降糖舒心方对糖尿病心肌细胞内质网应激Caspase-12凋亡旁路及心功能的影响

目的:探讨降糖舒心方(JTSXR)改善SD糖尿病大鼠胰岛素抵抗,抑制内质网应激Caspase-12凋亡旁路,减轻内质网应激反应,提高心功能的分子机制。方法:采用链脲佐菌素+高脂饲养制备大鼠2型糖尿病模型,造模成功后随机分为模型组、JTSXR低剂量组(JTSXR1组)、JTSXR高剂量组(JTSXR2组)和西药组(格列喹酮+贝那普利),另取同批大鼠作对照。相应药物干预2个月后,超声心动图检测左室结构及功能变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、糖化血红蛋白(GHb)和空腹血清胰岛素(fasting insulin,FINS)水平,计算胰岛素抵抗指数(IRI);Masson染色法检测心肌胶原纤维的表达,用TUNEL法检测心肌细胞凋亡水平,用RT-PCR检测内质网应激凋亡分子糖调节蛋白78(GRP78)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-12 (Caspase12)的mRNA转录水平。结果:与模型组相比,各给药组均能明显降低GHb、CRP、IL-6、TNF-αand IRI(P<0.05),升高FINS(P<0.05);下调GRP78、Caspase12mRNA转录(P<0.05);减轻心肌纤维化(P<0.05),降低心肌细胞凋亡指数(AI)(P<0.05),降低心室形态学指标左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)和短轴缩短率(FS)(P<0.05),升高功能性指标E/A和EF(P<0.05)。JTSXR随剂量增加疗效更显著。结论:JTSXR能抑制胰岛素抵抗,减轻糖尿病'氧化应激-内质网应激-细胞凋亡'的偶联反应,抑制内质网应激Caspase-12细胞凋亡旁路,提高心功能,疗效具有剂量依赖性。

内质网应激及蛋白激酶R样内质网激酶/CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白/门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-12信号通路介导的细胞凋亡在糖尿病肾病发病机制中的作用研究进展

糖尿病肾病(DN)是糖尿病微血管并发症,主要表现为血糖升高、蛋白尿、肾功能下降,也是患者后期肾功能衰竭的主要原因。临床上主要通过控制血压和血糖水平来抑制DN的进展,但效果不佳。现有研究发现,内质网应激及其介导的细胞凋亡是引起DN的重要原因,蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)/CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)/门冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-12(caspase-12)信号通路在其中发挥关键性作用,其中PERK是内质网应激启动的标志,CHOP是内质网应激由抗凋亡作用开始转为促凋亡作用的重要分子,caspase-12是内质网应激介导细胞凋亡的最终执行分子。本文就内质网应激及相关信号通路介导的细胞凋亡在DN发病机制中的作用进行综述。

冬凌草甲素通过内质网应激诱导胰腺癌细胞凋亡的研究

目的 探讨冬凌草甲素通过内质网应激诱导胰腺癌细胞凋亡的机制。方法 选取胰腺癌SW1990和Panc-1细胞株作为研究对象。采用细胞计数试剂-8(cell counting kit-8,CCK-8)和流式细胞术分别检测细胞增殖和凋亡情况,蛋白印迹法检测内质网应激相关因子葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78 kD,GRP78)、环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(C/EBP-homologous protein,CHOP)、裂解的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白水解酶-12(cleaved cystein aspartate specific proteinase-12,cleaved Caspase-12)、活化的(active)Caspase-3、cleaved Caspase-3、cleaved多腺苷二磷酸多聚酶[poly(ADP-ribose) polymerase,PARP]的蛋白表达水平,实时荧光定量RCR检测GRP78、CHOP、Caspase-12的m RNA表达水平。结果 冬凌草甲素浓度和时间相关性抑制SW1990和Panc-1细胞增殖,冬凌草甲素可诱导SW1990和Panc-1细胞凋亡,可增加SW1990细胞中cleaved Caspase-3和cleaved PARP的蛋白表达水平(P<0.05);进一步研究发现冬凌草甲素能上调GRP78、CHOP、Caspase-12 mRNA及GRP78、CHOP、cleaved Caspase-12的蛋白表达水平,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。且在内质网应激抑制剂4-PBA的作用下,冬凌草甲素处理后细胞凋亡率和GRP78、CHOP、cleaved Caspase-12、active Caspase-3蛋白表达水平均被逆转,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 冬凌草素对SW1990和Panc-1细胞的促凋亡作用依赖于内质网应激的激活,冬凌草甲素可通过激活内质网应激介导胰腺癌细胞凋亡,为冬凌草甲素治疗胰腺癌中的抗肿瘤活性研究提供了新的思路。