基于线粒体COⅠ基因序列的梭鲈野生群体遗传结构

为了解梭鲈种群的遗传结构,实验利用线粒体细胞色素c氧化酶Ⅰ亚基(COⅠ)基因部分序列分析了中国6个和中亚2个群体的遗传差异,并与欧洲群体的单倍型序列进行了比较。结果在640 bp的COⅠ基因序列中检测到5个变异位点,定义了7种单倍型,发现Hap1为8个梭鲈群体的共享单倍型,且与欧洲群体的HapA相同,在中国群体所占比例(93.36%)高于中亚群体(72.58%)和欧洲群体(53.85%);Hap2和Hap3是中国群体的特异单倍型,而Hap4~Hap7为中亚群体的特异单倍型。单倍型序列的聚类图和网络图均显示Hap1/A为梭鲈群体的原始单倍型,中国和中亚群体的特异单倍型相对于原始单倍型仅有1~2个位点的变异,属于Hap1/A的亚型,与欧洲群体的特异单倍型具有较大的差异。每个群体检测到1~4种单倍型,斋桑湖(ZS)群体单倍型最多,而中国的腾格里湖(NX)、兴凯湖(XK)和鸭绿江(YJ)群体仅有1个单倍型(Hap1);塔什干(TS)群体的单倍型多样性(Hd)和核苷酸多样性(π)最高(Hd=0.514±0.069;π=0.00079±0.00011),其次是ZS群体,而中国梭鲈群体的多样性参数较低。AMOVA分析结果显示,梭鲈群体间遗传变异占20.74%,群体间遗传分化程度较高(0.15≤F_(st)=0.20736<0.25),TS群体与ZS群体和中国群体间的遗传分化极大(F_(st)>0.25),中国群体中仅黑河(HH)群体与其他群体的遗传分化较大,而中国其他5个群体间无遗传分化。基于群体间遗传距离的系统进化树显示,来自中国的6个梭鲈群体与哈萨克斯坦的ZS群体聚为一支,而乌兹别克斯坦的TS群体独立为一支。研究结果为梭鲈群体的繁殖及放流管理提供了参考。

核壳结构上转换发光纳米粒子的合成及用于细胞色素C的检测

本工作合成了三层核壳结构的上转换发光纳米粒子,其中第一层是惰性核,第二层为发光层,为了增强上转换发光强度,又在表面包覆了第三层惰性壳层。该材料粒径均一、分散性良好,其发光层厚度约为2.4nm,惰性壳层厚度约为2.9nm。在其表面修饰了细胞色素C的适配体链及互补链,在适配体的3’端修饰了BHQ3基团,能够猝灭上转换纳米粒子在655nm波长处的发光。当细胞色素C存在时,适配体与细胞色素C结合从而离开其表面,使655nm处的发光恢复。在检测过程中,540nm处的发光强度不会发生变化,可以用作细胞色素C的比率荧光检测。结果表明,当细胞色素C浓度在5~80μmol/L范围时,发光信号恢复程度与细胞色素C浓度呈线性相关,相关系数为0.998,检出限为1μmol/L。所建立方法可为细胞色素C的荧光检测提供一种新的技术思路。

基于In Silicon模拟消化的北极虾DPP-Ⅳ抑制肽活性分析

北极虾具有很高的营养价值,在食品领域已引起越来越多的关注。对北极虾蛋白进行In Silicon模拟消化获得寡肽,通过PeptideRanker活性评分及理化性质分析,从中筛选出具有潜在生物活性的寡肽。使用ToxinPred分析和BIOPEP-UWM生物活性预测,发现部分寡肽具有二肽基肽酶-Ⅳ(dipeptidyl peptidase-Ⅳ,DPP-Ⅳ)抑制活性,最终确定WFP(一种三肽,Trp-Phe-Pro)具有最优的DPP-Ⅳ抑制活性肽。分子对接表明,WFP和DPP-Ⅳ能够形成稳定的复合物,其结合能为-6.93 kcal/mol,进一步研究表明,WFP通过与DPP-Ⅳ S1、S2、S3三个活性口袋中的9个氨基酸残基发生相互作用而抑制其活性。本研究为阐释北极虾营养价值及生物活性肽的开发提供了理论依据。

