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希尔斯山羊草1S^(s)S和3S^(s)S染色体特异dCAPS标记的建立
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作者 倪佳俊 韩冉 +8 位作者 徐文竞 王开 祁广 曾小雪 訾妍 李豪圣 刘建军 汪晓璐 刘成 《山东农业科学》 北大核心 2023年第5期15-21,共7页
希尔斯山羊草是小麦的近缘种,具有抗病、抗逆、抗虫等优异性状,是小麦遗传改良的珍贵基因源。当前,我们创制了一批小麦-希尔斯山羊草杂交种质。然而,由于缺乏分子标记,上述种质无法被有效筛选和鉴定。为了建立希尔斯山羊草染色体特异分... 希尔斯山羊草是小麦的近缘种,具有抗病、抗逆、抗虫等优异性状,是小麦遗传改良的珍贵基因源。当前,我们创制了一批小麦-希尔斯山羊草杂交种质。然而,由于缺乏分子标记,上述种质无法被有效筛选和鉴定。为了建立希尔斯山羊草染色体特异分子标记,本研究通过对希尔斯山羊草基因组重测序,发掘希尔斯山羊草和小麦间单核苷酸多态性(SNP),选择150个多态性位点开发dCAPS标记,结果发现,相比中国春等小麦对照,利用引物AESD23和AESD105经PCR和酶切电泳后分别能在希尔斯山羊草中获得长度不同的多态性条带。利用一套中国春-希尔斯山羊草二体附加系和端体附加系对这些多态性条带进行定位,结果发现,AESD23能在中国春-希尔斯山羊草1S^(s)二体附加系和1S^(s)S端体附加系中扩增出长度为1800 bp的多态性条带,而AESD105能在中国春-希尔斯山羊草3S^(s)二体附加系和3S^(s)S端体附加系中扩增出长度为200 bp和300 bp的多态性条带。对小麦-希尔斯山羊草杂交种质检测发现,AESD23和AESD105均能对小麦-希尔斯山羊草杂交种质进行有效筛选和鉴定。因此,上述3个多态性片段可以作为dCAPS标记用于检测含希尔斯山羊草1S^(s)S或3S^(s)S染色质的材料,为检测和追踪小麦背景中希尔斯山羊草染色质提供了新的检测手段。 展开更多
关键词 小麦 希尔斯山羊草 基因组重测序 SNP分析 dcaps标记
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基于茶树SNP的dCAPS标记体系研究 被引量:4
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作者 张成才 王丽鸳 +4 位作者 韦康 成浩 包云秀 刘本英 汪云刚 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期517-522,共6页
从茶树EST序列中搜寻出候选SNPs位点,在候选SNPs两侧设计测序引物进行PCR扩增,并对扩增产物双向测序验证;然后从每个扩增子中选择一个确证的SNPs,设计dCAPS引物,并进行扩增和酶切验证,将SNPs转化为dCAPS标记;最后,在长叶白毫×福鼎... 从茶树EST序列中搜寻出候选SNPs位点,在候选SNPs两侧设计测序引物进行PCR扩增,并对扩增产物双向测序验证;然后从每个扩增子中选择一个确证的SNPs,设计dCAPS引物,并进行扩增和酶切验证,将SNPs转化为dCAPS标记;最后,在长叶白毫×福鼎大白的F1群体中检测了标记的分离情况。结果发现,20对测序引物中有11对扩增成功,共确证了17个SNPs,占检测总数的54.8%;在设计的11对dCAPS引物中,有8对在长叶白毫、福鼎大白和龙井43等8个品种中表现出多态性,成功转化为dCAPS标记,转化成功率72.7%;8个dCAPS标记中的DCC229和DCC371在长叶白毫和福鼎大白之间表现有多态性,经检测,它们在这2个品种的F1群体中均符合孟德尔1︰1分离。 展开更多
关键词 茶树 EST SNP dcaps
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小麦中基于转录组测序SNP的dCAPS标记的高通量开发及验证 被引量:5
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作者 李磊 贡豪 +1 位作者 顾世梁 李韬 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS 北大核心 2018年第4期86-90,共5页
结合六倍体小麦品系P7001与P216杂交F5代群体中1对相对性状池的二代转录组测序的单核苷酸多态性(SNP)分析结果,应用最近开发的CAPS/dCAPS Designer工具进行批量的CAPS/dCAPS(衍生/限制性内切酶多态性)标记开发,最终筛选20个CAPS/dCAPS... 结合六倍体小麦品系P7001与P216杂交F5代群体中1对相对性状池的二代转录组测序的单核苷酸多态性(SNP)分析结果,应用最近开发的CAPS/dCAPS Designer工具进行批量的CAPS/dCAPS(衍生/限制性内切酶多态性)标记开发,最终筛选20个CAPS/dCAPS标记进行亲本间的多态性验证。结果表明,将二代转录组测序的SNP分析结果和高通量的CAPS/dCAPS标记设计软件相结合能高效地进行多态性分子标记的开发。 展开更多
