D-生物素的高效合成研究

以二羧酸为原料,叔胺硫酸盐或叔胺硫酸盐与硫酸的混合物为催化剂,在常压沸点>100℃的有机溶剂中回流反应,同时共沸除水,生成环酸酐;其中,所述催化剂中叔胺部分与硫酸部分的摩尔比为1∶1~1.5。本方法能够有效提高反应效率,最高收率可达99.95%,最高纯度为99.95%,同时大大降低了能耗,减少对设备的腐蚀,具有良好的工业化前景。

d-生物素的不对称全合成研究(Ⅴ)

以二异丁基氢化铝使 (3 a S,6a R) -1 ,3 -二苄基 -四氢 -4H-噻吩并 [3 ,4-d]-咪唑 -2 ,4(1 H) -二酮 (1 )高立体选择性地还原成 (3 a S,4S,6a R) -1 ,3 -二苄基 -4-羟基 -四氢 -1 H-噻吩并 [3 ,4-d]-咪唑 -2 (3 H) -酮 (2 ) ,再经缩合 ,Witting烯化成 (3 a S,6a R) -1 ,3 -二苄基 -四氢 -1 H-噻吩并 [3 ,4-d]咪唑 -2 (3 ) -酮 -4-烯戊酸 (4 ) ,后者经催化氢转移还原、脱苄即得 d-生物素 ,以化合物 1计算总产率为 42 % .

d－生物素的立体专一性全合成研究

对ｃｏｎｆａｉｏｎｅ的ｄ－生物素（１）全合成进行了改进，从半胱氨酸计算，总收率３．７％。５与４－溴代三苯膦丁酸甲酯进行Ｗｉｔｔｉｇ－Ｓｃｈｌｏｓｓｅｒ缩合反应可立体专一性地转化成反式－烯（６）。以叠氮三甲基硅烷代替叠氮化锂亲核进攻９分子中Ｃ３－溴原子，可显著地提高顺式－叠氮内酰胺１０的收率。

d-生物素的不对称全合成研究(Ⅱ)

1,3-二苄基咪唑啉 -2 -酮 -顺 -4 ,5 -二羧酸经脱水、单酯化 ,拆分成 ( 4S,5 R) -顺 -1 ,3-二苄基 -5 -甲氧基羰基 -2 -氧代咪唑啉 -4 -羧酸 ,再经还原环合 ,硫代成 ( 3a S,6a R) -1 ,3-二苄基 -四氢 -4 H-噻吩并 [3,4 -d]咪唑 -2 ,4( 1 H) -二酮 ( 7) ,后者经格氏反应、脱水、还原、裂解环合一锅合成 ( 3a R,8a S,8b S) -1 ,3-二苄基 -2 -氧代 -十氢咪唑 [3,4 -d]噻吩并 [1 ,2 -a]锍溴化物 ( 1 1 ) ,继而经缩合、开环、水解、脱羧、脱苄而得 d-生物素 ( 1 ) ,总收率为 1 4 .5 % .

两种生物素杂质的合成

Two impurities of d-biotin are synthesized:di[3-[(3aS,4S,6aR)-2-oxohexahydrothienoimidazol-4-yl]propyl]acetic acid,4-[(3aS,4S,6aR)-2-oxohexahydrothienoimidazol-4-yl]butane-1,1-dicarboxylic acid.Structure of target compounds are confirmed by 1HNMR.This work further improve the research on the impurities of d-biotin,and can be applied to the quality control and quality assurance of d-biotin.

d-生物素有关物质的HPLC测定

建立了HPLC法测定d-生物素的有关物质。采用C_(18)色谱柱,流动相为0.05%三氟乙酸溶液-乙腈(75:25),检测波长210 nm。d-生物素在10～1000μg/ml浓度范围内线性关系良好,检测限为0.5ng。有关物质的检测限均小于1.0 ng。