铜代谢相关基因COX17与头颈部鳞状细胞癌不良预后相关

目的:探讨铜代谢相关基因细胞色素c氧化酶铜伴侣17(COX17)对头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)发生发展及预后的影响。方法:运用生物信息学分析COX17在HNSCC与正常组织中的表达差异;通过构建列线图验证COX17在预测HNSCC预后中的作用;采用KEGG和GO分析对COX17相关基因进行功能富集分析以及利用ssGSEA分析COX17表达与HNSCC组织中免疫细胞浸润丰度的关系;采用实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)验证COX17在HNSCC细胞系与永生化正常上皮细胞系中的表达差异;细胞活力试剂盒(CCK-8)和Transwell实验分别用于检测COX17对细胞增殖、侵袭能力的影响。结果:COX17在HNSCC中表达显著上调(P<0.05)。预后分析表明COX17与HNSCC患者总生存期(OS)密切相关(P<0.05)。免疫浸润相关性分析显示,COX17与多种免疫细胞浸润丰度呈负相关关系(均P<0.001)。敲低COX17可显著抑制HNSCC细胞SCC-9、SAS细胞的增殖及侵袭能力。结论:COX17的表达可影响HNSCC细胞的增殖和侵袭,并与HNSCC组织中免疫细胞浸润存在潜在关联;作为线粒体铜代谢分子标记物,COX17可能是评估HNSCC预后的有效指标和潜在治疗靶点。

Cytochrome C在大鼠SAH后早期脑损伤的表达及意义

目的:本实验采用枕大池注血法建立大鼠蛛网膜下腔出血动物模型,通过研究细胞色素C(Cytochrome C)在动物体内和体外表达变化,探讨c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号传导通路是否参与了蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑损伤(EBI)的发生、发展,并进一步探讨JNK在EBI中的作用及意义。方法:随机选取120只大鼠采用枕大池注血法建立标准SAH动物模型。随机将其分为6组:分别为正常组(n=20),假手术组(Sham组,n=20),SAH组(n=20),SAH+DMSO(二甲基亚砜)组(n=20),SAH+SP600125(10mg/kg)组(n=20)和SAH+SP600125(30mg/kg)组(n=20)。利用TUNEL显色法检测大脑皮层区域细胞凋亡现象情况;运用Western Blotting法动态检测脑组织Cytochrome C蛋白表达情况。结果:(1)蛛网膜下腔出血后大鼠神经行为功能异常;Western Blot法检测大脑皮质Cytochrome C表达增加;蛛网膜下腔出血后24h,通过TUNEL检测大脑皮层区脑组织细胞的异常染色、结构紊乱等凋亡征象。(2)SP600125干预后,大鼠神经行为功能异常有所好转;检测大脑皮质Cytochrome C值减少,实验组大脑皮层细胞凋亡征象减少。结论:神经元细胞凋亡途径是蛛网膜下腔出血后早期脑损伤过程中重要的病理生理机制;JNK信号传导通路可能通过诱导细胞凋亡而促进早期脑损伤的发生、发展;SP600125可能通过抑制JNK信号传导通路中Cytochrome C蛋白表达从而保护蛛网膜下腔出血后造成的早期脑损伤。

