血清CXCL10、CCCK-18水平对伴糖尿病冠心病患者PCI术后短期预后的预测效能

目的探讨血清CXC趋化因子配体10(CXCL10)、细胞角蛋白18裂解片段(CCCK-18)水平对伴糖尿病冠心病患者经皮冠状动脉介入术(PCI)后短期预后的预测效能。方法选取2020年12月至2022年12月在安阳市第三人民医院实施相应PCI手术的149例伴糖尿病冠心病患者作为研究对象,采用酶联免疫吸附法检测血清CXCL10、CCCK-18水平。术后随访3个月,根据患者是否发生主要心血管不良事件(MACE)分为预后良好组121例和预后不良组28例。采用受试者工作特征曲线(ROC)评估血清CXCL10、CCCK-18水平对伴糖尿病冠心病患者PCI术后短期预后的预测效能,采用二分类Logistic逐步回归分析探讨伴糖尿病冠心病患者PCI术后短期预后的影响因素。结果预后不良组患者冠状动脉评分(Gensini)≥70分和多支血管病变的占比分别为78.57%、89.29%,明显高于预后良好组的43.80%、60.33%,差异均有统计学意义(P<0.05),其他临床资料比较差异均无统计学意义(P>0.05);预后不良组患者的血清CXCL10、CCCK-18水平分别为(19.35±2.41)ng/mL、(306.45±33.69)U/L,明显高于预后良好组的(8.63±1.87)ng/mL、(218.36±22.15)U/L,差异均有统计学意义(P<0.05);经ROC分析结果显示,血清CXCL10、CCCK-18水平预测伴糖尿病冠心病患者PCI术后短期预后的最佳截断值分别为13.51 ng/L、262.47 U/L,而两者联合预测的曲线下面积(AUC)95%置信区间(95%CI)为0.912(0.868~0.957);经多因素Logistic逐步回归分析结果显示:Gensini评分≥70分、多支血管病变、CXCL10、CCCK-18均是伴糖尿病冠心病患者PCI术后短期预后的影响因素(P<0.05)。结论伴T2DM冠心病PCI术后预后不良患者的血清CXCL10、CCCK-18水平较预后良好者明显升高,两者联合检测对术后不良心血管事件具有一定的预测效能。

CK10、CK14、p63在移植至裸鼠皮下的人表皮的表达

目的研究人表皮移植至裸鼠皮下后表皮细胞的表型变化。方法将制备的人包皮表皮皮片移植到裸鼠背部皮下,7d取材。移植前后人表皮皮片标本行HE染色及细胞角蛋白10(CK10)、细胞角蛋白14(CK14)、p63免疫组织化学染色镜下观察。结果人表皮皮片移植到裸鼠皮下成活率达70%,移植成活的表皮基底层细胞增殖,细胞数增多,新生表皮增厚。免疫组化结果显示,与移植前相比,CK10表达减弱,CK14和p63表达增强,这与人皮肤创伤愈合过程中表皮细胞表型变化一致。结论移植人表皮到裸鼠皮下的方法可以模拟人皮肤创伤愈合过程,是一种可行的在体研究人表皮细胞的实验方法。

