测凋亡细胞的形态学变化;运用免疫组织化学SP法检测用药前后细胞周期蛋白D1(CyclinD1)的表达改变。结果:用蛴螬提取物处理的人肺癌A549细胞生长抑制率明显高于对照组;施药早期细胞出现凋亡形态学变化;A549细胞经蛴螬提取物处理后CyclinD1表达均下降。结论:蛴螬提取物在体外对人肺癌A549细胞株有显著的增殖抑制作用,其机制与下调CyclinD1的表达有关。

细胞周期调控因子在分化型甲状腺癌中的表达及相关性研究

目的:研究细胞周期调控因子p16、p27和CyclinD1在分化型甲状腺癌中的蛋白表达情况,及其在分化型甲状腺癌发生发展中的作用。方法:应用免疫组化S-P法对40例分化型甲状腺癌包括甲状腺乳头状癌和滤泡癌以及30例甲状腺腺瘤组织中p16、p27和CyclinD1的蛋白表达情况进行检测。结果:p16、p27和Cy-clinD1三种蛋白在40例分化型甲状腺癌的阳性表达率分别为57.5%、70.0%和62.5%;p16蛋白的阳性表达量与分化型甲状腺癌的颈淋巴结转移之间具有相关性(P<0.05);p27蛋白的阳性表达量与分化型甲状腺癌的颈淋巴结转移和原发灶的大小及包膜侵犯之间具有相关性(P<0.05);CyclinD1蛋白的阳性表达量与分化型甲状腺癌的颈淋巴结转移和原发灶的包膜侵犯之间具有相关性(P<0.05);p16的阳性表达与CyclinD1的阳性表达之间具有相关性(P<0.05),且呈负相关关系(rs=-0.283);p27的阳性表达与CyclinD1的阳性表达之间具有相关性(P<0.05),且呈负相关关系(rs=-0.279)。结论:p16、p27和CyclinD1三种蛋白的异常表达共同参与了分化型甲状腺癌的发生发展,可能成为判断分化型甲状腺癌恶性程度、转移及预后的指标。

应用组织芯片技术观察HPV16/18相关外阴尖锐湿疣DNA倍体类型及cyclinD1、P53、P21^(WAF1)蛋白的表达

目的 : 探讨HPV16 18阳性的尖锐湿疣DNA倍体和cyclinD1、P5 3、P2 1WAF1 蛋白表达的改变。方法 : 使用组织芯片技术和DNA计算机图像分析方法观察 2 2 7例外阴尖锐湿疣和 2 1例外阴鳞状细胞癌的DNA倍体类型 ,并进行cyclinD1、P5 3、P2 1WAF1 免疫组化研究。结果 : HPV 16 18阳性外阴尖锐湿疣 2C细胞占 (4 4 .36± 6 .6 6 ) % ,3C～ 4C占 (37.72± 8.4 3) % ,5C占 (15 .2 1± 6 .33) % ,>5C占 (2 .71± 1.0 4 ) %。 98例HPV16 18阳性尖锐湿疣中 ,cyclinD1、P5 3、P2 1WAF1 阳性者分别为 39例 (39.80 % )、5 2例 (5 3.0 6 % )、4 7例(4 7.96 % )。HPV 16 18阳性外阴尖锐湿疣与阴性者差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论 : HPV16 18阳性外阴尖锐湿疣DNA倍体图像分析显示高度增殖活性 ,cyclinD1、P5 3高表达 ,P2 1WAF1

P27 Cyclin D_1在胆囊癌中的表达及意义

目的研究p2 7、CyelinDl 在胆囊癌中的表达情况 ,并探讨它们与肿瘤分化程度及生物学行为的关系。方法应用免疫组织化学S -P法检测 10例胆囊炎及 32例胆囊癌标本p2 7及CyelinDl的表达状况。结果p2 7在胆囊炎上皮中为低表达 ,在胆囊癌中少部分表现出高表达。而CyelinDl 在胆囊炎上皮中低表达 ,而在胆囊癌中大部分呈现高表达 ,两者间差异显著 (P <0 .0 5 )。结论CyclinDl在胆囊癌的发生发展中有重要作用 ,且与患者预后有关。

