人细胞角蛋白8(CK8)基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

目的:克隆人细胞角蛋白8(CK8)基因cDNA并在大肠杆菌中表达CK8蛋白产物。方法:运用DNA重组技术,设计CK8基因特异引物,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术从人肝细胞癌7721细胞中扩增CK8编码区cDNA,将其插入克隆载体pMD18-T simple vector中,获得重组质粒pMD18-CK8,转化感受态大肠杆菌DH5α。继而采用PCR技术从重组质粒pMD18-CK8中扩增出约1500bp目的片段,再次级克隆到原核表达质粒pET-28a(+)载体中,获得pET-28a-CK8重组原核表达质粒;经酶切、PCR及测序鉴定后转化入BL21(DE3)菌株,在IPTG诱导下进行融合蛋白的表达。采用SDS-PAGE电泳及Western blot检测CK8蛋白表达水平。结果:成功建立了人CK8基因cDNA重组体的无性繁殖系。②在原核细胞中成功地表达出人CK8蛋白,该蛋白具有很好的免疫原性。结论:运用原核细胞基因工程技术成功构建和表达了人细胞角蛋白8(CK8)基因,为进一步研究CK8的基因型及探讨该基因编码的CK8蛋白的性质和生物学活性创造条件。

抗人乳腺癌细胞膜表面角蛋白CK8的单克隆抗体的制备及鉴定

目的:建立针对多药耐药人乳腺癌细胞膜表面差异抗原的抗体库,并鉴定抗角蛋白CK8特异性的单克隆抗体。方法:采用细胞免疫和杂交瘤技术制备单克隆抗体库,经免疫沉淀得到抗原-抗体复合物,SDS-PAGE分离目的抗原,质谱测序,Western blot验证及激光共聚焦显微镜观察抗原分子的细胞膜定位。结果:成功筛选到稳定分泌抗CK8分子的单克隆抗体的杂交瘤细胞株(7F9)。结论:文中所研制的单克隆抗体具有与乳腺癌细胞膜表面CK8分子特异结合的活性,在上皮来源肿瘤标志物CK8的临床检测及CK8相关生物学活性研究中具有广泛应用前景。

CK5/6、P63、TTF-1和CK8/18在NSCLC组织中的表达及意义

目的检测细胞角蛋白5/6(cytokeratin5/6,CK5/6)、P63蛋白、甲状腺转录因子-1(thyroid transcription factor-1,TTF-1)和细胞角蛋白8/18(cytokeratin8/18,CK8/18)在人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的表达情况,研究其表达对于肺鳞癌和肺腺癌的诊断和鉴别诊断价值,探讨其临床意义。方法采用免疫组化(EnVision法)检测CK5/6、P63、TTF-1和CK8/18在1 067例病理确诊的NSCLC中的表达情况,分析其表达与NSCLC临床及病理资料的相关性。结果 CK5/6、P63、TTF-1和CK8/18在NSCLC中的阳性表达率分别为50.2%(227/452)、59.6%(164/275)、61.6%(257/417)和94.3%(116/123)。CK5/6诊断肺鳞癌的灵敏度和特异度分别为96.1%和89.8%,准确度为92.9%。P63诊断肺鳞癌的灵敏度和特异度分别为97.0%和73.9%,准确度为86.1%。TTF-1诊断肺腺癌的灵敏度和特异度分别为88.1%和91.7%,准确度为89.2%。CK8/18诊断肺腺癌的灵敏度和特异度分别为100.0%和13.5%,准确度为70.9%。CK5/6和P63共同表达阳性诊断肺鳞癌的灵敏度和特异度为84.1%和94.5%,准确度为89.0%。TTF-1和CK8/18共同表达阳性诊断肺腺癌的灵敏度和特异度为86.5%和100.0%,准确度为90.7%。CK5/6、P63主要表达在肺鳞癌,在男性、吸烟患者中升高明显(P<0.05);TTF-1、CK8/18主要表达在肺腺癌,TTF-1在女性、不吸烟患者中升高明显(P<0.01)。NCSLC患者T分期越晚,其CK5/6、P63、TTF-1的阳性表达率越高(P<0.01)。NSCLC患者淋巴结转移N分期越早,其CK5/6、P63的阳性表达率越高(P<0.01)。P63的表达与肿瘤TNM分期呈负相关(P<0.05)。结论单个指标中CK5/6、TTF-1的阳性表达对于肺鳞癌、肺腺癌的鉴别诊断具有较高价值。CK5/6和P63,TTF-1和CK8/18联合诊断有利于提高诊断的特异性。NSCLC中CK5/6、P63和TTF-1的表达与肿瘤生长浸润程度呈正相关,CK5/6、P63的阳性表达程度与淋巴结转移分期呈负相关,P63的表达与肿瘤TNM分期呈负相关。