关键词 小麦 单核苷酸多态性 CAPS/dcaps标记 高通量开发
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大豆胞囊线虫主效抗病基因Rhg4(GmSHMT)的CAPS/dCAPS标记开发和利用 被引量:10
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作者 史学晖 李英慧 +3 位作者 于佰双 郭勇 王家军 邱丽娟 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期1463-1471,共9页
大豆胞囊线虫(soybean cyst nematode,SCN)严重危害世界大豆生产,Rhg4(resistance to Heterodera glycines 4)是控制大豆SCN抗性的2个主效位点之一。本研究针对Rhg4(Gm SHMT)上的2个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP... 大豆胞囊线虫(soybean cyst nematode,SCN)严重危害世界大豆生产,Rhg4(resistance to Heterodera glycines 4)是控制大豆SCN抗性的2个主效位点之一。本研究针对Rhg4(Gm SHMT)上的2个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)位点开发了快速、经济、简便易行的CAPS(Rhg4-389)和d CAPS标记(Rhg4-1165),并用开发的2个标记鉴定了以大豆胞囊线虫应用核心种质为主的193份代表性抗感种质。结果表明,Rhg4-389和Rhg4-1165位点间存在显著连锁不平衡(P=0.0001,r2=0.87),可形成4种单倍型。Rhg4-389-G/Rhg4-1165-T和Rhg4-389-C/Rhg4-1165-A为优势单倍型,稀有单倍型Rhg4-389-G/Rhg4-1165-A和Rhg4-389-C/Rhg4-1165-T是在中国抗源中新发现的单倍型。结合193份种质对SCN 3号小种抗性鉴定分析发现,Rhg4-389-G和Rhg4-1165-T主要存在于抗病种质,它们形成的单倍型对抗病种质鉴定效率可达94.1%。本研究开发了可用于辅助大豆SCN抗性鉴定且方便育种家利用的CAPS/d CAPS标记,且用其摸清了应用核心种质等重要抗源在Rhg4位点的"本底",为育种家有效利用这些优异抗源提供了重要信息。 展开更多
关键词 大豆胞囊线虫 Rhg4 CAPS/dcaps标记 单倍型 分子标记辅助选择 Rhg4
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番茄粉红色果实相关基因的dCAPS和InDel标记开发与应用 被引量:9
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作者 董淑芳 王孝宣 +3 位作者 高建昌 国艳梅 黄泽军 杜永臣 《中国蔬菜》 北大核心 2016年第1期24-29,共6页
采用SuperBSA方法分别构建100份粉红色番茄材料和100份红色番茄材料的DNA混合池,对测序结果的SNP位点进行分析。结果表明:在1号染色体上的127个SNP位点中,有6个与番茄果实颜色高度相关,其中1个位点与粉红色果实高度相关。利用该SNP位点... 采用SuperBSA方法分别构建100份粉红色番茄材料和100份红色番茄材料的DNA混合池,对测序结果的SNP位点进行分析。结果表明:在1号染色体上的127个SNP位点中,有6个与番茄果实颜色高度相关,其中1个位点与粉红色果实高度相关。利用该SNP位点开发了1个共显性d CAPS标记,在红色、粉红色和杂合F_13种基因型之间的多态性较好。同时,利用番茄重测序数据分析番茄起源时发现,在粉红色番茄中SIMYB12基因的上游存在1个603bp的缺失,利用该缺失突变位点开发了1个共显性In Del标记,在红色、粉红色和杂合F_13种基因型之间也表现出较好的多态性。利用新开发的2个标记对F_2群体进行遗传分析,鉴定结果与田间表型观察结果符合度均达到95%以上,表明这2个标记可以用于番茄苗期分子标记辅助选择。 展开更多
关键词 番茄 粉红色果实 dcaps INDEL 分子标记
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基于SNP位点快速鉴定药用、斑点野生稻的dCAPS标记体系的建立 被引量:3