肝癌细胞H22培养上清液对鼠细胞L929细胞周期、CyclinD1、P27蛋白表达的影响

目的:探讨小鼠肝癌细胞H22培养上清液对鼠L929细胞细胞周期、CyclinD1、P27蛋白表达的影响。方法:采用肝癌细胞H22的培养上清液诱导正常成纤维细胞L929,诱导细胞为L929-H22。采用流式细胞术检测L929细胞与L929-H22细胞细胞周期分布,免疫细胞化学方法检测2种细胞中CyclinD1、P27蛋白的表达。结果:与L929相比,L929-H22G0/G1期细胞比例明显减少,S期细胞比例明显增加(P<0.05),增殖指数PI明显升高(P<0.05);CyclinD1的表达增强(P<0.05),P27的表达减弱(P<0.05)。结论:小鼠肝癌细胞培养上清液诱导的细胞CyclinDl、P27的表达及细胞周期分布与正常细胞不同,CyclinDl表达增强和P27表达减弱可能在细胞恶性转化过程中发挥作用。

Cyclin D_1和p53基因与结肠癌相关性研究

目的:探讨癌基因Cyclin D1、抑癌基因p53与结肠癌发展的生物学行为的关系。方法:采用免疫组化LSAB法测定80例结肠癌、50例结肠黏膜不典型增生组织和80例结肠正常黏膜组织。结果:Cyclin D1在正常结肠组织中无表达,在结肠不典型增生组织阳性率为20%,在结肠癌组织中为40.16%。p53在正常结肠组织中的阳性率为96.25%,结肠不典型增生组织为92%,在结肠癌组织中为47.54%(P<0.05)。Cy-clin D1与p53呈负相关(P<0.05)。结论:Cyclin D1的高表达、p53的低表达在结肠癌的发展中起着重要作用,并有可能成为研究结肠癌发展的有用指标。

原位套细胞淋巴瘤:一种意外发现的具有惰性临床过程的病变

CyelinD1阳性的B细胞可偶尔出现于反应性淋巴滤泡的套区，此时称为“原位套细胞淋巴瘤”。目前该病变的临床意义还不清楚。本文对23例初诊为“原位套细胞淋巴瘤”的病例进行临床和病理学特征分析，其中也包括SOX11的表达情况。结果发现17／23例符合原位套细胞淋巴瘤的诊断标准，大部分病例是在反应性淋巴结中偶然被发现。

CyclinD1和p27蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达

目的探讨膀胱移行细胞癌中cyclinD1和p27蛋白的表达及其意义。方法采用免疫组化技术检测48例膀胱癌组织中cyclinD1与p27蛋白的表达。结果cyclinD1及p27表达在膀胱移行细胞癌和正常组织之间各有统计学差异,cyclinD1和p27与膀胱肿瘤分期、分级相关。cyclinD1与p27蛋白呈反方向表达。结论cyclinD1与p27有助于评估膀胱移行细胞癌的生物学行动。

p16、p21^(WAF1/CIP1)、CyclinD1表达与乳腺癌病理特征

目的 探讨乳腺癌组织分型、分级等临床病理特征和ER、PR与p16、p2 1WAF1/CIP1和CyclinD1蛋白表达的关系。方法 进行免疫组化染色法检测 5 0例术前均未作放化疗的乳腺癌组织中p16、p2 1WAF/CIP1和CyclinD1蛋白的表达。结果 p16蛋白表达阳性率为 5 8 0 % (2 9/ 5 0 ) ,在浸润性导管癌Ⅱ级与Ⅲ级之间p16蛋白表达有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,阳性率分别为 75 0 %、41 7%。p16、p2 1CyclinD1蛋白表达 ,p2 1蛋白表达阳性率为 30 0 % (15 / 5 0 ) ,p2 1表达阳性者与阴性者相比 ,淋巴结转移率有显著性差异 (P <0 0 5 )。CyclinD1蛋白表达阳性率为 32 0 % (16 / 5 0 )。与临床病理特征、ER和PR未见相关 (P >0 0 5 )。结论 p16和p2 1蛋白可作为判断肿瘤生物学行为的参数。