MEBT/MEBO对慢性难愈合创面组织中CK10表达水平的影响

目的通过对比观察不同治疗方案对大鼠创面组织内CK10表达水平的影响,进一步揭示皮肤再生医疗技术(moist exposed burn therapy/moist exposed burn ointment, MEBT/MEBO)治疗慢性难愈合创面的部分作用机制。方法将90只SPF级Wistar大鼠随机分为空白组(18只)、急创组(18只)、慢创组(18只)、rb-bFGF组(18只)及MEBO组(18只),其中空白组大鼠仅做备皮处理,急创组大鼠建立急性创面模型,慢创组、 rb-bFGF组及MEBO组大鼠建立慢性难愈合创面模型,且空白组大鼠局部皮肤予以生理盐水纱布湿敷,急创组及慢创组大鼠创面予以生理盐水治疗, rb-bFGF组大鼠创面予以重组牛碱性成纤维细胞生长因子(recombinant bovine basic fibroblast growth factor, rb-bFGF)凝胶治疗, MEBO组大鼠创面予以湿润烧伤膏(moist exposed burn ointment, MEBO)治疗,分别于治疗第3、 7、 14天对比观察5组大鼠皮肤或创面组织的形态学变化及CK10的表达水平。结果 (1)治疗第3天,空白组大鼠皮肤组织形态与正常皮肤组织形态无明显差异,其他各组大鼠创面组织水肿明显,可见大量炎性细胞浸润及少量成纤维细胞与新生毛细血管分布;治疗第14天,空白组大鼠皮肤组织形态与正常皮肤组织形态无明显差异,慢创组大鼠创面组织内仍有少量炎性细胞浸润,且有大量排列不规则的成纤维细胞分布,而急创组、 rb-bFGF组及MEBO组大鼠创面组织内可见排列整齐的新生毛细血管及完整的毛囊和皮脂腺等皮肤附属器,组织结构接近于正常皮肤组织。(2)治疗第3、 7、 14天,空白组大鼠皮肤组织内CK10表达水平无明显变化,P> 0.05,差异无统计学意义;而急创组、慢创组、 rb-bFGF组及MEBO组大鼠创面组织内CK10表达水平呈现逐渐升高的趋势,P均<0.05,差异具有统计学意义。(3)治疗第7、 14天,急创组、rb-bFGF组和MEBO组大鼠创面组织内CK10表达水平均明显高于慢创组,P均<0.05,差异具有统计学意义;治疗第3、 7、 14天, rb-bFGF组和MEBO组大鼠创面组织内CK10表达水平均无明显差异,P均> 0.05,差异无统计学意义。结论 MEBT/MEBO治疗慢性难愈合创面的疗效不亚于rb-bFGF凝胶,且改变表皮干细胞的外界生存环境,促进表皮干细胞向正常表皮细胞增殖、分化,可能是其促进慢性难愈合创面修复的作用机制。

子宫颈癌患者组织中CK10、Ki-67表达及临床意义

目的:研究子宫颈癌患者组织中细胞角蛋白10(CK10)、Ki-67表达及临床意义。方法:回顾性分析2017年10月-2020年10月于九江市妇幼保健院完成子宫颈癌切除术的60例子宫颈癌患者临床资料。采集所有入组患者子宫颈癌组织及癌旁正常组织,以免疫组织化学法检测不同子宫颈组织CK10、Ki-67的表达情况。分析上述两项蛋白表达情况和子宫颈癌患者临床分期、淋巴结转移的关系。以受试者工作特征(ROC)曲线分析CK10、Ki-67评估子宫颈癌患者临床分期以及淋巴结转移的效能。结果:子宫颈癌组织CK10阳性率为18.33%,低于癌旁正常组织的80.00%,而Ki-67阳性率为88.33%,高于癌旁正常组织的11.67%,差异均有统计学意义(P<0.05)。临床国际妇产科联盟(FIGO)分期Ⅱ、Ⅲ期患者Ki-67阳性率为100%,均高于临床FIGO分期Ⅰ期患者,有淋巴结转移患者Ki-67阳性率为100%,高于无淋巴结转移患者,但差异均无统计学意义(P>0.05)。经ROC曲线分析可得,CK10与Ki-67联合检测评估子宫颈癌患者临床分期Ⅱ、Ⅲ期的曲线下面积、敏感度及特异度均高于上述两项指标单独检测,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:子宫颈癌患者组织中CK10呈异常低表达,而Ki-67呈异常高表达,联合检测其表达水平可能具有辅助评估子宫颈癌患者临床FIGO分期及淋巴结转移的作用。

腹腔镜下射频消融联合静脉化疗对肝癌患者血清肿瘤标志物甲胎蛋白、细胞角蛋白19、父系表达基因10表达的影响

目的探讨腹腔镜下射频消融联合静脉化疗对肝癌患者血清肿瘤标志物甲胎蛋白(AFP)、细胞角蛋白19(CK19)、父系表达基因10(PEG10)表达的影响。方法选取原发性肝癌患者86例,随机分为对照组43例,予临床常规静脉化疗治疗;实验组43例,在对照组静脉化疗的基础上联合应用腹腔镜下射频消融治疗。观察2组患者治疗前后血清肿瘤标志物AFP、CK19、PEG10、肿瘤组织相关基因mRNA表达量,以及治疗后4个月复发率及生存时间水平变化。结果与治疗前相比,治疗后2组患者的血清AFP、CK19、PEG10水平均比治疗前明显降低;与对照组比较,实验组患者治疗后血清AFP、CK19、PEG10水平、HIF-1、VEGF mRNA、β-catenin、Cyclin D1、c-myc及MMP-7 mRNA表达量水平均低于对照组,PTEN mRNA表达量水平高于对照组;实验组中位生存期(28.3个月)显著高于对照组(13.7个月),上述差异均有统计学意义(P<0.05)。结论腹腔镜下射频消融联合静脉化疗能有效降低肝癌患者血清肿瘤标志物AFP、CK19、PEG10水平,通过PTEN通路、Wnt通路抑制肝癌细胞生长,延长生存时间。

