Preparation of Polyclonal Antisera of Dairy Cow S100A12 Protein

[Objective] This study aimed to prepare dairy cow anti-S100A12 antisem and develop a highly effective and sensitive immunological detection reagent for further investigation of the functions of dairy cow S100A12. [Method] Purified S100A12 protein was respectively emulsified with Freund＇s complete adjuvant and Freund＇s incomplete adjuvant as the antigen for immunizing New Zealand white rabbits to prepare the polyclonal antisera. The titer was detected using agar double diffusion assay and indirect enzyme-linked immunoserbent assay （ELISA） and the specificity was determined with Western Blot. [ Result ] The titer of anti- S100A12 antisera was 1： 8 as determined by agar double diffusion assay and over 1：409 600 by ELISA. Western Blot result showed that the polyclonal antisera could be specifically combined with S100A12 protein. [ Conclusion] The results indicated that anti-S100A12 polyclonal antibody with high fiter and high specificity was successfully obtained, which provided a novel tool for further investigation of the functions of S100A12 gene.

奶牛微生物培养物BLS的研究

用鉴别培养基从土壤、新疆传统奶酪和马奶酒中分离出地衣芽孢杆菌、米酒乳杆菌和酿酒酵母。经鉴定和安全试验 ,上述三株菌混合后的联合培养物 ,接种生料发酵制成微生态制剂BLS ,饲喂泌乳牛。试验组平均每日奶产量显著高于对照组。

基于B/S模式的奶牛日粮诊断系统的实现

针对现有奶牛日粮诊断过程中只考虑日粮营养组分方面的因素造成的局限性,首次提出了将奶牛日粮营养组分与营养代谢性病两个因素综合考虑,并以此结果对日粮配方优化设计。基于web2.0技术,采用JSP+Tomcat+MySQL架构,建立了B/S(浏览器/服务器)模式的奶牛日粮诊断系统。该系统先进实用,能有效地解决奶牛日粮配方针对性不强、难以规避奶牛营养性疾病等问题。

饲喂高淀粉饲粮时不同瘤胃降解淀粉水平对奶牛泌乳性能、营养物质表观消化率和氮平衡的影响

本试验旨在研究饲喂高淀粉饲粮时不同瘤胃降解淀粉水平对奶牛泌乳性能、营养物质表观消化率和氮平衡的影响。选用10头荷斯坦经产奶牛[平均泌乳天数为(214±38)d,平均乳产量为(26.2±2.4)kg/d,平均体重为(727±65)kg]作为试验动物,随机分成2组,每组5头。试验设计2种不同瘤胃降解淀粉水平的试验饲粮,分别为瘤胃降解淀粉水平为62.3%(占总淀粉的百分比)的低瘤胃降解淀粉水平饲粮(L-RDS)和瘤胃降解淀粉水平为72.1%(占总淀粉的百分比)的高瘤胃降解淀粉水平饲粮(H-RDS)。采用交叉试验设计,试验分为2期,过渡期7 d,每期试验21 d,其中适应期14 d,采样期7 d。结果显示:1)相比L-RDS组,H-RDS组有机物和淀粉的表观消化率显著升高(P<0.05),中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维的表观消化率显著降低(P<0.05),干物质表观消化率有升高趋势(P=0.07),蛋白质表观消化率无显著差异(P>0.05)。2)相比L-RDS组,H-RDS组尿素氮及它们占摄入氮比例有降低趋势(P=0.09),摄入氮、乳氮、粪氮、尿氮和沉积氮及它们占摄入氮比例无显著变化(P>0.05),尿中总嘌呤衍生物排出量和微生物蛋白产量亦无显著变化(P>0.05)。3)饲粮瘤胃降解淀粉水平对奶牛干物质采食量、乳产量和乳成分均无显著影响(P>0.05)。综合以上结果可知,饲喂高淀粉饲粮时不同瘤胃降解淀粉水平影响饲粮营养物质的表观消化率,对泌乳性能和氮平衡无显著影响。

