代综方对3T3-L1脂肪细胞分化及相关基因表达的影响

目的:研究代综方(Dai Zong Fang,DZF)对3T3-L1脂肪细胞分化及分化过程中相关基因表达的影响。方法:体外培养3T3-L1前脂肪细胞,鸡尾酒式诱导脂肪细胞分化,给予不同浓度DZF干预6 d。BODIPY493/503与DAPI双荧光染色观察脂肪细胞分化情况;甘油磷酸氧化酶-过氧化物酶法测定细胞内甘油三酯(triglyceride,TG)含量;RT-PCR检测CCAAT增强子结合蛋白-α(CCAAT enhancer binding protein-α,C/EBP-α)、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferator activated receptor-γ,PPAR-γ)、乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-Co A carboxylase,ACC)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthetase,FAS)的m RNA表达;Western blot法检测PPAR-γ、C/EBP-α的蛋白表达。结果:DZF抑制脂肪细胞分化,降低细胞内TG含量,并呈剂量依赖效应;与对照组比较,DZF大剂量组明显下调ACC的m RNA表达(P<0.05),DZF小中大剂量均明显下调FAS的m RNA表达(P<0.01);与对照组比较,DZF中、大剂量组明显下调C/EBPα、PPAR-γ的m RNA表达(P<0.01),Western蛋白表达结果与m RNA结果一致。结论:DZF能够明显抑制3T3-L1脂肪细胞的分化程度,其机制可能与下调C/EBPα、PPAR-γ、ACC、FAS基因的表达有关。

代综方对C2C12骨骼肌细胞葡萄糖摄取及GLUT4蛋白表达的影响

目的:研究代综方(dai zong fang,DZF)对骨骼肌细胞葡萄糖摄取及葡萄糖转运体4(glucose transporter 4,GLUT4)蛋白表达的影响。方法:采用含2%马血清(horse serum,HS)的DMEM培养液诱导C2C12骨骼肌细胞分化为肌管,荧光标记的葡萄糖类似物2-NBDG测定葡萄糖摄取,对2-NBDG的量效时效关系进行测定;采用不同剂量DZF干预分化的C2C12细胞,检测其对细胞基础状态及胰岛素刺激状态下葡萄糖摄取的影响;Western blot检测DZF对C2C12细胞GLUT4总蛋白表达及膜转位的影响。结果:在基础状态或胰岛素刺激下,DZF低、中、高剂量均可提高骨骼肌葡萄糖摄取,差异有统计学意义(P<0.05)。基础状态下,DZF能促进GLUT4总蛋白及膜转位蛋白的表达(P<0.05);胰岛素刺激状态下,DZF对GLUT4总蛋白表达无显著影响(P>0.05),但仍可促进GLUT4膜转位蛋白的表达(P<0.05)。结论:DZF可增加骨骼肌细胞葡萄糖摄取,具有类胰岛素作用,其作用机制可能与促进GLUT4蛋白向细胞膜转位有关。

双轨政治与治世理想——《明夷待访录》社会治理思想论析

社会治理如何容纳多元主体是当前的重要理论问题。本文以黄宗羲重要的政治思想作品《明夷待访录》为研究对象,重新解构了书中的政治秩序和社会治理思想。从费孝通先生"双轨政治"的角度,指出黄宗羲通过明确君主本职与臣道,提出"分治"思想调整政府权力系统关系,为社会治理争取空间;通过强化学校的"治统"地位,将学校设计成为一个具有相对自主性、组织化及制度化的"治教合一"的社会治理机构,最终建构一种健全持久的双轨政治,即通过新型学校设计引入多元主体参与社会治理,实现政治秩序从失衡到双轨化的调整。

论黄宗羲撰写《明夷待访录》之动机

《明夷待访录》是黄宗羲在反清复明已成泡影的情况下撰写而成的。章太炎认为黄氏作此书是欲待清廷之下访。梁启超认为黄氏作此书是为代清复明的君主提供治国之大法。实际上 ,黄宗羲作此书的动机是 :总结亡明的历史经验教训 ,企图从根本上改造封建专制主义统治的弊病 ,为理想中的圣君明主提供治国之大法。

代综方对3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗模型瘦素、抵抗素及肿瘤坏死因子α的影响

目的观察中药代综方对棕榈酸(Palmitic acid,PA)诱导胰岛素抵抗(Insulin resistance,IR)的3T3-L1脂肪细胞中细胞因子瘦素、抵抗素、肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)的影响。方法采用传统“鸡尾酒式”诱导3T3-L1前脂肪细胞分化成熟,用0.5 mmol/L PA建立IR模型。分为空白对照组、模型组、代综方低浓度组(含代综方生药量0.5 mg/ml)、代综方高浓度组(含代综方生药量2.0 mg/ml),干预48 h。葡萄糖氧化酶法检测培养上清中的葡萄糖浓度,计算葡萄糖基础消耗量(G_(Basic))和胰岛素刺激下消耗量(G_(Ins)),评价胰岛素敏感性指数(ISI)。ELISA检测上清中瘦素、抵抗素、TNF-α的含量,Real-Time PCR检测瘦素、抵抗素、TNF-α的mRNA表达。结果与空白对照组比较,模型组GIns、ISI均明显降低(P<0.01);与模型组比较,代综方高、低浓度组G_(Basic)、G_(Ins)、ISI均明显升高(P<0.05,P<0.01),且代综方高浓度组G_(Basic)、G_(Ins)、ISI较代综方低浓度组明显升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,代综方高浓度组3T3-L1脂肪细胞上清中瘦素的含量明显增加(P<0.01),且抵抗素、TNF-α的含量明显减少(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,代综方高浓度组3T3-L1脂肪细胞瘦素mRNA表达水平明显升高(P<0.01),且代综方低浓度和高浓度组抵抗素、TNF-αmRNA表达水平均明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论代综方能够增加PA诱导的IR脂肪细胞葡萄糖消耗,提高胰岛素敏感性,同时上调瘦素水平,降低抵抗素、TNF-α水平。