SD大鼠角朊细胞分离培养及鉴定

目的探讨SD大鼠角朊细胞的分离培养技术并鉴定,观察细胞生长情况。方法采用中性蛋白酶(DispaseⅡ)和胰蛋白酶分离角朊细胞,加入含有10%胎牛血清的角质化细胞专用培养基(keratinocyte serum free,K-SFM)培养。用免疫组化法和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法进行鉴定。结果角朊细胞生长缓慢,原代培养第5天开始出现细胞克隆,核大而圆,培养11天连成片,培养24天长满单层,细胞传代培养比较困难,很难贴壁,经摸索在培养第15天,细胞长满80%左右时即可传代,但一般传3代后就不能再传。大鼠角朊细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)染色,细胞质呈棕褐色,提示培养的细胞CK19阳性。大鼠角朊细胞标志RT-PCR检测整合素β1、CK14(cytokeratin 14)、CK10(cytokeratin 10)的mRNA表达均阳性。结论用两种酶分离获得的大鼠角朊细胞活性好,降低成纤维细胞污染,用K-SFM培养基培养的细胞经鉴定具有角朊细胞特性,为皮肤组织工程的研究提供良好的种子细胞方面的实验数据。

羊膜凝胶对大鼠干眼的治疗作用及其作用机制

目的通过局部应用苯扎氯铵(benzalkonium chloride,BAC)建立大鼠干眼模型,观察羊膜凝胶对大鼠干眼的治疗作用。方法随机选取25只健康Wistar大鼠制作干眼动物模型后,随机分为干眼对照组(A组)、溶剂治疗组(B组)、羊膜提取液组(C组)、羊膜凝胶组(D组)和人工泪液治疗组(E组),另取5只大鼠作为正常对照组。每组治疗前后分别检测大鼠干眼指标,包括泪液分泌试验、泪膜破裂时间及角膜荧光染色评分。治疗4周后收集大鼠眼组织标本行病理及生化检测,包括角膜HE染色、PAS染色、免疫组化染色及TUNEL试验。结果随着治疗时间的延长,羊膜匀浆提取液及羊膜凝胶均可改善大鼠干眼状况。治疗4周后D组大鼠的各项干眼指标相对于B组均有明显好转,干眼治疗效果明显优于E组(P<0.05)。另外,羊膜凝胶可使干眼大鼠的角膜上皮平整规则,角膜上皮K10表达下调,增加角膜MUC1的表达,有助于维持泪膜稳定性。结论羊膜凝胶可通过维持角膜上皮完整性,抑制角结膜鳞状上皮化生,促进结膜杯状细胞增殖、黏蛋白分泌而减轻干眼的病理损伤,从而缓解干眼的症状,具有治疗大鼠干眼的效果。

Ki-67和CK10在鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤中的表达及临床意义

目的探讨鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤(NIP)组织中Ki-67、细胞角蛋白10(CK10)的表达,分析其在NIP发生、发展及复发过程中的作用。方法应用免疫组织化学法检测50例NIP,20例鼻息肉(NP)及10例正常鼻腔黏膜(NM)组织中Ki-67和CK10的表达情况,并进行比较分析。结果 NM组、NP组和NIP组中CK10表达阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05);Ki-67表达阳性率在NIP组与NP组间比较,差异无统计学意义(P>0.05),在NIP和NM组间比较,差异有统计学意义(P<0.05);复发与未复发NIP患者Ki-67和CK10表达阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05);Krouse临床分级与组织中的Ki-67和CK10的表达无关(P>0.05);NIP患者Ki-67和CK10表达呈正相关(r=0.686,P<0.01)。结论 CK10在NIP的发生、发展中可能具有一定的作用,且可能与Ki-67具有协同作用。