奶牛不同乳腺健康状态下乳清蛋白的差异性表达研究

本试验旨在通过研究奶牛不同乳腺健康状态下乳清蛋白差异性表达,探究奶牛乳腺健康状况对乳清蛋白的影响以及病原微生物蛋白诱发炎症的分子机制,为诊断奶牛乳腺健康程度以及早期炎症的发生提供潜在生物标记物。选择102头荷斯坦奶牛[胎次2～3胎、泌乳天数(152±27) d、产奶量(27±3) kg/d]进行牛奶样本采集,根据乳体细胞数(SCC)及细菌学鉴定结果将牛奶样本分为6组,分别为细菌培养阳性组(传染型、环境型和机会型)和细菌培养阴性组[培养阴性-低SCC组(SCC<100 000个/mL)、培养阴性-中等SCC组(SCC为100 000～400 000个/mL)和培养阴性-高SCC组(SCC>400 000个/mL)]。采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)与非标记定量蛋白质组学等技术对6组乳清样本中的蛋白质功能及表达水平进行鉴定。结果表明:1)奶牛健康乳腺与炎症乳腺之间的差异主要是由蛋白质的表达水平造成的。2)试验总共鉴定出272种蛋白质,其中有58种蛋白质显示出显著调节变化。与细菌培养阴性乳清样本相比,细菌培养阳性乳清样本中有20种蛋白质表达显著上调(P<0.05),其中导管素-4(CATHL4)、导管素-3(CATHL3)、导管素-2(CATHL2)、α-球蛋白抑制因子H4(ITIH4)、丝氨酸蛋白酶抑制剂A3-1(SERPINA3-1)、前列腺素H-2 D异构酶(PTGDS)、血清淀粉样蛋白A3(SAA3)和免疫球蛋白κv3-20(IGKV3-20)在培养阳性乳清样本中的表达量超过培养阴性乳清样本的约8倍,且上调蛋白质的功能多数与特异性免疫反应有关。显著或极显著下调的蛋白质有38种(P<0.05或P<0.01),其中血小板糖蛋白4(CD36)、补体蛋白CD59(CD59)、κ酪蛋白(CSN3)、嗜乳脂蛋白亚家族1成员A1(BTN1A1)、ATP结合盒转运蛋白G2(ABCG2)、围脂滴蛋白2(PLIN2)、包膜糖蛋白2(GP2)、聚泛素-C(UBC)和异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)呈现极显著下调(P<0.01),BTN1A1与脂质合成和分泌有关,PLIN2和GP2与转运有关,ABCG2具有酶活性,CD59与免疫系统有关。3)在细菌培养阳性乳清样本中鉴定到21种菌体蛋白,这些菌体蛋白的存在既验证了细菌培养鉴定结果,又从菌体蛋白特性和功能角度阐明了病原微生物诱发炎症的分子机制。综上所述,通过对奶牛不同乳腺炎症状态下乳蛋白差异表达研究,根据不同炎症类型奶样中乳蛋白质及菌体蛋白的表达变化及功能揭示了不同乳腺健康状态下乳腺内的生物学现象,此外为诊断乳腺健康特别是早期乳腺炎症的发生提供潜在生物标记物。

牛乳与母乳抗氧化效能的比较

目的：测定３０例市售牛乳中维生素Ｃ（ＶＣ）、维生素Ｅ（ＶＥ）含量与超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性，以及抗氧化活性（ＡＯＡ）水平，并与母乳、新生儿脐血进行了比较。结果：市售牛乳作为预防性抗氧化剂或自由基链式反应的阻断剂，其水平均明显低于母乳；后者水平还低于脐血；而ＡＯＡ值却与脐血无显著差异。结论：市售牛乳的抗氧化效能明显低于母乳。

基于热红外成像与骨架树模型的奶牛眼温自动检测

针对现有方法无法实现奶牛热红外图像中眼温信息自动获取的问题,为实现奶牛眼温无接触、自动、高精确检测,提出了一种基于热红外成像技术与骨架树模型的奶牛眼温自动检测方法。首先,在获得奶牛侧面热红外图像的基础上,利用基于差距度量的阈值分割方法提取奶牛目标,对奶牛骨架进行精确提取,并构建了奶牛骨架树模型,在该模型上对奶牛头部区域进行准确定位;然后,根据头部轮廓的形状特征与眼睛几何位置特征,对奶牛眼睛区域中心点进行准确定位;最后,以眼睛中心点为圆心,以半径为20像素区域内的最高温度作为眼睛温度,对奶牛热红外图像中眼温进行自动检测。为验证本文方法的有效性,随机选取来自50头奶牛的100幅侧视热红外图像进行了试验,结果表明,采用本文方法检测结果的平均绝对误差为0.35℃、平均相对误差为0.38%,具有较高的精度。本研究可为奶牛体温非接触、自动化、高精度检测提供技术支撑。