CK8寡糖链结构及翻译水平改变与人肝癌细胞转移相关性研究

糖组学方法筛查人肝癌细胞转移过程中发挥重要作用的核心岩藻糖基化蛋白质分子,解析比较筛出的差异蛋白——细胞角蛋白8(CK8)翻译及糖基化修饰改变与人肝癌细胞转移潜能的关系.应用双向电泳(2-DE)、凝集素亲和印迹、凝集素亲和沉淀联合质谱分析技术,筛查并验证与肝癌转移相关的核心岩藻糖基化蛋白;应用细胞免疫荧光和蛋白质免疫印迹检测CK8的蛋白质表达情况;应用免疫沉淀结合多种凝集素亲和印迹,推测其与肝癌转移相关的寡糖链结构改变.研究发现,3种不同转移潜能人肝癌细胞Hep3B、MHCC97-L和MHCC97-H的扁豆凝集素(LCA)亲和印迹表达谱中,分子质量55～60ku、等电点4～6区域处有核心岩藻糖基化蛋白呈差异表达,质谱鉴定为CK8.LCA亲和沉淀及蛋白质印迹进一步验证CK8异常核心岩藻糖基化与肝癌转移相关;研究发现,CK8分布于细胞浆内,在MHCC97-L和MHCC97-H细胞中蛋白质表达水平较Hep3B高,在MHCC97-H中与LCA和蓖麻凝集素(RCA-1)的亲和力较Hep3B强.以上结果提示,2-DE和凝集素印迹技术联合MALDI-TOF-MS/MS分析可用于筛查疾病过程相关的异常糖基化蛋白质分子,CK8蛋白水平、核心岩藻糖基化及β-1,4末端半乳糖基化的增加均与肝癌细胞转移潜能相关.

IHC联合FISH 检测胃癌中HER2与CK8/18、p53、CEA的表达及其相关性研究

目的 探讨IHC联合FISH检测胃癌中HER2及其与CK8/18、p53、CEA表达的相关性研究。方法 以我院2017-01-2018-06月收治的120例胃癌手术患者为研究对象,分别采用免疫组织化学(IHC)检测胃癌组织中HER2蛋白表达情况与荧光原位杂交技术(FISH)检测胃癌组织中HER2基因扩增情况,并采用IHC方法检测胃癌组织中CK8/18、p53、CEA蛋白的表达情况,分析HER2与CK8/18、p53、CEA表达的相关性。结果 120例胃癌组织中HER2表达水平,IHC检测结果显示为HER2蛋白过表达(3+)的阳性率为11. 7%(14/120),FISH检测结果显示HER2基因扩增的阳性率为17. 5%(21/120);HER2基因扩增与CK8/18、p53及CEA蛋白的表达越高,则胃癌发生淋巴结转移及浸润深度的概率越大(P<0. 05);HER2基因扩增与CK8/18、p53及CEA蛋白的表达呈正相关(P<0. 05)。结论 胃癌HER2基因扩增与CK8/18、p53及CEA蛋白的表达与其是否发生淋巴结转移及浸润深度有关,可作为患者病情严重程度与预后的一个有效评估指标。