6
作者 赵红敬 许瑾 +2 位作者 高必达 徐涛 朱水芳 《分子植物育种》 CAS CSCD 2011年第2期169-173,共5页
为防止野生稻重要基因资源流失,便于口岸准确快速鉴定,探讨了基于SNP位点建立dCAPS分子标记体系。采用生物信息学软件寻找了药用野生稻和斑点野生稻上7个基因碱基序列上适合设计错配引物的SNP位点,设计合成适当的错配引物进行PCR扩增,... 为防止野生稻重要基因资源流失,便于口岸准确快速鉴定,探讨了基于SNP位点建立dCAPS分子标记体系。采用生物信息学软件寻找了药用野生稻和斑点野生稻上7个基因碱基序列上适合设计错配引物的SNP位点,设计合成适当的错配引物进行PCR扩增,选择相应的限制性内切酶进行酶切。在这2种野生稻DNA的matk基因上分别找到1个合适的SNP位点,设计了3对错配引物,PCR后3种相应的限切酶都可以特异性地切开PCR产物,将药用野生稻或斑点野生稻与栽培稻和其它野生稻区分开来。本结果证明了dCAPS分子标记可以在口岸查验上应用。 展开更多
关键词 SNP 错配引物 水稻 dcaps
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桃花型性状dCAPs标记的开发与应用
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作者 高帆 冯贝贝 +6 位作者 宋聪豪 连晓东 郑先波 张海朋 王小贝 谭彬 冯建灿 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 2022年第5期770-778,815,共10页
【目的】为准确、快速地鉴别桃铃型花和蔷薇型花,开发与桃花型性状相关的dCAPs标记。【方法】根据花型性状基因定位结果,其关联度最高的SNP位点位于PpB3-1基因启动子区域,基于SNP位点开发含有内切酶SalI-HF的dCAPs标记,在1个桃杂交群体... 【目的】为准确、快速地鉴别桃铃型花和蔷薇型花,开发与桃花型性状相关的dCAPs标记。【方法】根据花型性状基因定位结果,其关联度最高的SNP位点位于PpB3-1基因启动子区域,基于SNP位点开发含有内切酶SalI-HF的dCAPs标记,在1个桃杂交群体(73个杂种单株)和1个桃自然群体(102份种质资源)中扩增,用SalI-HF限制性内切酶对特异扩增片段进行酶切,用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方式对酶切产物进行检测分析。【结果】铃型花DNA扩增出来的条带可以被酶切,产生两种类型特异片段:308和282 bp两条特异片段(杂合显性,A/C)和282 bp一条特异片段(纯合显性,C/C);蔷薇型花DNA扩增出来的条带不能被酶切,产生一条308 bp特异片段(纯合隐性,A/A)。该标记在桃杂交群体和自然群体中的检测符合率均为100%。【结论】桃花型性状的dCAPs标记B3-1可用于桃花型性状分子标记辅助选择育种。 展开更多
关键词 花型 dcaps标记
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dCAPS markers developed for nitrate transporter genes TaNRT2L12s associating with 1000-grain weight in wheat 被引量:2
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作者 HUANG Jun-fang LI Long +4 位作者 MAO Xin-guo WANG Jing-yi LIU Hui-min LI Chao-nan JING Rui-lian 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2020年第6期1543-1553,共11页
Nitrate transporters(NRTs)are regulators of nitrate assimilation and transport.The genome sequences of TaNRT2L12-A,-B and-D were cloned from wheat(Triticum aestivum L.),and polymorphisms were analyzed by sequencing.Ta... Nitrate transporters(NRTs)are regulators of nitrate assimilation and transport.The genome sequences of TaNRT2L12-A,-B and-D were cloned from