药用金荞麦“3414”施肥效应研究

目的:研究重庆渝西紫色土N、P、K不同施用量和不同组合方式对金荞麦根茎产量的影响,探索该类型土壤下的施肥优化方案。方法:采用"3414"施肥设计方案设计实验,在Excel 2003、SPSS 13.0、Matlab 7.0和Word2003下对数据处理,根据双聚原矢车菊苷元含量评定其品质。结果:不同施肥组合,肥料的有效转化率有差异,其中有效转化率最高组合为N3P2K2,为97.09%,最低组合为N0P2K2,为4.32%;除空白组外,N0P2K2组产量最低为186 kg/667 m2,N2水平15 kg/667 m2,另外两种肥料组合在高、中、低三个水平上差异不大;一元、二元、三元函数拟合效果都较为理想,其中R2值排前三的函数是N、K效应函数、N效应函数和N、P、K三效应函数;不施肥组双聚原矢车菊苷元含量最高为8.67%,高N、高K组其含量降低,但所有的含量均高于7.14%。结论:不同施肥组合,对单一肥料的转化率有一定影响;该类土壤N肥施用量是决定其产量的关键肥料,故应偏重于氮肥施用;可以采用N、K效应函数、N效应函数和N、P、K三效应函数任意一种作为指导该类型土壤的施肥依据;施肥后各组药效成分含量虽然有差异,但不降低金荞麦品质。

金荞麦的离体快繁及同源四倍体的诱导

该试验结果表明 :金荞麦的快繁技术最适宜的培养基为MS附加 2mg/LBA ,0 .2mg/LIBA ;同时 ,结合组织培养技术进行的多倍体诱导试验结果表明 :在组织培养条件下 ,将其带绿色芽点的愈伤组织和无菌苗浸泡在不同浓度的秋水仙素溶液中或接种于添加一定浓度秋水仙素的培养基上处理一定时间后再进行培养 ,均可诱导金荞麦多倍体的产生 ,但以浸泡愈伤组织的效果较好 ,最高的诱导率可达 43.3%。通过试管苗茎尖染色体显微观察 ,鉴定出同源四倍体 。

金荞麦Fr4对小鼠lewis肺癌细胞MMP-9、TIMP-1蛋白表达的影响

目的探讨金荞麦提取物Fr4对小鼠lewis肺癌组织基质金属蛋白酶9(matrixmetalloproteinase,MMP9)、金属蛋白酶组织抑制因子1(tissueinhibitorsofmetallproteinase,TIMP1)蛋白表达的影响。方法利用C57/BL6小鼠移植性肿瘤lewis肺癌模型,观察金荞麦Fr4对小鼠lewis肺癌生长的影响;利用免疫组织化学SP法研究金荞麦Fr4对lewis肺癌中MMP9、TIMP1表达的影响。结果金荞麦Fr4在400mg/kg剂量时可明显抑制C57/BL6小鼠lewis肺癌生长;金荞麦Fr4可下调MMP9的表达,但不影响TIMP1的活性。结论金荞麦提取物Fr4具有明显的抗肿瘤作用,分子机制可能与下调MMP9的表达有关。

金荞麦高聚原花青素的氢化降解反应

以金荞麦提取高聚原花青素为原料,通过氢化降解的方法将高聚原花青素变为低聚原花青素,研究温度、压力、催化剂、时间对于氢化降解转化率的影响。结果表明:在反应温度为120℃,反应压力为3MPa,Pd/C催化剂用量为0.3g/150mL,反应时间为3.5h时,降解效果为最佳,平均聚合度由6.3降为2.2。并且经过HPLC分析确定,得到降解效果。

金荞麦对克雷伯杆菌肺炎大鼠肺组织损伤的保护作用及其机制

目的:研究金荞麦对克雷伯杆菌肺炎大鼠肺组织损伤的保护作用及其机制。方法:复制克雷伯杆菌肺炎大鼠模型。随机将雄性SD大鼠分成正常对照组、模型组、金荞麦(生药6、3、1.5 g/kg)组、左氧氟沙星(25 mg/kg)组。观察肺组织的病理改变,测大鼠血清中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、ICAM-1及INF-γ含量,采用免疫组化测肺组织中TNF-α、ICAM-1及NF-κB p65蛋白表达和原位杂交法测肺组织巨噬细胞炎症蛋白-2(MIP-2)mRNA表达。结果:模型组大鼠的肺脏组织损伤明显,血清中IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、ICAM-1及INF-γ含量升高,模型组大鼠肺组织中TNF-α、ICAM-1、NF-κB p65的蛋白表达和MIP-2mRNA的表达均较对照组显著增强(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,金荞麦组和左氧氟沙星组大鼠肺组织损伤明显改善,血清中IL-6、IL-8、CAM-1及IFN-γ含量显著降低(P<0.05或P<0.01),肺组织中TNF-α、ICAM-1、NF-κB p65蛋白表达和MIP-2 mRNA的表达显著减弱(P<0.05或P<0.01)。结论:TNF-α、ICAM-1、NF-κB p65及MIP-2的表达上调参与了肺炎大鼠肺脏组织的损伤,金荞麦通过下调其表达来保护肺炎大鼠肺组织的损伤作用。