d生物素的不对称全合成研究

目的：探索工业生产可行的ｄ生物素的全合成方法。方法和结果：以（１Ｓ，２ Ｓ）（ ＋ ）苏式１（ 对硝基苯基）２氨基１，３丙二醇与顺１ ，３二苄基四氢４Ｈ呋喃并［３，４ｄ］ 咪唑２，４，６三酮（２） 缩合而成的顺１，３二苄基５［（１Ｓ，２Ｓ）（＋ ）苏式１羟甲基２（ 对硝基苯基）２羟乙基］四氢４Ｈ吡咯并［３ ，４ｄ］ 咪唑２，４，６三酮（３） 经高立体选择性还原、水解内酯化成（３ａＳ，６ａＲ）１ ，３二苄基四氢４Ｈ呋喃并［３ ，４ｄ］ 咪唑２，４（１Ｈ）三酮（６），再经硫代、格氏反应、还原制成（３ａＳ，６ａＲ）１ ，３二苄基４羟基４（３乙氧基丙基）四氢４Ｈ噻吩［３，４ｄ］ 咪唑２（３Ｈ）酮（９） ，后者经脱水、还原、裂解环合、脱苄４ 步反应合成（３ａ Ｒ，８ａＳ，８ｂＳ）２氧代十氢咪唑并［４，５ｃ］ 噻吩并［１ ，２ａ］ 锍鎓溴化物（１２） ，继而缩合开环、水解即得ｄ生物素，以２ 计算，总收率２５－７ ％ 。结论：此法原料易得、操作简便、成本较低，适合工业化生产。

肠缺血灌流时异丙酚对肠上皮细胞凋亡的影响

目的:研究缺血再灌流时异丙酚对肠上皮细胞凋亡的影响及可能机制.方法:96只成年♂Wistar大鼠,随机分为假手术组、缺血再灌流+生理盐水组(I/R+NS)和I/R+异丙酚组(I/R+Pr).采用夹闭肠系膜上动脉(SMA)的方法制作肠缺血再灌流模型.以上各组分别在再灌流后0,30,60,120和240 min(每时间点8只)处死动物取肠袋组织.采用病理学方法观察肠上皮细胞损伤指数;原位DNA末端标记法(TUNEL)检测肠上皮细胞凋亡率的变化;免疫组化法检测肠上皮细胞Caspase-3,bcl-2表达的变化.结果:I/R+Pr组与I/R+NS组相比,肠上皮细胞病理变化较轻,肠上皮细胞的凋亡率明显下降(P<0.01),再灌流后0,30,60,120和240 min肠上皮细胞中Caspase-3阳性细胞数明显减少(104.4±5.3 vs 146.4±7.6;97.4±6.2 vs 130.4±7.4;134.4±5.1 vs 170.4±8.1;125.4±6.2 vs 160.4±9.5:101±5.8 vs 120.4±8.2,均P<0.01),而bcl-2阳性细胞数明显增加(13.34±4.12 vs 6.72±2.59;14.96±4.85 vs 8.24±3.13;15.29±5.28 vs 9.63±2.89;10.39±3.61 vs 9.63±2.89;10.39±3.61 vs 5.96±1.93;11.08±4.83 vs 6.87±2.43,均P<0.01).结论:异丙酚能抑制缺血再灌流时肠上皮细胞Caspase-3表达,而增加bcl-2表达,减少肠上皮细胞的凋亡.

酸枣仁、滇枣仁和枳椇中酸枣仁皂甙的含量比较

目的：测定酸枣仁、滇枣仁和枳蓂子的有效成分。方法：使用ＴＬＣ扫描法测定３ 种药材中的酸枣仁皂甙Ａ和Ｂ的含量。结果：酸枣仁含有酸枣仁皂甙Ａ是滇枣仁的２ 倍，前者含的酸枣仁皂Ｂ是后者的１ ．５ 倍。枳蓂子不含酸枣仁皂甙Ａ 和Ｂ。

预混合饲料中D-泛酸钙和D-生物素的UPLC测定

采用超高压高效液相色谱法(HPLC),在最优化条件下,以ACQUITY UPLC BEH C18为色谱柱、甲醇和三氟乙酸为流动相进行等梯度洗脱,可实现对预混合饲料中D-泛酸钙和D-生物素的联检。上述各组分在4 min内完全分离;各组分浓度与峰面积在5～200 mg/mL呈良好线性关系,检测下限(S/N=3)分别为1.5μg/mL和1.5μg/mL。