wheat(Triticum aestivum L.),and polymorphisms were analyzed by sequencing.TaNRT2L12-D in a germplasm population was highly conserved.However,38 single nucleotide polymorphisms(SNPs)in TaNRT2L12-A coding region and 11 SNPs in TaNRT2L12-B coding region were detected.Two derived cleaved amplified polymorphic sequences(dCAPS)markers A-CSNP1 and A-CSNP2 were developed for TaNRT2L12-A based on SNP-351 and SNP-729,and three haplotypes were identified in the germplasm population.B-CSNP1 and B-CSNP2 were developed for TaNRT2L12-B based on SNP-237 and SNP-1227,and three haplotypes were detected in the germplasm population.Association analyses between the markers and agronomic traits in 30 environments and phenotypic comparisons revealed that A-CSNP2-A is a superior allele of shorter plant height(PH),length of penultimate internode(LPI)and peduncle length(PL),B-CSNP2-G is a superior allele of higher grain number per spike(GNS).Hap-6B-1 containing both superior alleles B-CSNP1-C and B-CSNP2-A is a superior haplotype of 1 OOO-grain weight(TGW).Expression analysis showed that TaNRT2L12-B is mainly expressed in the root base and regulated by nitrate.Therefore,TaNRT2L12 may be involved in nitrate transport and signaling to regulate TGW in wheat.The superior alleles and dCAPS markers of TaNRT2L12-A/B are beneficial to genetic improvement and germplasm enhancement with molecular markers-assisted selection. 展开更多
关键词 TRITICUM AESTIVUM L. TaNRT2L12 association analysis single NUCLEOTIDE POLYMORPHISM dcaps MARKER haplotypes
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结球甘蓝无蜡粉亮叶性状dCAPS标记引物优化
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作者 王超 付天姿 +1 位作者 张晓烜 李秀乐 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期33-39,共7页
研究以野生型结球甘蓝98-1030和无蜡粉亮叶突变型98-1030作为父母本材料,杂交得到F_(1)代,将父母本作全基因组测序,根据所得区间内非同义SNP位点,共设计20对dCAPS引物,命名为DC01~DC20,利用亲本及F1代筛选引物。PCR扩增结果表明,有10对d... 研究以野生型结球甘蓝98-1030和无蜡粉亮叶突变型98-1030作为父母本材料,杂交得到F_(1)代,将父母本作全基因组测序,根据所得区间内非同义SNP位点,共设计20对dCAPS引物,命名为DC01~DC20,利用亲本及F1代筛选引物。PCR扩增结果表明,有10对dCAPS引物扩增出条带,限制性内切酶鉴定表明,其中有8对引物PCR产物可酶切产生特异性片段。 展开更多
关键词 结球甘蓝 dcaps分子标记 SNP 引物