金荞麦叶黄酮含量测定方法比较研究

采用超声波辅助提取金荞麦[Fagopyrum cymosum(Trev.)Meisn]叶中总黄酮,并比较了国内外3种常用比色法的测定结果。结果表明,AlCl3-KAC显色法稳定性好,操作简便,适用于金荞麦叶中的总黄酮含量测定。

药用保护植物金荞麦的生态位研究

根据生境的不同,测定了重庆东部金荞麦及其群落的16个优势种中每一物种的多度、盖度和高度.利用重要值对金荞麦群落优势种生态位宽度和生态位重叠值进行研究.结果表明:①金荞麦的生态位宽度变化较大,趋向于泛化种;②金荞麦与其它优势种的重叠值也较高,表明它们对生境有很相近的资源需求;③金荞麦与其它物种种群可以和谐共存,维持较高的物种多样性.

牧草新品系黔金荞麦1号的选育

为了充分挖掘和开发利用贵州本土野生牧草金荞麦,研究从2004—2011年通过收集野生金荞麦资源并采用单株混合选择法进行栽培驯化、品比试验、区域试验和生产试验,培育出牧草新品系黔金荞麦1号。结果表明：黔金荞麦1号全年生育期为180-200 d、在海拔800-1 800 m地区和15-30℃温度下均能生长。该草产量高、饲用价值高,抗病虫害性能强,适口性好,在贵州大部分地区适宜生长,为优质的饲草资源。

FR/MA抑制PG-HUVEC细胞黏附及黏附分子表达的研究

目的:观察金荞麦抗肿瘤提取物(FR)、苦参抗肿瘤提取物(MA)对肺癌PG细胞-血管内皮(HU-VEC)黏附作用的影响,并探讨其抗肿瘤转移机制。方法:运用MTT检测FR/MA单药及联合用药对高转移肺癌PG细胞增殖的作用,以荧光标记PG-HUVEC黏附模型考察FR/MA单药及联合用药抗肿瘤细胞的黏附能力,用Western blotting、流式细胞仪检测FR/MA单药及联合用药对黏附分子表达的影响。结果:FR/MA单药及联合用药均剂量依赖性抑制PG细胞增殖(P<0.05);在一定浓度范围内,FR/MA单药及联合用药显著抑制PG-HU-VEC相互黏附能力并有剂量依赖性(P<0.01);FR/MA联合用药显著抑制黏附分子CD44、CD49、ICAM-1及E-selectin的表达(P<0.01)。结论:FR/MA具有抗PG-HUVEC相互黏附作用;降低细胞表面黏附分子的表达,抑制肿瘤细胞在血管壁着床可能是其抗肿瘤转移的作用机制之一。

野生资源植物金荞麦化学成分及活性物质研究综述

野生资源植物金荞麦某些活性物质具有明显的抗菌和抗肿瘤作用。该文对金荞麦的化学成分、抗菌活性物质、抗肿瘤活性物质和活性物质提取分离工艺的研究现状进行了详细综述,并在此基础上对今后的研究方向提出了建议,为金荞麦药效物质的有效开发提供一定思路,也有利于将地方野生资源优势持续、有效地转变为经济优势。

FR/MA对HepG2肝癌细胞侵袭能力的影响

目的探讨金荞麦抗肿瘤提取物(FR)、苦参抗肿瘤提取物(MA)对肝癌细胞HepG2侵袭能力的影响及其可能作用机制。方法MTT法检测FR/MA单药及联合用药对HepG2细胞增殖的影响;Transwell侵袭小室测定法检测经FR/MA单药及联合用药处理过的细胞其侵袭能力的改变;RT-PCR分析侵袭转移相关基因nm23-H1、Tiam-1表达的变化。结果FR/MA单药及联合用药均能明显抑制HepG2的增殖,明显降低细胞侵袭能力。同时细胞内nm23-H1基因mRNA水平有不同程度的升高,而Tiam-1基因mRNA水平有不同程度的降低。结论FR和MA能够抑制HepG2侵袭,可能通过上调nm23-H1基因和下调Tiam-1基因的表达而发挥抗肿瘤侵袭作用。

