乙型肝炎病毒(adr亚型)转基因小鼠的研究

目的：制备含有２．０拷贝乙型肝炎病毒（ＨＢＶ，ａｄｒ亚型）基因组的转基因小鼠，为ＨＢＶ相关医学问题的研究准备实验动物模型。方法：应用受精卵原核显微注射的方法，产生ＨＢＶ转基因小鼠。用ＰＣＲ，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ－ｂｌｏｔｉｎｇ杂交、放射免疫、免疫组织化学以及亚显微结构分析等方法，研究外源基因在转基因小鼠体内的整合、表达以及复制。应用常规病理切片及血清生物化学方法分析转基因小鼠的病理学改变。结果：得到了４只整合有ＨＢＶ基因组的建立者小鼠，并证明ＨＢＶ基因在转基因小鼠体内可以稳定遗传，在肝、肾组织内可特异性表达、复制，并在肝细胞内发现了Ｄａｎｅ颗粒。转基因小鼠的肝、肾组织未见明显的病理学改变。结论：获得了ＨＢＶ的转基因小鼠，其病毒基因可以表达，并有病毒颗粒形成。该小鼠对于ＨＢＶ的各个基因产物是免疫耐受的，其基本生物学特性与人类的ＨＢＶ携带者特征相似。

HBV前S1蛋白与HBV-DNA检测和乙肝二对半模式相关性研究

乙型肝炎病毒（HBV）为嗜肝DNA病毒。HBV-DNA基因组呈环状分为长的负链（L）和短的正链（S）两股。L链有四个开放读码区（S、C、P、X区）。S区又分为前S1、前S2两区及S区,分别编码包膜上有前S1、前S2和HBsAg[1-2]。前S1蛋白主要存在于Dane颗粒中,

HBV感染者血清表面抗原大蛋白,DANE颗粒,HBV-DNA与PreS1蛋白检测分析

目的 检测HBV感染者血清中乙肝表面抗原大蛋白（LHBS）,DANE颗粒,HBV-DNA和PreS1蛋白,探讨LHBS在临床诊治中的价值.方法 对1 042例HBV感染者采用酶联免疫吸附试验检测乙肝病毒HBeAg,LHBS,DANE颗粒和PreS1蛋白,并采用定性PCR检测HBV-DNA.结果 245例HBeAg（＋）的HBV感染者中,LHBS阳性率（96.33%）,DANE颗粒阳性率（90.20%）,分别与HBV-DNA阳性率（92.65%）比较,差异无统计学显著性意义（P＞0.05）,三者均明显高于PreS1阳性率（66.53%）,差异均有统计学显著性意义（P＜0.01）;797例HBeAg（-）的HBV感染者中,LHBS阳性率（78.17%）高于DANE颗粒阳性率（56.46%）,HBV-DNA阳性率（33.12%）和PreS1阳性率（17.44%）,依次比较差异均有统计学显著性意义（P＜0.01）.结论 LHBS是判断HBV感染者体内病毒复制程度的可靠指标,在HBeAg（-）的HBV感染者中,LHBS有指导治疗、预后判断的作用;DANE颗粒亦是判断病毒复制程度的可靠的新指标.LHBS和DANE可用于暂无条件开展PCR实验的的基层医疗单位,代替HBV-DNA检测.

复制型HBV(adr)转基因小鼠血清中Dane氏颗粒的免疫电镜检测

本文应用免疫电镜技术对复制型HBV（adr）转基因小鼠的G2、G3代仔鼠的血清进行检测，发现直径22nmHBsAg颗粒和直径45nm左右的Dane颗粒．结果证明：该转基因小鼠模型的后代能继续复制、组装并分泌HBV病毒颗粒．

HBV感染者血清中HBV-LP检测的临床意义

乙型肝炎病毒感染人体后在血清中存在主要有三种形式,即42nm的Dane颗粒、22nm的小球形颗粒和管状颗粒。三种病毒颗粒均由三种膜蛋白即大蛋白、中蛋白（HBsAg＋PreS2-Ag）、和小蛋白（HBsAg）以不同的比例组装而成。其中,

乙肝病毒Dane颗粒的纯化及形态学观察

目的经RPHA滴度检测、电镜观察证明获得了较纯的Dane颗粒。方法将含有高滴度HBsAg而HBeAg阴性的健康携带者阳性血浆,经脱纤维蛋白、硫酸铵盐析粗提后,用等密度和速率区带离心纯化乙肝病毒Dane颗粒。结果电镜观察到的Dane颗粒形态与文献报告一致。结论本实验建立了提取Dane颗粒的有效方法,其实用性及重复性好。

HBV感染者血清标志物与HBVDNA检测结果的关联性分析

乙型肝炎病毒（HBV）外膜蛋白包括S、前S2和前S1 3种成分,含有前S1的蛋白主要存在于Dane颗粒和管型颗粒上,pre-S1Ag（pre-S1Ag）检测是对乙肝＂两对半＂特别是e抗原和HBV-DNA检测的重要补充。

转基因小鼠血清中HBV DNA存在规律的研究

乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）是一种严重危害人类健康的ＤＮＡ病毒，但由于其很强的宿主特异性，缺乏理想的实验动物模型及体外培养系统，从而限制了对ＨＢＶ生物学及其致病机理的研究。８０年代初，转基因动物技术的出现，为研究ＨＢＶ提供了一条新的途径。１９９５年上海市肿...