联合检测ER、Vimentin、CK8/18、CEA对子宫内膜腺癌和宫颈腺癌鉴别诊断的意义

目的:探讨肿瘤标志物联合检测对于鉴别子宫内膜腺癌和宫颈腺癌的意义。方法:收集手术标本的石蜡切片61例,其中原发性子宫内膜腺癌35例,宫颈腺癌26例。用免疫组化法检测子宫内膜腺癌和宫颈腺癌中Vim entin,ER,CK8/18,CEA的阳性率。结果:子宫内膜腺癌Vim entin,ER,CK8/18,CEA的阳性率分别为74.3%,54.3%,91.4%,40.0%,宫颈腺癌的阳性率分别为11.5%,11.5%,50.0%,92.3%,子宫内膜腺癌Vim entin,ER,CK8/18的阳性率明显高于宫颈腺癌(P<0.005),而宫颈腺癌CEA的阳性率明显高于子宫内膜腺癌(P<0.005)。联合检测结果发现,Vim entin+ER+CK8/18+CEA四项联合与Vim entin+CK8/18+CEA三项联合的诊断符合率相同(总符合率为93.4%,子宫内膜腺癌91.4%,宫颈腺癌96.2%),均高于Vim entin+ER+CEA的诊断符合率(总符合率为86.9%,子宫内膜腺癌85.7%,宫颈腺癌88.5%)。结论:肿瘤标志物CK8/18有助于临床上鉴别原发性子宫内膜腺癌和宫颈腺癌,联合检测中以Vim entin+ER+CK8/18+CEA或Vim entin+CK8/CK18+CEA为佳。

乳腺导管增生性病变中CK5/6、P63、CK8/18、SMA、ER的表达意义

目的探讨乳腺导管增生性病变中CK5/6、P63、CK8/18、SMA、ER的表达水平变化,并分析其意义。方法回顾性分析2018年3月至2019年3月于本院就诊的128例乳腺导管增生性病变患者的临床资料,均为女性,其中24例普通型导管增生、32例平坦型上皮不典型增生、44例非典型性导管增生、28例导管原位癌,均先后对4组标本的CK5/6、P63、CK8/18、SMA、ER表达水平进行检测,观察分析4组患者的CK5/6、P63、CK8/18、SMA、ER的表达水平状况及意义。结果普通型导管增生组CK5/6阳性率高于平坦型上皮不典型增生组、导管上皮不典型增生组、导管原位癌组高,差异有统计学意义(P<0.05);4组CK8/18、SMA、P63阳性率比较差异无统计学意义;普通型导管增生组ER阳性率低于平坦型上皮不典型增生组、导管上皮不典型增生组、导管原位癌组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论乳腺导管增生性病变中CK5/6、P63、CK8/18、SMA、ER的表达状况检测评估能够准确反馈乳腺导管增生性病变情况,为临床下一步治疗方案的制定提供可靠的科学依据。

CK-8蛋白在胃癌组织中的表达及意义

目的观察蛋白CK-8在胃癌组织中的表达,并分析其临床病理学意义,为胃癌的早期诊断、预后评估提供临床参考。方法选用包括正常胃黏膜、癌旁、非典型增生、胃癌及淋巴结转移癌组织的组织芯片,通过免疫组织化学染色观察CK-8蛋白的表达情况,分析其在不同组织中的表达与临床病理的关系。结果在胃癌和淋巴结转移癌组织中,CK-8蛋白表达阳性率较正常胃黏膜、癌旁和非典型增生组织增加(P<0.01);在胃高分化腺癌、中分化腺癌和低分化腺癌中,随着分化程度的降低CK-8蛋白阳性表达逐渐升高(P<0.01)。结论 CK-8蛋白与胃癌的发生发展、分化程度及淋巴结转移有关。

Cervista高危HPV分型与CK8/18、P120ctn表达在预测低级别鳞状上皮内病变进展和转归中的价值

目的探讨Cervista高危人乳头瘤病毒(HR-HPV)分型与CK8/18、P120ctn在预测低级别鳞状上皮内病变(LSIL)进展和转归中的价值。方法收集2012年12月~2016年12月就诊于南方医科大学附属佛山妇幼保健院同时行TCT及组织活检确诊为LSIL患者119例,其中进展组28例,持续组41例,消退组50例。另收集HSIL宫颈鳞癌(SCC)对照组20例,正常对照组15例。采用Cervista HR-HPV分型方法检测各组HR-HPV分型,运用Ventana全自动免疫组化法检测各组CK8/18、P120ctn表达情况。结果进展组A9型阳性率均高于A7及A5/A6型,高于持续组及消退组,LSIL组间HR-HPV分型比较,差异有统计学意义(P<0.05);CK8/18阳性表达率进展组为67.9%、持续组为41.5%、消退组为20.0%;LSIL组分别与HSIL\SCC对照组、正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);P120ctn阳性表达率进展组为82.1%、持续组为90.2%、消退组为100.0%;LSIL组P120ctn阳性表达率低于正常对照组,高于HSIL\SCC对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论联合检测Cervista HR-HPV分型及CK8/18、P120ctn表达对预测LSIL进展和转归有一定价值。