基于三维点云的奶牛乳房外形特征分析方法

针对奶牛乳房外形特征分析,提出一种利用计算机技术的奶牛乳房外形分析方法.首先,通过机器视觉技术获得奶牛乳房的三维点云,并利用封闭算法将非封闭的三维点云封闭化后,计算奶牛乳房的体积;随后,将封闭的三维点云与一组平行平面相交,从而获得一组二维曲线集合;最终,通过分析二维曲线的特征,使奶牛乳房的外形特征分析与对比成为可能.本方法为进一步深入研究高产奶牛与低产奶牛在乳房外形特征方面的差异奠定了基础.

奶牛乳房炎的防治

奶牛乳房炎是一种严重制约奶牛养殖业发展的顽固性疾病。本文从奶牛乳房炎的发病原因、症状、检测方法入手,探讨了奶牛乳房炎的预防和治疗方法,旨在为临床更加有效地防治奶牛乳房炎提供科学依据。

两种多糖对奶牛乳房灌注的刺激性试验

研究低聚糖硫酸酯和右旋糖酐硫酸酯两种多糖对奶牛乳房灌注的刺激性，为其临床应用提供参考。将0．025g／mL的两种多糖溶液分别给奶牛乳房灌注10-50mL，连续3d，每天观察奶牛体温、食欲、过敏反应、乳房性状（红、肿、热、痛等症状）、乳汁外观性状，并以LMT法对乳汁进行检测。试验结果表明：奶牛乳房连续3d灌注2．5％的两种多糖液体10-15mL，奶牛乳房及乳汁未出现任何不良反应，但当乳房连续灌注20-50mL多糖溶液后，部分奶牛乳房出现红肿、产奶量下降及乳汁变性等不良反应。说明两种多糖可用于奶牛乳房灌注，但安全使用范围为每个乳区每次灌注量不应超过0．45g。

北京地区荷斯坦牛乳糖率影响因素分析及遗传参数估计

为探究非遗传因素对荷斯坦牛测定日乳糖率(lactose percentage,LP)的影响,并估计测定日乳糖率的遗传力及其与体细胞评分(somatic cell score,SCS)、产奶量之间的遗传相关,试验收集了北京地区2017-2019年6个牧场11554头荷斯坦牛的测定日生产性能记录,采用Mixed模型分析了影响测定日乳糖率的非遗传因素,基于DMU软件的DMUAI模块使用重复力模型估计了测定日乳糖率、SCS和产奶量的遗传参数,分析了测定日乳糖率的遗传趋势。结果显示,北京地区荷斯坦牛测定日乳糖率平均值为5.10%,胎次、泌乳阶段、牧场、测定年和测定季节对乳糖率均有极显著影响(P<0.01)。北京地区荷斯坦牛测定日乳糖率的遗传力估计值为0.097,高于同群体SCS性状;重复力估计值为0.162。1994-2019年,乳糖率性状的估计育种值总体呈升高趋势。乳糖率与SCS、产奶量之间分别存在中等至低的遗传相关,遗传相关系数分别为-0.49和0.28。上述结果表明,在遗传水平上,乳糖率越高的个体,其产奶量越高,体细胞数越低。本研究在中国牛群中对测定日乳糖率的遗传建模分析进行了有益尝试,利用大规模数据初步揭示了测定日乳糖率的遗传规律。