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AL型三系交小麦不育相关基因dCAPs标记开发与应用
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作者 孔德真 聂迎彬 +4 位作者 徐红军 穆培源 崔凤娟 桑伟 田笑明 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2023年第10期3336-3340,共5页
为快速、准确鉴别出不育系中混入的保持系种子数量,确保不育系种子繁殖纯度。本研究以3对育性稳定的不育系和其同型保持系为试验材料,采用Illumina wheat 90K芯片技术,对其SNP差异位点进行分析,设计了与不育基因相关的SNP引物,在此基础... 为快速、准确鉴别出不育系中混入的保持系种子数量,确保不育系种子繁殖纯度。本研究以3对育性稳定的不育系和其同型保持系为试验材料,采用Illumina wheat 90K芯片技术,对其SNP差异位点进行分析,设计了与不育基因相关的SNP引物,在此基础上开发了dCAPs标记,并采用杂交小麦杂交种和恢复系为检测材料对d CAPs分子标记的可靠性进行了验证。结果表明,从3对不育系和其同型保持系材料中获得一个共有SNP差异位点。根据差异位点开发了含有内切酶XmnⅠ的dCAPs标记,对含有不育基因材料进行dCAPs标记检测,表明该标记为AL型三系杂交小麦不育基因检测较理想的分子标记,为杂交小麦遗传基础研究及种子纯度检测提供了可靠工具。 展开更多
关键词 杂交小麦 不育基因 dcaps标记 90K芯片
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胡柚新品种01-7的AS-PCR和d CAPS标记开发与应用
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作者 吴伊静 张慧艺 +5 位作者 苗长久 汪丽霞 杨兴良 陈文博 徐昌杰 陈昆松 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1310-1321,共12页
【目的】挖掘胡柚新品种01-7和普通胡柚间的差异单核苷酸多态性(SNP),据此开发可区分01-7与其他胡柚的分子标记。【方法】对01-7a和普通胡柚ZZ(祖宗树)进行全基因组重测序,利用生物信息学分析方法挖掘两份材料间的纯合SNP。采用PCR、克... 【目的】挖掘胡柚新品种01-7和普通胡柚间的差异单核苷酸多态性(SNP),据此开发可区分01-7与其他胡柚的分子标记。【方法】对01-7a和普通胡柚ZZ(祖宗树)进行全基因组重测序,利用生物信息学分析方法挖掘两份材料间的纯合SNP。采用PCR、克隆结合Sanger测序对SNP的正确性进行验证,进而开发等位基因特异PCR(AS-PCR)和衍生酶切扩增多态性(dCAPS)分子标记体系,最后应用12份胡柚材料就AS-PCR和dCAPS分子标记的普适性进行评估。【结果】对01-7a和普通胡柚ZZ重测序原始数据进行过滤,共获得高质量碱基数36.06 Gb。利用生物信息学手段挖掘出一个纯合SNP:Chr1_7111834_G/A。01-7a和普通胡柚ZZ在该SNP位点的基因型分别是A/A和G/G,这一结果得到了经典的基因克隆-Sanger测序确认。基于此SNP开发了AS-PCR和dCAPS分子标记,经对12份胡柚材料测试,表现符合预期:AS-PCR-F1在所有4份01-7中扩增出特异条带,而在其他胡柚材料中无扩增;AS-PCR-F2在01-7中无扩增,在其他胡柚材料(脆红除外)中扩增出特异条带;所有4份01-7材料在dCAPS分析中出现酶切条带,而在其他胡柚材料(脆红除外)中不被酶切。脆红因突变产生天然的酶切识别位点而被酶切。经典的基因克隆-Sanger测序结果确认两种标记正确区分了基因型,并发现脆红有着不同于其他胡柚的分子标记条带是由于它在该SNP位点侧翼还有额外的序列变异。【结论】基于全基因组重测序数据挖掘出01-7a胡柚和普通胡柚ZZ间的一个纯合SNP,据此开发了ASPCR和dCAPS分子标记,该两标记可区分01-7、脆红、夏红和其他胡柚。 展开更多
关键词 胡柚 全基因组重测序 SNP AS-PCR dcaps
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谷子SiSAP8基因的克隆及dCAPS标记开发 被引量:1
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作者 王亦学 郝曜山 +3 位作者 张欢欢 董艳辉 王晓清 孙毅 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第15期4997-5002,共6页