幽门螺旋杆菌感染与胃癌组织中p27、CyclinD1、MIF蛋白表达的相关性分析

目的探讨幽门螺旋杆菌(Hp)感染与胃癌组织中细胞周期调节因子p27、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)蛋白表达的相关性。方法收集2012年3月至2017年3月经胃镜与病理检查明确诊断的胃癌标本60例,根据是否发生Hp感染分为Hp阳性组、Hp阴性组各30例,另以正常胃黏膜组织20例为正常黏膜组,采用免疫组织化学法检测三组p27、CyclinD1、MIF蛋白表达水平,并分析其与胃癌患者临床病理特征及与Hp感染的相关性。结果 Hp阳性组p27阳性率低于Hp阴性组和正常黏膜组,CyclinD1、MIF蛋白表达水平高于阴性组和正常黏膜组(P<0.05),Hp阴性组与正常黏膜组上述指标差异也有统计学意义(P<0.05);p27、CyclinD1、MIF表达水平与临床分期、肿瘤浸润深度、肿瘤分化程度有关(P<0.05);胃癌患者Hp感染与p27表达水平呈负相关,与CyclinD1、MIF表达水平呈正相关,且p27与CyclinD1、MIF水平呈负相关性(P<0.05)。结论幽门螺旋杆菌感染与胃癌组织中p27、CyclinD1、MIF蛋白表达水平存在一定相关性,p27、CyclinD1、MIF可能参与胃癌发生发展。

细胞增殖相关基因p16,PCNA和CyclinD1在尖锐湿疣中的表达

目的探讨细胞增殖相关基因p16,PCNA和CyclinD1在尖锐湿疣中的表达及意义。方法分别采用免疫组织化学和RT-PCR法检测30例尖锐湿疣、寻常疣、跖疣中细胞增殖基因p16,PCNA和CyclinD1的表达情况,并与30例正常包皮组织进行对照。结果 p16蛋白在尖锐湿疣、寻常疣、跖疣和正常对照中的阳性表达率分别为:26.67%,16.67%,6.67%和0;p16 mRNA的阳性表达率分别为:23.33%,16.67%,6.67%和0。疣皮损p16蛋白表达评分和mRNA光密度高于正常对照,差异有统计学意义(P<0.05)。PCNA蛋白在各组的阳性表达率分别为:93.33%,86.67%,76.67%和70.00%;PCNA mRNA的阳性表达率分别为:90.00%,76.67%,70.00%和70.00%。疣皮损PCNA蛋白表达评分和mRNA光密度高于正常对照,差异有统计学意义(P<0.05)。CyclinD1蛋白和mRNA在各型疣和正常对照阳性表达率均为0。结论 p16和PCNA基因在尖锐湿疣、寻常疣和跖疣的发生发展中起一定作用,尤其是对尖锐湿疣的促增殖作用显著。

乳腺浸润癌组织中骨桥蛋白、环氧化酶-2和细胞周期素D1的表达及其意义

目的探讨骨桥蛋白（OPN）、环氧化酶-2（cox-2）和细胞周期素D1（CyclinD1）在乳腺浸润癌中的表达及其与临床病理特征的关系。方法：采用免疫组化法检测70例乳腺浸润癌标本中三者的表达情况，并分析三者问的关系及其与临床病理特征的关系。结果：≤45岁和〉45岁患者OPN阳性表达率分别为78．8％和73．0％：肿块直径≤3 cm和〉3 cm者阳性表达率分别为79.3％和73．2％；I、Ⅱ、Ⅲ级浸润癌者阳性表达率分别为77．8％、73．8％和78．9％，组间差异均无统计学意义（P〉0．05）。在无、有淋巴结转移组中OPN阳性率分别为62．5％和93.3％：在I～Ⅱ、Ⅲ～Ⅳ期浸润癌中OPN的阳性表达率分别为68．O％和95．O％，差异均有统计学意义（P〈0．05）；OPN与ER、PR负相关，与CerbB2、COX-2、CyclinD1表达正相关。结论：OPN在乳腺癌的侵袭、转移过程中起重要作用．COX-2、CyclinD1可能为其协同分子。