基于SIRT1/PGC-1α/Cyt C通路探讨养精种玉汤联合寿胎丸对PCOS-IR大鼠的影响

目的基于沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT1)/过氧化物酶体增殖活化受体γ辅助活化因子1α(PGC-1α)/细胞色素C(Cyt C)通路探究养精种玉汤联合寿胎丸对多囊卵巢综合征合并胰岛素抵抗(PCOS-IR)大鼠的影响。方法取雌性SD大鼠110只,随机选取97只大鼠,以皮下注射脱氢表雄酮及高脂饲料喂养方法建立PCOS-IR模型,其余大鼠作为正常组。将造模成功后大鼠随机分为8组,每组12只。二甲双胍组给予0.265 g/kg二甲双胍灌胃,寿胎丸组给予12 g/kg寿胎丸灌胃,低剂量养精种玉汤组给予33 g/kg养精种玉汤灌胃,高剂量养精种玉汤组给予66 g/kg养精种玉汤灌胃,低剂量养精种玉汤+寿胎丸组给予33 g/kg养精种玉汤+12 g/kg寿胎丸灌胃,高剂量养精种玉汤+寿胎丸组给予66 g/kg养精种玉汤+12 g/kg寿胎丸灌胃,高剂量养精种玉汤+寿胎丸+EX-527组给予66 g/kg养精种玉汤+12 g/kg寿胎丸灌胃和5 mg/kg EX-527腹腔注射,正常组和模型组给予生理盐水灌胃与腹腔注射,均1次/d,连续干预14 d。记录大鼠的体重;血糖仪、ELISA试剂盒分别检测大鼠的空腹血糖(FPG)和空腹胰岛素(FINS)水平,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和血糖曲线下面积(GAUC);ELISA法检测大鼠血清黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、睾酮(T)、雌二醇(E_(2))水平;HE染色观察大鼠卵巢组织病理学形态;Western blot法检测大鼠卵巢组织中SIRT1/PGC-1α/Cyt C信号通路相关蛋白表达情况。结果与正常组比较,模型组大鼠FPG、GAUC、HOMA-IR、LH、T水平及卵巢组织中Cyt C蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),FSH、E_(2)水平及卵巢组织中SIRT1、PGC-1α蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05);大鼠卵巢组织呈多囊样病变,囊性扩张卵泡增多,卵泡体积增大,颗粒细胞排列疏松紊乱。与模型组比较,各药物组大鼠的体重下降程度较大(P均<0.05),FPG、GAUC、HOMA-IR、LH、T水平及卵巢组织中Cyt C蛋白相对表达量均明显降低(P均<0.05),FSH、E_(2)水平及卵巢组织中SIRT1、PGC-1α蛋白相对表达量均明显升高(P均<0.05),大鼠卵巢组织多囊样病变减轻;高剂量养精种玉汤+寿胎丸组上述各项指标及卵巢组织多囊样病变改善更明显,而EX-527减弱了高剂量养精种玉汤联合寿胎丸对大鼠PCOS-IR进展的阻碍作用。结论养精种玉汤联合寿胎丸可能通过调节SIRT1/PGC-1α/Cyt C信号通路改善PCOS-IR大鼠性激素水平,延缓PCOS-IR进展。

利拉鲁肽基于线粒体-细胞色素C介导心肌细胞凋亡

目的探讨利拉鲁肽在缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)处理的心肌细胞中的作用及其潜在机制。方法建立大鼠心肌细胞株(H9C2)H/R模型以模拟体外心肌缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤。用四甲基偶氮唑盐[3-(4,5)-dimethylthiahiazo(-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,MTT]和Annexin V FITC-PI染色法测定细胞增殖和凋亡。检测细胞氧化应激产物和线粒体功能。用蛋白印迹法(Western blotting)检测细胞凋亡蛋白表达和细胞色素C的释放。结果利拉鲁肽保护H9C2细胞免受H/R诱导的损伤,因其可减弱H/R对H9C2细胞活力、细胞凋亡和活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生的影响(P<0.05)。利拉鲁肽可保护线粒体功能并防止H/R损伤后H9C2细胞中细胞色素C的释放(P<0.05)。结论阐明了利拉鲁肽在治疗I/R相关心肌损伤中的潜在心血管保护作用。

二乙酰吗啡致大鼠小脑颗粒神经元细胞凋亡过程中C-Jun、Cytc和Caspase-9的作用

背景:二乙酰吗啡药物可导致神经元损伤,但是目前二乙酰吗啡是否诱导神经元细胞凋亡,C-jun、Cytc和Caspase-9因子是否参与此过程尚未见报道。目的:探讨C-jun、Cytc、Caspase-9是否参与二乙酰吗啡诱导神经元细胞凋亡过程。方法:将SD乳鼠小脑颗粒神经元细胞体外培养7 d,采用不同质量浓度二乙酰吗啡(0,10,40,80,100,120 mg/L)干预神经元细胞24 h,在倒置荧光显微镜下观察神经元细胞形态改变,流式细胞仪检测细胞凋亡率。采用100 mg/L二乙酰吗啡和20μmol/L JNK抑制剂SP600125作用于细胞24 h,通过免疫荧光和蛋白印迹方法检测C-jun、Cytc和Caspase-9蛋白的表达。结果与结论:①在不同质量浓度二乙酰吗啡干预下,随着给药质量浓度的增加,神经元细胞胞体萎缩、亮度降低,部分呈灰黑色,细胞碎裂,神经元网状结构不同程度的消失,细胞改变数量逐渐增加;②随着给药质量浓度的增加,形态改变的细胞数量明显增多(P <0.01),细胞凋亡率也显著增高(P <0.01);③与对照组相比,100 mg/L二乙酰吗啡作用神经元细胞时,二乙酰吗啡组C-jun、Cytc和Caspase-9蛋白呈高表达,差异有显著性意义(P <0.05);与二乙酰吗啡组相比,二乙酰吗啡+SP600125组C-jun、Cytc和Caspase-9蛋白表达明显下调,差异有显著性意义(P <0.05);④结果表明,二乙酰吗啡可诱导小脑颗粒神经元细胞凋亡,C-jun、Cytc和Caspase-9参与了二乙酰吗啡致神经元细胞凋亡的过程。