中医对奶牛乳痈的辨证论治及蒲公英的防治研究进展

奶牛乳房炎是奶牛场的高发疾病之一,在国内奶牛养殖场流行广泛,对我国奶业经济效益影响较大。乳房炎中医称为乳痈,我国传统中医学古籍中对乳痈发病的记载颇多,对乳痈的发病及治疗具备了系统性的认识,并在乳痈临床治疗中总结出疏肝解郁和清热解毒的主要治则。蒲公英作为一种药食同源的中药,其根、茎、叶和花含有多种活性成分,蒲公英及其配伍处方在奶牛乳痈的临床治疗中发挥了抗菌、消炎、提高免疫等作用。论文基于中医辩证论治的思想对奶牛乳痈病因及病症进行系统整理,并对中药蒲公英防治乳痈的相关研究进展进行总结,为中医药防治奶牛乳痈的相关研究奠定基础。

不同牛奶体细胞数下牛奶体细胞分型及奶牛泌乳性能变化

本试验旨在通过研究不同牛奶体细胞数(SCC)下牛奶体细胞分型特点,进而评估奶牛泌乳性能。选择102头荷斯坦奶牛进行牛奶样品采集,检测SCC、产奶量和乳成分。根据SCC检测结果将这102份牛奶样品分为3组,低SCC组(SCC<100 000个/mL)、中等SCC组(SCC为100 000~400 000个/mL)和高SCC组(SCC>400 000个/mL)。通过流式细胞仪对牛奶样品中的体细胞进行分选,检测淋巴细胞、巨噬细胞和多形核嗜中性白细胞(PMN)的比例。采用标准平板计菌法对菌落总数进行计数,并通过细菌学检查对牛奶样品中的细菌进行分类鉴定。结果表明:1)在SCC<100 000个/mL范围内,SCC在13 000~76 000个/mL时,淋巴细胞比例为89.43%,是健康乳腺中的主要细胞群体,当SCC增加到76 000~100 000个/mL时,PMN比例极显著增加(P<0.01),达到79.68%,成为乳腺内主要细胞群体,表明早期炎症已经开始发生。SCC>200 000个/mL时,PMN比例与SCC呈正相关;淋巴细胞比例与SCC呈负相关;巨噬细胞比例与SCC无明显相关性。2)鉴别出的主要病原体有金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)、无乳链球菌等;次要病原体有绿脓杆菌、芽孢杆菌、乳酸乳球菌等。主要病原体组的牛奶样品中PMN比例(48.93%)极显著高于无病原体组(17.23%)(P<0.01),显著高于次要病原体组(P<0.05)。3)细菌培养阳性的牛奶样品中,感染传染型病原体的奶牛,产奶量显著下降(P<0.05),酪蛋白/乳蛋白及乳糖含量显著减少(P<0.05);在细菌培养阴性牛奶样品中,中等SCC(10 000~40 000个/mL)和高SCC(SCC>40 000个/mL)牛奶样品中观察到酪蛋白与和乳糖含量显著降低(P<0.05),高SCC牛奶样品中观察到乳蛋白含量显著降低(P<0.05)。由此可见,体细胞分型可用于对奶牛乳腺健康状况做出更详细分析,特别是在低SCC的牛奶中更早地识别炎症起始发生。乳腺早期炎症反应的发生明显低于目前公认的健康乳腺牛奶SCC阈值(<100 000个/mL),并且CNS可能是诱发早期乳腺炎症的潜在病原体。细菌培养阴性样品中,炎症导致高SCC牛奶中酪蛋白/乳蛋白和乳糖含量的显著降低。

制糖副产品饲养奶牛的效应

用蔗髓、糖蜜和酒精废液等制糖副产品及尿素代替部分精料配制成混合精料,对奶牛进行饲养试验。结果表明:试验组和对照组产奶量分别为7666.60kg和7597.40 kg,差异不显著;试验组比对照组节省精料31%;每1kg 试验精料费0.4473元,比对照组0.5655元减少0.1182元,降低精料成本20.9%;试验组每产1kg 牛奶精料费为0.3697元,比对照组0.4705元减少0.1008元,降低成本21.4%;试验组牛奶乳脂率比对照组高0.19%(0.19个百分点),即提高6%。因此用制糖副产品配制的精料可代替常规精料。

奶牛化脓性乳房炎的诊治

本文使用中西结合的方法,在巴里坤县大河兽医站工作期间,对接诊的三例化脓性乳房炎的疾病进行了治疗,其中一例完全治愈,另外二例基本好转,为乳房炎的治疗效果的研究提供了有关的临床资料,并在临床具有一定的意义。