金荞麦根体外培养人肿瘤细胞的抗癌研究

利用直接杀伤细胞法，集落培养抑制法及ＤＮＡ前体物质参入法研究金荞麦根对体外培养的多种人癌细胞的抗癌作用。结果：此药在１ｇ·Ｌ－１时对多种人癌细胞的杀伤率均超过一个对数杀灭，浓度降低至０．１２５ｇ·Ｌ－１的杀伤率仍接近一个对数杀灭达７４．３％～９２．ｌ％。金荞麦根中的提取物具有明显抗癌作用，其浓度为０．１，０．０５ｇ·Ｌ－１对多种癌细胞的集落抑制率达１００％，浓度为０．０１２５ｇ·Ｌ－１时抑制率达７５．ｌ％～８９．２％。再用３Ｈ－ＴｄＲ标记法观察发现：金Ｅ能明显抑制癌细胞内的核酸代谢，其抑制作用与同浓度的阳性对照氟尿嘧啶近似。

药用保护植物金荞麦的生态位研究

根据生境的不同，测定了重庆东部金荞麦群落的16个优势种中每一物种的多度，盖度和高度。利用重要值来对金荞麦群落优势种生态位宽度和生态位重叠值进行研究。结果表明：1、金荞麦的生态住宽度变化较大，趋向于泛化种；2、其生态位宽度的变化随坡度的降低而升高；3、金荞麦与其它优势种的重叠值也较高，表明它们对生境有很相近的资源需求；4、金荞麦与其它物种种群可以和谐共存，维持较高的物种多样性和相对多样性。

黔金荞麦1号对贵州省地方猪的饲用价值评估

试验研究黔金荞麦1号对贵州地方猪的饲用价值,选取36头40 kg左右试验猪随机平均分为4组、每组3个重复,每个重复3头。对照组饲喂全价配合饲料,3个试验组饲粮分别含10%、15%和20%经粉碎的新鲜金荞麦植株,各重复间等量饲喂,试验期90 d。结果显示,与对照组相比,10%金荞麦添加组增重下降但差异不显著(P>0.05),15%和20%组增重显著下降(P<0.05),3个试验组基于全价饲料的料肉比均显著降低(P<0.05)、平均日增重呈下降趋势但差异不显著(P>0.05)。3个试验组血清尿素氮水平均显著提高(P<0.05)、血清总蛋白提高但差异不显著(P>0.05)。3个试验组血清谷胱甘肽过氧化物酶显著提高(P<0.05)、血清超氧化物歧化酶和总抗氧化能力上升,但差异均不显著(P>0.05),15%和20%组血清过氧化氢酶水平显著提高(P<0.05)。结果表明,适量添加黔金荞麦1号对猪日均增重影响不显著,但可显著降低全价饲料料肉比,并提高蛋白利用率和血清抗氧化能力,部分替代全价饲料具有一定经济意义。

金荞麦中表儿茶素提取工艺的研究

以表儿茶素为考察指标，以正交实验设计法为依据，重点考察提取溶剂乙醇的浓度、提取次数和提取时间3个因素，每个因素3个水平，按L9（34）正交表设计实验，采用高效液相法测定其含量。实验证明，最佳提取工艺条件为45％的乙醇回流提取3次，每次1h。本优选工艺稳定可行，提取率高，重现性好。

金荞麦的致突变和抗突变研究

本文用Ames法对金荞麦的致突变和抗突变性进行了研究。结果表明:金荞麦在0.001mg/皿—5mg/皿7个剂量未发现阳性突变反应,并对正定霉素和甲基甲烷磺酸酯所诱发TA98和TA100菌株的突变,具有抗突变的作用。

ISSR分子标记对金荞麦8个野生居群的遗传多样性分析

目的对野生金荞麦进行遗传多样性研究。方法通过ISSR技术对8个野生金荞麦居群的共92个个体进行遗传多样性分析。结果用12个随机引物共扩增出103条清晰条带,其中90条具多态性,平均多态性位点比率为87.38%,Nei′s基因多样性指数H=0.374 7,Shannon多样性指数I=0.572 8,遗传分化指数Gst=0.171 8。遗传距离和遗传一致度分别为：0.043 1~0.384 9和0.684 3~0.954 5。结论金荞麦种内具有较高的遗传多样性,遗传变异主要存在于居群内部,遗传多样性与地理关系表现出明显的相关性。ISSR可以作为研究遗传多样性及遗传分化的有效标记。