宫颈上皮内瘤变和浸润性鳞状细胞癌中CK8、CK17的表达

目的检测宫颈上皮内瘤变(CIN)及浸润性鳞状细胞癌中CK8、CK17的表达,并探讨其病理意义。方法应用免疫组化MaxVision法检测宫颈上皮内瘤变(CIN)44例(Ⅰ级20例,Ⅱ、Ⅲ级24例)、浸润性鳞状细胞癌25例和正常宫颈组织20例中的CK8、CK17的表达情况。结果正常对照组鳞状上皮CK8、CK17均为(-);浸润性鳞状细胞癌的阳性率分别为88%和92%,其表达均以中等强度及强阳性为主;CIN高级别组的阳性率分别为58.3%和58.3%,以中等强度为主;CIN低级别组的阳性率分别为10%和30%,其均以弱及中等强度为主。结论 CK8、CK17的阳性表达率及程度与宫颈鳞状细胞病变的严重程度密切相关。CK8、CK17在宫颈癌变过程中起到重要作用。

CK8在宫颈上皮内瘤变和宫颈癌中的表达及意义

目的探讨CK8在宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中的表达及其临床意义。方法应用免疫组织化学S-P法检测15例正常宫颈组织、15例CINⅠ、17例CINⅡ、21例CINⅢ和36例宫颈癌组织中CK8的表达情况。结果 CK8在正常宫颈组织中无表达,在CIN和宫颈癌中的阳性表达率分别47.2%和80.6%,三组组间相比,差异有统计学意义(χ2=28.503,P<0.05)。CIN间,CINⅡ、CINⅢ组阳性率均高于CINⅠ组,差异有统计学意义(P=0.016;P=0.002)。随着宫颈病变程度的加重,CK8的阳性表达率逐渐增高,其阳性表达率同宫颈病变程度呈正相关关系(γ=0.979,P<0.01)。结论 CK8在宫颈组织恶性转化过程中,随着病变程度的加重,阳性表达率逐渐增高。CK8可作为高级别CIN和宫颈癌诊断及预测病变进展趋势的标志物。

CK2β、CDK6和TNFAIP8在卵巢癌中的表达及与临床病理特征的相关性研究

目的研究蛋白激酶CK2β、周期蛋白依赖性蛋白激酶6(CDK6)和肿瘤坏死因子α诱导蛋白8(TNFAIP8)在卵巢癌组织中的表达情况,并分析其表达和卵巢癌临床病理参数的关系。方法卵巢癌患者90例,采用免疫组化法检测CK2β、CDK6和TNFAIP8在卵巢癌组织中的表达,分析其表达与临床参数的相关性。结果临床病理因素的分析结果显示,CK2β蛋白表达与卵巢癌临床分期、组织分化程度及化疗敏感性显著相关,差异均有统计学意义(P<0.05)。CDK6蛋白表达与卵巢癌组织临床参数无明显相关性(P>0.05)。TNFAIP8的表达与卵巢癌的组织分化程度显著相关(P<0.05),而与患者FIGO分期及化疗敏感性无相关性(P>0.05)。卵巢癌组织中三者相关性分析显示,CDK6与CK2β和TNFAIP8表达均无相关性(r值分别为0.116和0.171,P>0.05)。CK2β与TNFAIP8表达呈正相关(r=0.575,P<0.05)。结论CK2β蛋白表达可能与卵巢癌的发生发展有密切关系,CDK6作为不利因素促进早期卵巢癌的发生,TNFAIP8蛋白在卵巢癌组织中高表达并且与卵巢癌的分级显著相关。