MCM2、Ki67、CyclinD1在甲状腺滤泡性癌和滤泡性腺瘤组织中的表达及与Galectin-3、CK19的对比研究

目的探讨MCM2、Ki67、CyclinD1在甲状腺滤泡性癌和甲状腺滤泡性腺瘤组织中表达的意义,并与Galectin-3、CK19进行对比。方法应用免疫组织化学EnVision法检测32例甲状腺滤泡性癌及23例甲状腺滤泡性腺瘤组织中MCM2、Ki67、CyclinD1、Galectin-3和CK19的表达情况。结果 MCM2、Ki67、CyclinD1的阳性率在甲状腺滤泡性癌组织中分别为96.9%、46.9%、96.9%,在甲状腺滤泡性腺瘤中分别为65.2%、26.1%、100.0%,两者MCM2的阳性率比较差异有统计学意义(χ2=9.799,P=0.002),而两者Ki67和CyclinD1的阳性率比较差异无统计学意义(χ2=2.450、0.732,P=0.118、0.392)。在滤泡性癌和滤泡性腺瘤组织中,MCM2、ki67、CyclinD1者的标志指数分别为(31.51±19.43)和(11.12±10.79)、(6.58±6.40)和(4.03±5.14)、(50.00±21.70)和(40.33±22.55),MCM2的标志指数比较差异有统计学意义(t=10.522,P<0.001),Ki67和CyclinD1的标志指数比较差异无统计学意义(t=1.589、1.634,P=0.122、0.115)。Galectin-3和CK19的阳性率在滤泡性癌组织中分别为62.5%和75.0%,在滤泡性腺瘤组织中分别为26.1%和60.9%,Galectin-3的阳性率比较差异有统计学意义(χ2=7.118,P=0.008),CK19的阳性率比较差异无统计学意义(χ2=1.251,P=0.263)。结论 MCM2、Galectin-3在甲状腺滤泡性癌与滤泡性腺瘤组织中的表达有明显差异,对两者的诊断和鉴别诊断有价值,而Ki67、CyclinD1、CK19则无价值。

越鞠丸加味对反流性食管炎大鼠食管黏膜PCNA、p53、CyclinD1表达的影响

目的:观察越鞠丸加味对反流性食管炎大鼠食管黏膜PCNA、p53和CyclinD1表达的影响。方法:采用"不全幽门结扎+贲门肌切开术"法建立大鼠反流性食管炎模型。50只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、越鞠丸加味组、奥美拉唑组,每组10只。各药物组连续给药3周后。HE染色观察大鼠食管黏膜病理学改变;免疫组化法检测PCNA、p53、CyclinD1的表达。结果:从大体上和病理上观察模型组大鼠RE评分与正常组组比较有明显差异(P<0.01);两药物组评分较模型组明显降低(P<0.01)。模型组大鼠食管黏膜PCNA、p53、CyclinD1表达较正常组、假手术组显著增高(P<0.01);越鞠丸加味组和奥美拉唑组大鼠食管黏膜PCNA、p53、CyclinD1表达较模型组显著降低(P<0.01);越鞠丸加味治疗组PCNA、CyclinD1表达低于奥美拉唑组,p53表达两组之间差异无显著性。结论:越鞠丸加味能明显改善反流性食管炎大鼠食管黏膜的病理学改变,减轻食管炎症,降低RE大鼠食管黏膜PCNA、p53、CyclinD1的表达可能是其治疗RE的作用机理之一。

人喉鳞癌组织中HPV16E7、CyclinD1和Rb蛋白的表达

目的:探讨喉鳞癌组织中人乳头瘤病毒(HPV)16型E7、CyclinD1和Rb蛋白表达的变化。方法:采用免疫组织化学SABC法检测80例喉鳞癌、30例声带息肉组织中HPV16E7、CyclinD1和Rb蛋白的表达状况。结果:声带息肉组织中HPV16E7未见表达,喉鳞癌组织中的表达率为34/80(P<0.0001);声带息肉与喉鳞癌组织中Cy-clinD1的表达率分别为2/30和42/80(P<0.0001),Rb的表达率分别为25/30和42/80(P<0.05)。HPV16E7与CyclinD1的表达与临床分期、淋巴结转移情况和5a生存率有关(P<0.05或0.01)。喉鳞癌组织中HPV16E7与Rb的表达相关(P<0.01)。结论:HPV16感染和Rb、CyclinD1的异常表达与喉鳞癌发生、发展有关。HPV16E7与CyclinD1可作为判定喉鳞癌预后的指标。