金荞麦提取物改善肠易激综合征大鼠内脏痛觉过敏的效果及其机制

目的观察金荞麦提取物(Fag)对肠易激综合征(IBS)大鼠内脏痛觉过敏的影响及其机制。方法采用腹壁撤退反射(AWR)评分观察Fag(6、24 g·kg-1)口服给药两周后的IBS大鼠模型的内脏痛觉过敏的变化,并用免疫荧光法观察腰骶段脊髓背根神经(DRG)的辣椒素受体亚型TRPV1表达水平;采用细胞膜片钳记录Fag(0.1、0.3、1、3 g·L-1)对辣椒素(CAP)激活大鼠的DRG细胞TRPV1电流(ITRPV1)的影响。结果 Fag 24 g·kg-1在体内可显著降低升高的IBS大鼠AWR评分,IBS大鼠腰骶段DRG的TRPV1表达增高;Fag 6、24 g·kg-1干预后DRG的TRPV1表达下降;体外0.1、0.3、1、3 g·L-1Fag可浓度依赖地抑制CAP激活的分离DRG神经元ITRPV1,IC50为0.83 g·L-1。结论 Fag可通过下调IBS大鼠TRPV1受体表达改善大鼠痛觉过敏,可抑制DRG神经元ITRPV1峰值,调节痛觉信号传递。

金荞麦提取物对D-IBS大鼠排便功能及离体结肠的作用和机制

目的探讨金荞麦醇提取物(FAE)干预腹泻型肠易激综合征(D-IBS)模型大鼠及离体结肠肠管运动功能作用及机制。方法用新生期乳大鼠母源性分离(NMS)联合醋酸(AA)灌肠法制作D-IBS模型,动物随机分为干预前对照组(10只,不灌胃)、对照盐水组(8只,生理盐水灌胃)、干预前模型组(10只,不灌胃)、模型盐水组(8只,生理盐水灌胃)、FAE 6 g/kg组(8只,FAE灌胃)、FAE 24 g/kg组(8只,FAE灌胃),匹维溴铵组(8只,0.02 g/kg灌胃),灌胃每天1次,共2周。用腹壁撤退反射(AWR)评估结肠高敏感性变化,用Bristol大便性状评分评估大鼠粪便稀便级并计算其粪便湿重。同时体外观察了不同浓度FAE和匹维溴铵(0.02μg/m L)对大鼠离体结肠自发收缩、乙酰胆碱(Ach)引发的痉挛性收缩以及对肠内Ca2+通道的作用。结果与干预前对照组比较,干预前模型组痛觉压力阈值及最大耐受压力值明显降低(P<0.05),粪便稀便级及粪便湿重明显增高(P<0.01);与对照盐水组比较,模型盐水组痛觉压力阈值及最大耐受压力值明显降低(P<0.05),粪便稀便级及粪便湿重明显增高(P<0.01);与模型盐水组比较,FAE24 g/kg组及匹维溴铵组痛觉压力阈值均明显升高(P<0.05)。FAE6 g/kg组粪便湿重、FAE24 g/kg组与匹维溴铵组粪便稀便级及粪便湿重均明显下降(P<0.05)。FAE(30、100、300、1 000、3 000μg/m L)及匹维溴铵对肠管自发收缩均有显著的抑制效应(P<0.05,P<0.01),且FAE(30,100,300×10-6g/m L)对Ach引发的痉挛性收缩及Ca Cl2促发的张力性收缩均有剂量依赖地松弛作用(P<0.05,P<0.01),匹维溴铵亦能显著抑制Ach及Ca Cl2引发的收缩作用(P<0.01)。结论 FAE有效成分可能通过Ca2+通道竞争拮抗作用,剂量依赖地抑制结肠运动亢进,进而参与改善IBS模型的排便功能及肠痉挛引起的痛觉过敏。

药饲两用金荞麦中金1号的选育与效益分析

金荞麦药饲两用,具有生物量大、种植成本低、易于繁殖的特点,是土地贫瘠和劳动力短缺的深度贫困地区的特色农作物。本研究测定了自主选育的金荞麦新品系中金1号的产量和营养成分,对肉猪饲喂效果进行了分析,并评价了其经济效益。结果表明,中金1号地下部分药用活性成分含量高,地上部分生长迅速且叶片丰富,具有较大的开发潜力。中金1号的地上部分年产量在99 000kg/hm^以上,含有丰富的营养元素且粗蛋白含量较高。中金1号饲料饲喂猪肉的营养价值远高于普通饲料的对照组,蛋白质、天门冬氨酸等必需氨基酸、亚油酸等不饱和脂肪酸以及维生素B1等含量显著增加,而脂肪含量显著降低;金荞麦的产投比达到2.57,经济效益明显。