前列腺癌CK5^+CK8^+细胞的分选及其分子生物学特性

目的在人前列腺癌细胞系中分选CK5^+CK8^+细胞,了解其分子生物学特性。方法流式细胞术在人前列腺癌细胞系PC3和LNCaP中分选CK5^+CK8^+细胞,用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质印迹法方法检测LNCaP细胞分选的CK5^+CK8^+细胞CK5、CK8、雄激素受体(AR)和前列腺特异抗原(PSA)的表达,细胞迁移实验检测CK5^+CK8^+细胞迁移能力,琼脂糖凝胶克隆形成实验检测CK5^+CK8^+细胞成瘤能力。采用t检验进行统计学分析。结果采用流式细胞术可以在PC3中分选出(21.3±4.6)%的CK5^+CK8^+细胞,在LNCaP中分选出(1.2±0.4)%的CK5^+CK8^+细胞。与非CK5^+CK8^+细胞相比,LNCaP中分选的CK5^+CK8^+细胞CK5 mRNA表达差异有统计学意义(t=10.435,P<0.001),CK8 mRNA表达差异无统计学意义(t=1.974,P=0.121),AR和PSA mRNA表达差异有统计学意义(t=4.317,3.232;P=0.016,0.037)。蛋白质印迹法检测得到类似结果。细胞培养7 d后,CK5^+CK8^+细胞和非CK5^+CK8^+细胞均可以在Transwell小室迁移生长,迁移细胞数分别为(60±7)个和(32±5)个,2者比较差异有统计学意义(t=6.031,P=0.004)。细胞培养14 d后,CK5^+CK8^+细胞和非CK5^+CK8^+细胞均可以在软琼脂糖凝胶中克隆性生长,阳性克隆数分别为(71±5)个和(27±3)个,差异有统计学意义(t=13.009,P<0.001)。结论人前列腺癌细胞系LNCaP和PC3都可以分选出CK5^+CK8^+细胞,LNCaP中CK5^+CK8^+细胞AR和PSA均有一定程度表达,迁移和成瘤能力增强。

PAX-8、CK19、HBME-1和Galectin-3在甲状腺乳头状癌与结节性甲状腺肿中的表达情况

目的研究免疫标记PAX-8(配对盒基因-8)、CK19(细胞角蛋白19)、HBME-1(人骨髓内皮-1)和Galectin-3(半乳糖凝集素-3)在甲状腺乳头状癌和结节性甲状腺肿的表达情况,探讨有助于鉴别诊断高分化甲状腺癌的标记或标记组合,为临床病理的鉴别诊断提供依据。方法收集包头市第四医院和包头市第七医院病理科存档甲状腺乳头状癌标本40例和结节性甲状腺肿伴乳头状增生标本40例。应用免疫组织化学分别检测两组组织表达PAX-8、CK19、HBME-1和Galectin-3的情况。结果免疫标记PAX-8在PTC主要共表达于细胞核和细胞浆,且具有良好的鉴别诊断价值,提示PAX-8有成为PTC诊断标记的潜在应用价值。结论 PAX-8联合HBME-1弥漫高表达或CK19弥漫高表达联合HBME-1弥漫高表达,均有助于提高PTC与NG的鉴别诊断能力。

小鼠在Ⅱ型细胞角蛋白基因CK-4和CK-8定位于第15染色体

用人的CK(细胞角蛋白)cDNA片段为探针,与小鼠-中国仓鼠杂种细胞DNA作Southern印迹杂交,将小鼠CK-4和CK-8基因定位在第15染色体。

CK8在宫颈癌中的表达及临床意义

目的检测CK8宫颈癌中的表达情况,并探讨其临床意义。方法应用免疫组织化学SP法检测15例正常宫颈组织和72例宫颈癌组织中CK8的表达情况。结果 15例正常宫颈组织中无CK8表达,72例宫颈癌组织中,有58例CK8表达阳性,2组比较有显著性差异(P<0.01)。CK8的表达与宫颈癌临床分期、分化程度、淋巴结转移相关(P<0.05)。结论 CK8在宫颈癌中有较高的表达,CK8可作为宫颈癌诊断的辅助指标,其在判断宫颈癌的预后方面可能发挥作用。

CK5、CK8及EZRIN在乳腺良恶性病变中的表达及意义

乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤之一.近年来我院女性乳腺癌发病率明显上升,并且发病年龄也有年轻化趋势.现代医学虽然已经取得较大的成就,针对乳腺病变的检测方法也很多,但对于乳腺良恶性病变的鉴别仍是临床及病理医生常遇到的难题,在临床病理工作中乳腺良、恶性病变有时仅凭HE染色片诊断有较大的困难.