低硒大鼠心肌线粒体CytC含量的动态变化及其在心肌细胞凋亡中的作用

目的检测低硒大鼠心肌线粒体中细胞色素C(CytC)的蛋白含量及心肌细胞凋亡情况,探讨低硒时CytC在线粒体介导的细胞凋亡中的作用机制。方法构建低硒大鼠模型,于喂养20、30、40周时提取心肌线粒体,Western Blot法检测线粒体中CytC的蛋白表达;免疫组织化学技术(SP法)对死亡结构域蛋白FADD进行原位染色,统计阳性细胞指数,并对CytC与心肌细胞凋亡指数进行相关性分析。结果低硒组CytC的表达与相应时段的对照组相比均降低,且随低硒喂养时间延长,降低更为明显,差异均有统计学意义(P<0.05);各时间对照组间心肌线粒体中CytC的表达无明显差异;免疫组化染色显示,随着喂养时间的延长,低硒组大鼠心肌细胞凋亡加重;相关性分析显示,线粒体内CytC表达与心肌细胞凋亡指数呈负相关(rs=-0.858,P<0.01)。结论低硒可影响大鼠心肌线粒体中CytC蛋白的表达;CytC表达与心肌细胞凋亡指数具有相关性,提示CytC在线粒体介导的心肌细胞凋亡中起重要作用。

黄芪注射液对早期大鼠脑出血灶周围神经元CytC和线粒体ATPase的影响

目的探讨黄芪注射液对大鼠脑出血灶周围凋亡神经元线粒体Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶和细胞色素C的影响。方法将32只雄性SD大鼠随机分为黄芪治疗组、出血模型组和正常对照组,其中黄芪治疗组又分为出血后6h治疗组和24h治疗组。选用胶原酶Ⅶ-肝素液注射到大鼠尾状核建立脑出血动物模型,48h后测定各组大鼠脑出血灶周围神经元线粒体Na+-K+-ATP酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性,以及神经元内细胞色素C的改变。结果与正常组比较,出血模型组细胞色素C的表达明显增加(P<0.01),ATP酶的活性均明显降低(P<0.01)。与出血模型组比较,6h治疗组及24h治疗组的细胞色素C表达均明显减少(P<0.05),ATP酶的活性均明显增加(P<0.05);6h治疗组与24h治疗组比较,细胞色素C的表达差异无统计学意义(P>0.05),ATP酶的活性6h组高于24h组(P<0.05)。结论黄芪注射液进行干预可减少脑出血灶早期神经元细胞内细胞色素C的释放及提高Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶的活性,从而减轻脑出血灶区神经细胞的凋亡,并且出血6h用药较出血24h后用药效果更好。

猪心中提取和纯化辅酶Q_(10)(联产CytC)

辅酶Ｑ１０和细胞色素Ｃ是促生物氧化酶类生化药物，本试验从猪心中提取和纯化辅酶Ｑ１０，并联产细胞色素Ｃ。猪心以酸性水液粗提，细胞色素Ｃ经人造沸石吸附，洗脱，盐析，三氯乙酸沉淀，弱酸性阳离子吸附，真空干燥得２２５ｍｇＣｙｔＣ／ｋｇ猪心，纯度７９％。提取后的猪心渣，用醇碱皂化法，经硅胶柱层析，无水乙醇结晶、重结晶，每千克猪心渣可提取辅酶Ｑ１０７５ｍｇ，含量为９５．３％。