CyclinD1基因扩增及其蛋白表达在大肠癌中的意义

目的探讨大肠癌中CyclinD1基因扩增和其蛋白表达的相关性及其临床意义。方法应用差异聚合酶链反应(DPCR)和免疫组化技术检测分析70例大肠癌、距癌灶3cm以外的癌旁组织及距癌灶10cm以外的正常组织中CyclinD1基因扩增和CyclinD1蛋白的表达情况。结果70例大肠癌中CyclinD1基因扩增占31.4%(22/70),CyclinD1蛋白过度表达占51.4%(36/70),二者成正相关(P<0.01,r=0.473),而癌旁及正常组织中CyclinD1基因扩增及其蛋白表达分别为2.9%(2/70)、4.3%(3/70)和0.0%(0/70)、0.0%(0/70)。与大肠癌相比差异有显著性(P<0.01)。Cy-clinD1基因扩增及其蛋白表达在大肠癌中不同组织学类型、淋巴结有无转移及Dukes不同分期差异有显著性(P<0.05)。结论大肠癌中CyclinD1基因扩增及其蛋白表达虽有一定相关性,但并不完全一致,说明还存在着其它导致CyclinD1蛋白过度表达的机理,CyclinD1基因扩增及其蛋白过度表达在大肠癌的恶性进展中起重要作用,可作为判定大肠癌恶性度的重要参数之一。

山茱萸多糖抗HDF衰老与cyclinD1表达的关系

目的:探讨山茱萸多糖对抗HDF细胞衰老作用及对细胞周期蛋白的作用。方法:体外培养HDF细胞,实验组从40代开始加多糖含药血清。在培养至43代、47代和50代采用MTT法检测细胞活力,RT-PCR法检测cyclinD1的mRNA表达,并与30代时进行比较。结果:衰老组细胞活力下降,cyclinD1 mRNA表达升高;山茱萸多糖血清可提高细胞活力,降低HDF细胞cyclinD1 mRNA含量表达。结论:山茱萸多糖可能通过改变细胞周期调控因子的表达而发挥其抗HDF细胞衰老作用。

钒化钠抑制人胃癌SGC7901细胞增殖的作用机理

目的通过观察钒化钠对人胃癌SGC7901细胞周期蛋白cyclinD1表达的影响,探讨其对人胃癌SGC7901细胞增殖抑制的作用机理。方法应用MTT法测定钒化钠对人胃癌SGC7901细胞的生长抑制作用;用Western-blot法检测钒化钠对人胃癌SGC7901细胞周期蛋白cyclinD1表达水平的变化。结果一定浓度的钒化钠使人胃癌SGC7901细胞增殖周期密切相关的cyclinD1蛋白表达降低。结论一定浓度的钒化钠能明显抑制人胃癌SGC7901细胞的生长,钒化钠的抗肿瘤机制可能与cyclinD1蛋白表达降低有关。

宫颈腺癌组织中细胞周期素D1和P27蛋白的表达

目的:检测人宫颈腺癌组织中细胞周期素D1(CyclinD1)和P27蛋白的表达。方法:采用免疫组织化学SP法检测56例宫颈腺癌组织、30例宫颈腺上皮内肿瘤(CGIN)和24例正常宫颈腺上皮组织中CyclinD1和P27蛋白的表达;分析其与宫颈腺癌组织学分级、临床分期和淋巴结转移的关系。结果:宫颈腺癌、CGIN和正常宫颈腺上皮组织中CyclinD1的阳性表达率分别为62.50%、26.67%和0,3组间相比差异有统计学意义(P<0.05)。上述3种组织中P27的阳性表达率分别为30.36%、53.33%和91.67%,3组间相比差异有统计学意义(P<0.05)。宫颈腺癌组织中CyclinD1与P27的异常表达与组织学分级、临床分期和淋巴结转移有关(P均<0.05)。宫颈腺癌组织中CyclinD1与P27的表达呈负相关(rs=-0.451,P<0.05)。结论:CyclinD1的高表达和P27的低表达与宫颈腺癌的发生、发展密切相关。