D-氨基葡萄糖寡聚糖对雏鸡生产性能和主要细菌病防治的研究

目的 :使用甲壳素、N- 6生命素、氨基葡萄糖盐酸盐防治鸡大肠埃希菌病和沙门菌病。方法 :用上述 3种产品作为饲料调节剂对雏鸡进行增重试验和抗细菌感染试验。结果 :与对照组相比 ,N- 6生命素有促进鸡只生长的作用 ,同时 ,上述 3种产品能有效地预防和治疗由大肠埃希菌和沙门菌引起的混合感染。结论 :N- 6生命素防治大肠埃希菌病和沙门菌病效果最好 。

糖耐康改善ZDF大鼠胰岛β细胞凋亡的作用机制研究

目的:探讨糖耐康干预2型糖尿病大鼠(ZDF)胰岛β细胞凋亡的作用及机制。方法:6只雄性ZDF(fa/+)大鼠设为正常对照组,雄性ZDF(fa/fa)大鼠30只设为2型糖尿病成模组。根据体质量及随机血糖将成模组大鼠随机分为5组,即模型组、二甲双胍组、糖耐康高、中、低剂量组。给药前测大鼠空腹血糖值及血清胰岛素值;给药6周再次检测大鼠空腹血糖值及血清胰岛素值并进行比较。采用HE染色观察胰岛形态结构的改变;采用TUNEL法检测各组大鼠胰腺组织中胰岛β细胞凋亡情况;免疫组织法观察细胞死亡信号转导效应酶Caspase-3在胰岛中表达情况。结果:给药6周后,糖耐康高、中、低剂量组均可显著改善ZDF大鼠空腹血糖(P<0.01);糖耐康高、中、低剂量组血清胰岛素值较模型组均有所升高,其中,高、低剂量组有显著性差异(P<0.05);给药组胰岛素抵抗指数较模型组均有所下降,其中,糖耐康高剂量组及二甲双胍组有极显著性差异(P<0.01)。HE染色显示给药组的胰岛细胞形态、结构较模型组有所改善。TUNEL结果显示ZDF(fa/fa)大鼠胰腺组织内均可见胰岛细胞凋亡改变,与模型比,给药组TUNEL阳性表达率均显著性减少(P<0.05)。免疫组化结果显示给药组Caspase-3蛋白表达下降(P<0.05)。结论:糖耐康能有效降低ZDF大鼠胰岛β细胞的凋亡,即对胰岛β细胞有一定的保护作用。

哌醋甲酯对ADHD动物模型SHR大鼠前额叶皮质层细胞凋亡的影响

目的本研究以自发性高血压大鼠(SHR)作为注意缺陷多动障碍(ADHD)动物模型,探讨ADHD动物模型SHR大鼠中是否存在前额叶皮质层细胞凋亡现象,以及哌醋甲酯能否影响大鼠前额叶皮质层细胞的凋亡。方法将SD大鼠作为对照组,SHR大鼠分为两组,每组6只,分别为SHR组和哌醋甲酯组。哌醋甲酯组给予哌醋甲酯(2mg/kg)连续灌胃14天,1次/日,对照组、SHR组给予等体积0.9%氯化钠注射液连续灌胃14天,1次/日,取脑,制作石蜡切片,用TUNEL染色观察前额叶皮质层细胞凋亡情况。结果 SHR组前额叶皮质层细胞凋亡率(17.23±0.61%)较对照组(2.74±0.24%)显著增高(F=-13.902,P<0.05);哌醋甲酯组前额叶皮质层细胞凋亡率(7.82±0.53%)较未经药物干预的SHR组显著减少(F=8.87,P<0.05),但仍然高于对照组(F=-9.048,P<0.05)。结论 ADHD动物模型SHR大鼠前额叶皮质层细胞存在凋亡增高现象,哌醋甲酯可以在一定程度上改善ADHD前额叶皮质层细胞的凋亡。

含四氢噻吩类生物素杂质的合成

Three new impurities of d-Biotin were synthesized:(2S,3S,4S)-5-(3,4-diamino-tetrahydro-thiophen-2-yl)-pentanoic acid,(3aS,4S,6aR)-hexahydro-1-thia-3,4a-diaza-cyclopenta inden-4-one and(3aS,4S,6aR)-4-(5’-Oxo-hexyl)-tetrahydro-thieno-imidazol-2-one.Structures of target compounds were confirmed by NMR and so on.Our work further improved the research on the impurities of d-biotin,and can be applied to the quality control and quality assurance of d-biotin.