α-细辛醚诱导的Eca-109细胞中cytC、bax的表达

目的:观察α-细辛醚对食管癌Eca-109细胞凋亡及cytC、bax表达的影响,探讨其诱导细胞凋亡的机制。方法:体外培养人食管癌Eca-109细胞,以15 mmol/L 5-氟尿嘧啶(5-FU)和25、50、100 mg/L的α-细辛醚干预48 h后,DAPI染色、倒置荧光显微镜下观察细胞形态,MTT检测细胞增殖情况,Annexin V-PI法检测细胞凋亡率,分别采用Western blot和实时荧光定量PCR法检测cytC、bax mRNA及蛋白的表达。以无干预细胞作空白对照。结果:与空白对照组比较,α-细辛醚组和5-FU组细胞的增殖能力降低,凋亡率升高(P<0.05),细胞中cytC、bax蛋白及mRNA相对表达量均升高(P<0.05)。结论:α-细辛醚可能通过上调线粒体通路cytC、bax的表达,抑制Eca-109细胞增殖,促进其凋亡。

线粒体CytC的释放机制及其在细胞凋亡中的作用

描述了细胞色素C(CytC)从线粒体释放的机制及其在细胞凋亡中的作用,主要阐述了细胞凋亡信号转导途径中的线粒体-CytC途径及AIF途径;CytC在细胞凋亡中的作用及介导细胞凋亡的方式。探讨了线粒体CytC的泄漏机制,对非特异性释放模式(MPTP假说和线粒体膨胀假说)、特异性释放模式(专一性通道假说)进行了阐述,最后分析了研究CytC与细胞凋亡分子机制的意义并提出细胞凋亡分子机制中一些未完全研究清楚的问题。

甜茶素对棕榈酸诱导INS-1细胞超微结构及CytC易位表达的保护作用

目的:探索甜茶素对棕榈酸诱导INS-1细胞损伤的保护机制。方法:MTT法检测正常对照组、棕榈酸模型组、不同浓度甜茶素组细胞存活率,透射电镜观察各组细胞超微结构,免疫电镜观察各组细胞色素C的易位表达。结果:不同浓度甜茶素对棕榈酸诱导的INS-1细胞具有保护作用,超微结构保存较好;模型组细胞凋亡增多且超微结构损伤严重,Cyt C蛋白从线粒体释放入细胞质。结论:甜茶素可以提高棕榈酸诱导INS-1损伤的细胞存活率,抑制细胞凋亡的发生,其机制可能与抑制棕榈酸引起的氧化应激和阻碍Cyt C从线粒体转位入细胞质,激活细胞凋亡蛋白酶级联反应有关。

丙泊酚对大鼠脑缺血损伤后凋亡神经元线粒体CytC和ATPase的影响

目的:探讨丙泊酚对大鼠脑缺血再灌注损伤后海马区凋亡神经元线粒体Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶和细胞色素C(CytC)的影响。方法36只雄性SD大鼠随机分为假手术组,模型组和丙泊酚组(n=12),复制大鼠全脑缺血再灌注模型,采用酶联免疫吸附法检测大鼠脑海马区CytC表达;采用比色法测定大鼠脑海马区凋亡神经元线粒体ATPase的改变。结果与假手术组比较,模型组和丙泊酚组CytC的表达均增加(<0.05),ATP酶的活性均降低(<0.05);丙泊酚组大鼠脑组织海马区CytC的表达低于模型组(<0.05),ATP酶的活性高于模型组(<0.05)。结论丙泊酚的神经保护与改善脑缺血损伤后海马区凋亡神经元CytC的释放和ATPase的活性有关。

过表达OMA1通过促进线粒体释放细胞色素C诱导肺腺癌A549细胞凋亡

目的:探讨OMA1在肺腺癌中的表达水平及其对肺腺癌A549细胞凋亡的影响及机制。方法:收集2018年01月至2019年10月在本院保存的42例经病理确诊为肺腺癌患者的癌组织样本及其癌旁组织(距离肿瘤边缘≥5 cm),免疫组化染色法检测癌组织及癌旁组织中OMA1表达情况。体外培养人肺腺癌细胞系NCI-H2009、Calu-3、SPC-A-1、A549及人正常肺上皮细胞BEAS-2B,qRT-PCR和Western blotting检测细胞中OMA1 mRNA和蛋白表达水平。采用OMA1过表达慢病毒及其空载慢病毒感染A549细胞,分为OMA1过表达慢病毒感染组(OMA1组)和空载慢病毒感染组(Vector组),另设置空白对照组(Blank组)。采用MTT检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡水平;JC-10染色法检测细胞线粒体膜电位变化;qRT-PCR法检测细胞中OMA1 mRNA表达水平;Western blotting法检测细胞中OMA1、cleaved caspase-3、OPA1以及细胞线粒体和胞浆中Cyt C蛋白表达水平。结果:肺腺癌患者癌组织中OMA1表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05)。NCI-H2009、Calu-3、SPC-A-1和A549细胞中OMA1 mRNA和蛋白表达水平显著低于BEAS-2B细胞(P<0.05)。与Blank组或Vector组比较,OMA1组细胞中OMA1 mRNA和蛋白表达水平、细胞凋亡率及cleaved caspase-3蛋白和胞浆中Cyt C蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),而细胞增殖活性、线粒体膜电位及OPA1蛋白和线粒体中Cyt C蛋白表达水平均显著降低(P<0.05)。结论:OMA1在肺腺癌组织及其细胞系中低表达,过表达OMA1可通过下调OPA1蛋白表达、破坏线粒体膜电位、加速线粒体Cyt C释放而诱导肺腺癌A549细胞凋亡。