谷子是中国北方重要的耐旱杂粮作物。胁迫相关蛋白是一类具有A20和(或) AN1结构域的锌指蛋白,广泛参与植物对非生物胁迫的响应。本研究从‘晋谷20’中克隆得到谷子SiSAP8基因,该基因编码区513 bp,编码170个氨基酸,分子量为18.20 kD,等... 谷子是中国北方重要的耐旱杂粮作物。胁迫相关蛋白是一类具有A20和(或) AN1结构域的锌指蛋白,广泛参与植物对非生物胁迫的响应。本研究从‘晋谷20’中克隆得到谷子SiSAP8基因,该基因编码区513 bp,编码170个氨基酸,分子量为18.20 kD,等电点为8.28,包含1个A20和1个AN1结构域。在对该基因序列进行多态性分析,共发现5个SNP位点和1个InDel,其中编码区有1处核苷酸变异位点(G/T)为非同义突变,使得缬氨酸变成了苯丙氨酸。利用第81位的SNP位点(A/G)开发了dCAPS标记,命名为‘SNP-81’,该标记的开发为后期功能鉴定及关联分析提供了依据。 展开更多
关键词 谷子(Setaria italica) SiSAP8 多态性 dcaps标记开发
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基于珙桐SNP位点的dCAPS标记开发 被引量:2
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作者 许瑾 高妍 +3 位作者 杨碧 宋云 李明福 陈乃中 《生物资源》 CAS 2018年第4期334-338,共5页
本研究收集了珙桐、喜树等19份植物材料,运用分子生物学和生物信息学手段比对分析了rpoB,rpoC,matK等8个基因碱基序列上的单核苷酸多态性(SNP)位点,在atpF-atpH基因上找到了合适的SNP位点并设计了dCAPS引物,经PCR扩增和酶切验证后,将... 本研究收集了珙桐、喜树等19份植物材料,运用分子生物学和生物信息学手段比对分析了rpoB,rpoC,matK等8个基因碱基序列上的单核苷酸多态性(SNP)位点,在atpF-atpH基因上找到了合适的SNP位点并设计了dCAPS引物,经PCR扩增和酶切验证后,将SNP转化为衍生型酶切扩增多态性序列(d CAPS)标记,可促进SNP标记在珙桐的遗传图谱构建、基因定位、种质资源鉴定、遗传多样性研究等领域的应用。 展开更多
关键词 单核苷酸多态性(SNP) 内切酶 珙桐 衍生型酶切扩增多态性序列(dcaps)
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白菜类作物BrFLC5与开花时间相关的dCAPs标记开发 被引量:8
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作者 张学铭 刘博 +3 位作者 胡云艳 刘静 王晓武 武剑 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期2035-2042,共8页
为了揭示BrFLC5对白菜类作物抽薹开花的作用机制,克隆了12份开花习性不同的白菜类作物BrFLC5基因exon2~exon4特异序列,分析发现在exon3的Pi3+1存在G–A变异,并开发了dCAPs标记。通过对来自10个不同栽培种群的93份材料进行开花时间调查... 为了揭示BrFLC5对白菜类作物抽薹开花的作用机制,克隆了12份开花习性不同的白菜类作物BrFLC5基因exon2~exon4特异序列,分析发现在exon3的Pi3+1存在G–A变异,并开发了dCAPs标记。通过对来自10个不同栽培种群的93份材料进行开花时间调查和基因型检测,发现该基因的分子标记与开花时间表型显著相关(P【0.05)。因此,用该标记可以进行抽薹开花分子标记辅助选择育种。 展开更多
关键词 白菜类 抽薹开花时间 BrFLC5 dcaps标记
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鸡TLR1A基因正选择nsSNP与沙门氏菌易感性的关联性研究 被引量:1
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作者 孟婕 张传生 +5 位作者 张夕霏 周泽宇 张贝 李可 李祥龙 耿立英 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期136-142,共7页
