银杏叶聚戊烯醇抗Aβ_(25-35)介导dPC12细胞损伤的保护机制

目的:研究银杏叶聚戊烯醇(GP)抗Aβ_(25-35)诱导dPC12细胞损伤的保护机制。方法:以鼠肾上腺嗜铬细胞瘤单克隆细胞系(PC12细胞)为研究对象,通过LDH比色法检测GP对Aβ_(25-35)处理后dPC12细胞存活率的影响;流式细胞术检测不同浓度GP对dPC12细胞凋亡的影响;应用活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)试剂盒检测Aβ_(25-35)对dPC12细胞的氧化损伤,并研究GP的抗氧化作用及其机制;RT-PCR法检测Bax、Bcl-2和Caspase-3在mRNA水平的表达,并采用Western blot法检测Bax、Bcl-2、Caspase-3及Cleaved Caspase-3等凋亡相关因子在蛋白水平的表达。结果:GP可显著降低LDH漏出率以及细胞内ROS水平和MDA含量,对dPC12细胞有显著的抗氧化作用,具有显著的量效关系;GP对Aβ_(25-35)引起的dPC12细胞凋亡有一定的抑制作用,以高剂量组作用显著;GP能显著下调Aβ_(25-35)诱导损伤dPC12细胞内Caspase-3、Bax mRNA水平,并上调Bcl-2 mRNA水平,Bax/Bcl-2 mRNA比值降低,抑制细胞凋亡;GP能降低Aβ_(25-35)诱导损伤dPC12细胞内Caspase-3、Bax蛋白表达,升高Bcl-2蛋白表达,降低Bax/Bcl-2比值,抑制凋亡执行因子Caspase-3活化,从而抑制细胞凋亡。结论:GP可减少Aβ_(25-35)致损伤dPC12细胞的凋亡,其作用可能与其抗氧化作用和抑制细胞凋亡途径激活有关。

银杏叶聚戊烯醇对Aβ_(25-35)诱导dPC12细胞损伤的保护作用研究

目的:研究银杏叶聚戊烯醇(GP)对β淀粉样肽25-35(Aβ_(25-35))诱导dPC12细胞损伤的保护作用,为其用于阿尔茨海默病(AD)的治疗提供参考。方法:以神经生长因子(NGF)诱导PC12细胞分化为具有神经活性的dPC12细胞后,将dPC12细胞分为正常对照组(DMSO培养基)、Aβ_(25-35)处理组(DMSO培养基)和GP试验组(分别含25、50、100、200、400μg/mL GP的DMSO培养基),培养24 h后,Aβ_(25-35)处理组和GP试验组细胞均加入25μmol/L Aβ_(25-35)诱导细胞损伤(即复制AD细胞模型),24 h后采用MTT法测定细胞存活率。另取细胞分为正常对照组(DMSO培养基)、Aβ_(25-35)处理组(DMSO培养基)和GP试验组(分别含25、50、100、200μg/mL GP的DMSO培养基),同法处理后检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)水平。结果:与Aβ_(25-35)处理组比较,50、100、200、400μg/m L GP试验组dPC12细胞的存活率明显升高(P<0.05或P<0.01),100、200μg/mL GP试验组细胞培养液中LDH、ROS和MDA水平以及50μg/m L GP试验组细胞培养液中ROS水平均显著降低(P<0.05或P<0.01),且呈一定的浓度依赖性。结论:GP对Aβ_(25-35)致dPC12损伤有一定的保护作用,为一种潜在的AD治疗药物。