前S_1抗原与HBeAg及HBV-DNA定量的相关性研究

乙肝病毒前S/S区编码前S1、前S2和S三种外壳蛋白,前C/C区编码HBeAg及HBcAg。HBeAg存在于病毒内衣壳,为可溶性蛋白。可游离存在于血中,与完整HBV颗粒-Dane颗粒出现平行,为病毒复制及强传染性的指标。

核苷(酸)类似物抗病毒治疗及其耐药机制的分子生物学

对慢性乙型肝炎（CHB）实施抗病毒治疗现已成为肝病学界的共识。现就核苷（酸）类似物（NA）抗病毒作用和发生耐药机制相关的分子生物学作一综述,以便医生更好地运用NA疗法。一、HBV病毒颗粒[1]1970年首先由Dane等描述,也称Dane颗粒,属于嗜肝病毒科。

乙肝标志物及HBV DNA检测的临床意义

乙肝病毒是Blumberg等于1965首次发现的，属于嗜肝DNA病毒科，完整的HBV病毒称Dane颗粒，直径42nm，球形，有包膜（即HBsAg）。患者血中除Dane颗粒外，还有16—25nm的球状和杆状体，是病毒组装过剩的HBsAg。乙肝病毒感染是一个全球性的健康问题，据美国疾病控制中心报告，全球有近20亿的人群感染乙肝病毒，其中有近3．5亿的人为慢性持续感染。而中国是一个乙肝大国，目前我国约有1．3亿的乙肝病毒携带者，每年我国肝硬化住院人数占内科住院人数的4．3％-14．2％，每年死于肝癌的人数约为11万，占全球肝癌死亡人数的45％，而乙肝病毒与肝硬化和肝癌有密切的关系。乙型病毒性肝炎是目前己确认的病毒性肝炎中对人类健康危害最为严重的一种肝炎。因此乙肝标志物及HBVDNA在乙型肝炎的诊治、临床输血、健康体检及流行病学调查中得到了广泛的运用。

乙型肝炎病人Dane抗体的初步研究

本文对6例乙型肝炎病人(4例急性肝炎,1例慢性迁延性肝炎,1例 HBsAg 阳性携带者)的血清进行了 Dane 抗体的研究。采用双抗体沉淀法,系将被检血清与氚标记 Dane 颗粒作用沉淀后,加入抗入 Ig 血清再沉淀,以上清液中残留放射性作为 Dane 抗体活性的指标。检测结果有2例急性乙肝病人血清中测出 Dane 抗体。这一抗体不同于抗-HBs、抗-HBc 或抗-HBe。根据临床随访,2例 Dane 抗体阳性者中一例恢复较快,并以后出现抗-HBs,另一例恢复不甚显著,血清中 HBsAg、HBeAg 均为阳性。作者认为进一步明确 Dane 抗体在清除血循环中乙肝病毒的作用,对研究慢性乙型肝炎发病机制有一定帮助.

HBsAg临床应用的研究新进展

慢性乙型肝炎（CHB）患者的血清学标志物特点之一即是高水平的HBsAg。HBsAg不仅来源于含有病毒核酸的戴恩（Dane）颗粒，更多来自非感染性的细丝状或球状“病毒空壳”，这些空壳中的HBsAg数量是Dane颗粒的10^2～10^5倍。肝细胞内的共价闭合环状DNA（CC—cDNA）不断合成HBsAg，但合成HBsAg的mRNA并不来源于病毒前基因组RNA，所以HBsAg水平有时并不平行于乙型肝炎病毒（HBV）DNA载量。

基于DANE的电子邮件安全研究

电子邮件是当今重要的通信工具,也是网络攻击的主要途径之一.由于近年来CA机构有意无意的证书误签发、邮件中间人降级攻击、基于DNS的域名实体认证协议DANE的提出,当前邮件协议的改进及邮件隐私和安全有了新进展.从邮件加密和验证角度梳理了当前广泛使用的邮件协议,分析了其优缺点,归纳了邮件协议的最新研究进展、DANE对当前邮件协议的改进及其不足,提出了基于DANE的安全邮件系统架构.最后对基于DANE的邮件系统的发展方向进行了总结与展望.