体外培养扩增的人脐血CD34^+细胞形成HPP-CFC的能力

目的 :评价CD34 +细胞体外扩增时高增殖潜能集落形成细胞 (HPP CFC)的变化。方法 :利用mini MACS分离脐血CD34 +细胞 ,流式细胞仪 (FACS)测定细胞纯度 ( 86%～ 95% )。应用含rhSCF、rhIL 3、rhIL 6和rhGM CSF的培养体系扩增CD34 +细胞。分别于培养的第 1,2和 4周收取细胞进行HHP CFC测定 ,测试体系为含重组人SCF、GM CSF、IL 3、IL 6、EPO等细胞因子的半固体甲基纤维素。结果 :测试体系中加入单个细胞因子不能产生HPP CFC ,含rhIL 3和rhGM CSF体系产生的集落小且主要为巨噬细胞集落 ,由所有因子组成的体系产生的集落大而致密 ,包含粒系 3种类型。此外 ,尽管细胞总数显著增加 ,扩增的CD34 +细胞HPP CFC形成率随培养时间的延长而减少。结论 :本方法显示 ,CD34 +细胞体外扩增中可以保持HPP CFC数量。