细胞色素c(Cytc)诱导烟草悬浮细胞(BY-2)凋亡

用不同浓度细胞色素c(Cyt c)诱导继代时间不同的烟草悬浮细胞48 h后观察形态学特征的结果表明,继代培养10 和13 d的细胞均在10mmol·L-1Cyt c时出现最高的细胞凋亡率,而继代5 d的细胞在Cyt c浓度为12.5mmol·L-1时细胞凋 亡的诱导率仍表现上升趋势;DNA电泳检测结果显示凋亡处理的细胞中DNA呈现较明显的DNA梯度。

基于细胞色素C双通道比率型生物传感器快速测定液体乳中的过氧化氢

通过将细胞色素C(cytochrome C,Cyt.C)和六-(二茂铁基)-己硫醇(6-(Ferrocenyl)hexanethiol,FcHT)分别修饰在工作通道电极和参比通道电极上,构建一款基于双通道比率技术的过氧化氢生物传感器。通过优化检验条件,液体乳原液和0.1 mol/L的磷酸缓冲盐溶液(Phosphate-Buffered Saline,PBS)(pH=7.0)按照体积比1∶11.5混合后,该过氧化氢比率型生物传感器可以直接对样品进行快速测定,大幅度简化了前处理的步骤,缩短前处理的时间。该传感器灵敏度为0.0037 kg/mg、线性范围为8.5~85.0 mg/kg、检出限为0.8 mg/kg,基本可以满足快速检测要求。

关键蛋白酶激活因子Apaf-2/CytC在细胞凋亡中的作用

描述了Apaf2/CytC在细胞凋亡中的作用,主要阐述了细胞凋亡相关因子Apaf2/CytC的发现,Apaf2与Apaf1及Apaf3在细胞凋亡中的作用及相互关系,CytC介导细胞凋亡的方式。探讨了线粒体CytC的泄漏机制,对MPTP假说、专一性通道假说和线粒体膨胀假说进行了阐述,并对细胞凋亡信号转导途径,如CytC途径、Fas/FasL途径、蛋白激酶途径、AIF凋亡途径及这些信号转导途径间的对话进行了分析,最后分析了研究CytC与细胞凋亡分子机制的意义并提出细胞凋亡分子机制中一些未完全研究清楚的问题。

颞叶内侧癫癎海马CA1区CytC、caspase-9、caspase-3蛋白的表达研究

目的探讨凋亡相关蛋白细胞色素C(CytC)、caspase-9、caspase-3在颞叶内侧癫癎(MTLE)病人致癎海马CA1区神经元内的表达及意义。方法选择30例典型MTLE病人为实验组,6例颞叶深部血管畸形病人为对照组。采用苏木精-伊红染色、原位末端标记(TUNEL)方法在光镜下观察MTLE病人致癎海马CA1区神经元凋亡的情况。采用免疫组化S-P法检测并比较MTLE海马CA1区与对照组海马组织神经元内凋亡相关蛋白CytC、caspase-9、caspase-3的表达。结合病史资料,分析caspase-3表达水平与癫癎病程和发作频率的相关性。结果MTLE组致癎海马CA1区光镜下可观察到神经元退变、噬神经元现象,TUNEL染色发现凋亡神经元18例,对照组则为阴性;CytC、caspase-9、caspase-3蛋白在MTLE组海马CA1区均有明显表达,对照组中则呈轻微表达,差异显著(P<0.01)。caspase-3蛋白表达水平与发作频率呈正相关,而与病程长短无关。结论MTLE致癎海马神经元中存在外源性凋亡途径,这可能是癫癎发展的重要因素之一。