为探究鸡TLR1A基因正选择nsSNP位点与沙门氏菌易感性的关联,挖掘其潜在的功能性位点,本研究利用多种生物信息学方法对ChTLR1A的21个nsSNP位点及基因的选择压力进行综合分析,筛选ChTLR1A正选择nsSNP功能性位点,深入分析其与鸡沙门氏菌易... 为探究鸡TLR1A基因正选择nsSNP位点与沙门氏菌易感性的关联,挖掘其潜在的功能性位点,本研究利用多种生物信息学方法对ChTLR1A的21个nsSNP位点及基因的选择压力进行综合分析,筛选ChTLR1A正选择nsSNP功能性位点,深入分析其与鸡沙门氏菌易感性之间的相关性。结果显示,rs739087452(I388L)和rs313678806(C815R)在种上及种内均受到正选择作用,且rs739087452(I388L)位点的变异使其蛋白稳定性降低。rs313678806(C815R)与鸡沙门氏菌的易感性显著相关(P<0.001),C/C基因型为沙门氏菌抵抗型,表明rs313678806(C815R)可能是影响鸡沙门氏菌易感性的重要功能性SNP。本实验结果可为TLR1A基因标记在鸡抗病育种中的利用提供参考依据。 展开更多
关键词 TLR1A nsSNP 沙门氏菌 dcaps 正选择
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西瓜枯萎病菌生理小种1抗性基因连锁标记开发 被引量:20
16
作者 张屹 张海英 +5 位作者 郭绍贵 任毅 张洁 耿丽华 梁志怀 许勇 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期2085-2093,共9页
【目的】开发与栽培西瓜枯萎病菌生理小种1抗性基因Fon-1紧密连锁的分子标记,为开展西瓜抗枯萎病分子辅助育种提供技术支撑。【方法】以栽培西瓜抗枯萎病品种Calhoun Gray为父本,感病品种Black Diamond为母本杂交获得的F2分离群体为供... 【目的】开发与栽培西瓜枯萎病菌生理小种1抗性基因Fon-1紧密连锁的分子标记,为开展西瓜抗枯萎病分子辅助育种提供技术支撑。【方法】以栽培西瓜抗枯萎病品种Calhoun Gray为父本,感病品种Black Diamond为母本杂交获得的F2分离群体为供试材料,采用BSA法对Fon-1基因进行区间定位。依据11份栽培西瓜重测序信息,获取位于定位区间内的候选SNP位点。针对候选SNP位点设计CAPS/dCAPS标记,通过F2代分离群体和种质资源验证上述标记与Fon-1基因的连锁关系。【结果】通过BSA法,将Fon-1基因定位于1号染色体15 cM区间内。利用候选SNP位点信息,开发3个CAPS/dCAPS标记7716_fon、7419_fon和4451_fon,F2代分离群体以及164份西瓜育种材料验证显示,上述3个标记与Fon-1基因的连锁距离分别为0.8、1.0和2.8 cM。【结论】利用栽培品种Calhoun Gray的抗性遗传机制,开发的3个CAPS/dCAPS标记可以有效区分栽培西瓜对枯萎病菌生理小种1的抗病、感病性,为栽培西瓜品种枯萎病菌生理小种1抗性基因快速应用于栽培品种枯萎病抗性改良建立有效的技术手段。 展开更多
关键词 西瓜 枯萎病 生理小种1 Fon-1基因 CAPS dcaps标记
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看麦娘对甲基二磺隆靶标抗性的快速检测 被引量:5
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作者 郭文磊 白霜 +2 位作者 池艳艳 冯莉 王金信 《农药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期178-184,共7页
甲基二磺隆是防除小麦田看麦娘Alopecurus aequalis等禾本科杂草的主要除草剂品种之一,但目前中国山东、江苏及安徽等地已有部分看麦娘种群对其产生了抗性。ALS基因197位点突变是看麦娘对甲基二磺隆产生抗性的重要机理,根据突变型和野... 甲基二磺隆是防除小麦田看麦娘Alopecurus aequalis等禾本科杂草的主要除草剂品种之一,但目前中国山东、江苏及安徽等地已有部分看麦娘种群对其产生了抗性。ALS基因197位点突变是看麦娘对甲基二磺隆产生抗性的重要机理,根据突变型和野生型看麦娘在197位点处碱基序列的不同,本研究设计出了一种衍生性酶切扩增多态性序列(d CAPS)分子标记方法,可用于197位点突变的快速检测。通过在引物D197F序列的3′端引入一个错配碱基,扩增所得不同种群看麦娘的ALS片段经限制性内切酶Bam H I酶切后表现出多态性:野生敏感型分别产生了200和36 bp的2个条带;纯合突变型因无法被切开,只有236 bp的一个条带;而杂合突变型则同时产生了上述3个条带。该d CAPS检测结果准确、可靠,与经典的整株水平测定结果一致,并且可同时检测197位点上任一形式的突变。研究结果可为看麦娘等禾本科杂草对甲基二磺隆靶标抗性的快速检测提供理论依据。 展开更多
关键词 看麦娘 甲基二磺隆 靶标抗性 ALS基因 突变 dcaps
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大豆7S球蛋白α'亚基缺失新种质中黄608的分子鉴定 被引量:2