(3aS,6aR)-1,3-二苄基-四氢-4H-呋喃并[3,4-d]咪唑-2,4(1H)-二酮的立体选择性合成

以顺-1,3-二苄基-5-[(1S,2S)-(+)-苏式-1-羟甲基-2-(对硝基苯基)-2-羟乙基]-四氢-4H-吡咯并[3,4-d]咪唑-2,4,6-三酮为原料,经单乙酰化、NaBH4还原和酸水解得到标题化合物,与直接还原或是先经双乙酰化再还原的工艺相比,单乙酰化后再还原的选择性高达97.25%。并对单乙酰化物和双乙酰化物结构做了X单晶衍射测定,单乙酰化物的原子空间排布更利于选择性还原。

d-生物素中间体合成工艺改进

通过Zn/TiCl4、H4AlLi/TiCl4、Zn Cu/TiCl3低价钛催化剂比较,选择了稳定的Zn Cu/TiCl3为催化剂,反应制得生物素中间体(6aR) 1,3 二苄基 4 (4 甲氧羰基丁基) 二氢 噻吩并[3,4 d]咪唑 2 酮(Ⅵ)。改用异氰酸苄酯为关环试剂环化合成了(7aR) 3 苯基 6 苄基 1H,3H 咪唑并[1,5 c]噻唑 5,7 二酮(Ⅲ),选用CH3COOH/(CH3CO)2O代替CH3COOH作溶剂,反应时间由17h缩短为3h,产率从75%提高到93%。以L 半胱氨酸盐酸盐为原料,依次以苯甲醛、异氰酸苄酯为关环试剂环化合成Ⅲ,以锌为还原剂于90℃下开环合成了N,N′ 二苄基 L 巯基海因(Ⅳ),经与己二酸单甲酯酰氯于0℃下的酯化反应引入侧链,Zn Cu/TiCl3为催化剂,反应得到Ⅵ,5步反应建立了生物素所需骨架结构,总产率达56%。

D-生物素合成研究进展

D-生物素属于B族维生素,也是合成维生素C的必要物质,最初在酵母的研究过程中被发现,之后与其相关的报道层出不穷。在工业中,D-生物素以化学法合成,但化学法有工艺繁杂以及会对环境造成危害等弊端,而利用生物法合成D-生物素则有工艺简单和环境友好等优点,因此近些年通过微生物合成D-生物素的研究越来越广泛。该文综述了D-生物素的生理作用、化学合成法、生物合成法以及微生物合成D-生物素的研究进展,旨在为以后研究者们对微生物合成D-生物素的研究提供参考。

d-生物素的全合成研究

以L-胱氨酸或L-半胱氨酸的盐酸盐为起始原料,经过10步反应,以超过30%的产率,得到一条新的高效的d-生物素合成路线.从L-胱氨酸开始,通过中间休2的酰胺烷基化得到中间体3,再在过氧酸催化下重排开环生成中间体4,然后经过氧化、还原和缩合等几步建立起生物素的骨架.

应用自动浊度微生物分析仪测定维生素片剂中的生物素

目的 建立应用自动浊度微生物分析仪定量测定多种维生素营养片剂中生物素含量的方法。方法 应用自动浊度微生物分析仪对样品进行自动稀释，自动检测标准溶液和样品溶液中的菌体生长浊度，通过测定细菌生长和繁殖强度间接地测定出样品中的生物素含量：结果方法的线性范围0．05～0．9ng／ml，曲线相关系数r为0．9972，精密度为3，75％，回收率平均值为102．37％。结论 方法操作简单、灵敏度高、处理量大，适合生产企业的批量质量控制和检测。

d－生物素代替玉米浆发酵生产谷氨酸的研究

用ｄ－生物素代替玉米浆的摇瓶发酵实验，筛选出高产酸菌株，测定了ｄ－生物素的亚运量可变范围。比较了单一玉米浆、单一ｄ－生物素与两者各半量发酵结果及不同接种量对产酸的影响。采用ｄ－生物素代替半量玉米浆的中糖发酵工艺应用于生产。结果证明此工艺可行，降低了成本，提高了产酸率，平均产酸率达７．８１％，平均转化率达５３．２％。