CK5、CK8和Oct-4在乳腺上皮干细胞分化及演变中的表达

为探讨CK5、CK8和Oct-4在乳腺上皮良、恶性增生病变中的表达及其作为标记物分析乳腺导管上皮干细胞分化及演变规律,对41例人乳腺导管上皮良、恶性增生病和10例正常人乳腺组织标本,采用免疫组化S-P法分别检测Oct-4、CK5和CK8的表达,应用SPSS10.0软件进行统计分析。结果表明,CK5在正常乳腺组织、乳腺增生病及乳腺癌中的阳性率呈下降趋势,且存在明显差异(P<0.05),在部分乳腺侵袭性导管癌中,CK5阳性染色主要集中在外层尚未侵袭的基底层细胞中,在肿瘤细胞中没有表达或很少表达;CK8主要在肿瘤细胞中表达,在基底层细胞中完全不表达;Oct-4在正常乳腺组织、乳腺增生病及乳腺侵袭性导管癌中均有表达,无显著性差异(P=0.381)。结论:成人乳腺上皮细胞谱系分化进程中,CK5表达下调,最终缺失,被CK8取代,表明乳腺上皮恶性转化时趋向腺系分化的方向发展;表达Oct-4基因的成人乳腺上皮细胞可能具有定向干细胞的分化特征,是癌变起源的靶细胞。

沙丁胺醇联合无创呼吸机对慢性阻塞性肺病合并呼吸衰竭患者TNF-α、IL-6、IL-8及血清CK-MB活性影响研究

目的探讨沙丁胺醇联合无创呼吸机对慢性阻塞性肺病合并呼吸衰竭患者TNF-α、IL-6、IL-8及血清CK-MB活性的影响。方法收集慢性阻塞性肺病合并呼吸衰竭患者60例,随机分为对照组和实验组,每组各30例,对照组患者给予无创呼吸机治疗,实验组在对照组基础上给予沙丁胺醇治疗,治疗结束后,对所有患者的血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)水平及血清肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme,CK-MB)活性进行检测。结果治疗后,与对照组比较,实验组患者的血清TNF-α水平较低,差异具有统计学意义(P<0.05);实验组患者的血清IL-6、IL-8水平较低(P<0.05);实验组患者的血清CK-MB活性较低(P<0.05)。结论沙丁胺醇联合无创呼吸机能够显著降低慢性阻塞性肺病合并呼吸衰竭患者血清TNF-α、IL-6、IL-8水平及血清CK-MB活性,减轻炎症反应,减少心肌损害。

CK2介导幽门螺杆菌CagA蛋白诱导人胃腺癌上皮细胞内IL-8表达的机制研究

目的探讨蛋白激酶CK2在幽门螺杆菌细胞毒素相关基因A(CagA)蛋白诱导人胃腺癌上皮细胞(AGS)中白细胞介素-8(IL-8)表达中的作用。方法培养人AGS细胞,依据CagA蛋白加入与否分为S1组(加入CagA蛋白)、S2组(未加入CagA蛋白);依据是否转染或加入p65 siRNA、CagA分为A1组(未转染p65 siRNA且未加入CagA)、A2组(转染p65 siRNA但未加入CagA)、A3组(未转染p65 siRNA但加入CagA)、A4组(转染p65siRNA且加入CagA);依据芹菜素(apigenin)、CagA加入与否分为B1组(未加入apigenin和CagA)、B2组(加入apigenin但未加入CagA)、B3组(未加入apigenin但加入CagA)、B4组(加入apigenin和CagA)。根据p65 siRNA转染情况分为A组(转染ConsiRAN但未转染p65 siRNA)、B组(转染p65 siRNA但未转染ConsiRAN);将加入CagA蛋白0、20 min时的细胞分为C组、D组。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测IL-8蛋白表达,蛋白质印迹法(Western blot)检测β-actin、p65和p65-p的表达,采用双荧光素酶报告系统检测相对荧光强度。结果 S1组AGS细胞中IL-8蛋白的表达水平为(871.25±12.89)pg/ml,高于S2组的(119.00±12.70)pg/ml,差异有统计学意义(P﹤0.05)。A1组和A2组细胞的IL-8蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);A4组细胞的IL-8蛋白表达水平明显低于A3组(P﹤0.01)。B组细胞的p65蛋白表达水平低于A组。B1组和B2组细胞的IL-8蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);B4组细胞的IL-8蛋白表达水平明显低于B3组,差异有统计学意义(P﹤0.01)。D组细胞的p65-p蛋白表达水平高于C组,B4组细胞的p65-p蛋白表达水平低于B3组。B1组和B2组细胞的相对荧光强度比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);B4组细胞的相对荧光强度水平明显低于B3组,差异有统计学意义(P﹤0.01)。结论 CK2可能参与了CagA诱导AGS细胞中核因子κB(NF-κB)激活及IL-8表达的过程。