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作者 李俊英 孙如建 +4 位作者 李忠峰 魏中艳 任玉龙 王俊 邱丽娟 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期18-25,共8页
大豆7S球蛋白α'亚基含量与大豆的营养品质和加工特性关系密切。本研究利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹法(Western blot)从中品661的EMS突变库中筛选出α'亚基缺失突变体中黄608。利用中黄608与登科1号创建了一个由... 大豆7S球蛋白α'亚基含量与大豆的营养品质和加工特性关系密切。本研究利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹法(Western blot)从中品661的EMS突变库中筛选出α'亚基缺失突变体中黄608。利用中黄608与登科1号创建了一个由210个个体组成的F2分离群体。遗传分析表明,α'亚基缺失由1对隐性单基因控制。利用连锁分析方法将该基因定位于第10染色体标记SSR10-1489与SSR10-1612之间,其中,包括控制α'亚基合成基因Cgy-1(Glyma.10G246300),序列分析发现,中黄608在Cgy-1第1外显子第84个碱基发生单碱基突变(G84→A84),导致氨基酸翻译提前终止。根据新发现的变异位点开发了共显性分子标记,并检测F2个体基因型,结果表明, Cgy-1基因型与α'亚基表型共分离。本研究不仅为大豆优质育种提供了新材料,同时也为分子育种提供了技术支持。 展开更多
关键词 大豆 α'亚基 突变体 7S球蛋白 dcaps标记
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白菜抗芜菁花叶病毒(TuMV)鉴定及抗源筛选
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作者 李国亮 张淑江 +3 位作者 李菲 张慧 章时蕃 孙日飞 《园艺与种苗》 CAS 2018年第4期6-10,共5页
[目的]筛选出抗芜菁花叶病毒(Tu MV)的白菜种质资源。[方法]选取8份白菜高代自交系种质材料,在3叶期人工磨擦接种Tu MV-C4株系,进行抗/感病表型调查、d CAPS功能标记筛选以及ELISA试验鉴定。[结果]1600011-1、1600043-3、1600045-3和160... [目的]筛选出抗芜菁花叶病毒(Tu MV)的白菜种质资源。[方法]选取8份白菜高代自交系种质材料,在3叶期人工磨擦接种Tu MV-C4株系,进行抗/感病表型调查、d CAPS功能标记筛选以及ELISA试验鉴定。[结果]1600011-1、1600043-3、1600045-3和1600331-3为Tu MV感病材料;1600031-2、1600067-2、1600105-1和1600485-2为Tu MV抗病材料。[结论 ]研究鉴定了大白菜抗Tu MV的性状,为大白菜抗Tu MV育种提供了抗源材料。 展开更多
关键词 白菜 TUMV dcaps 种质资源 鉴定 筛选
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茶氨酸合成酶基因的SNP挖掘和遗传定位 被引量:4
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作者 李小杰 马建强 +1 位作者 姚明哲 陈亮 《茶叶科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期251-257,共7页
茶氨酸合成酶(Theanine synthetase,TS)基因是茶树茶氨酸代谢过程中的关键酶基因。本研究以氨基酸含量差异明显的亲本及其杂交所得F_1子代为研究材料,克隆TS基因的c DNA序列,挖掘其SNPs位点,并成功将杂合SNP位点定位在遗传连锁群上。研... 茶氨酸合成酶(Theanine synthetase,TS)基因是茶树茶氨酸代谢过程中的关键酶基因。本研究以氨基酸含量差异明显的亲本及其杂交所得F_1子代为研究材料,克隆TS基因的c DNA序列,挖掘其SNPs位点,并成功将杂合SNP位点定位在遗传连锁群上。研究结果显示,通过序列比对在亲本间检测到3个SNPs,验证得到1个杂合的位点SNP735。将此位点成功转化为dCAPS标记,该标记在子代中的基因型分离比为1∶1,利用该群体已构建的茶树遗传图谱进行遗传定位,将dCAPS标记定位在连锁群LG03上,相邻标记为TM299和TM517。联合此标记及其相邻标记与游离氨基酸总含量和茶氨酸含量进行统计分析,表明具有显著的相关性。 展开更多
关键词 茶树 TS SNP dcaps标记 定位 茶氨酸
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