用RNA和DAPA标记法估测牛瘤胃微生物蛋白的研究

两头带瘤胃瘘管的阉公牛饲喂三种不同口粮:日粮Ⅰ、Ⅲ的精粗比为1∶3,日粮Ⅱ的精粗比为1∶1;日粮Ⅰ、Ⅱ的蛋白质补充料为豆饼,日粮Ⅲ的蛋白质补充料则为菜籽饼。测定不同日粮,不同采样时间和不同瘤胃部位对瘤胃细菌的 RNA—N/细菌氮和 DAPA—N/细菌氮比值的影响。日粮Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的瘤胃细菌 RNA—N/细菌氮有明显的差异,比值分别为0.1395、0.0833、0.1155,相应变异系数为7.82％、12.18％、9.40％。同一日粮的不同采样时间和瘤胃不同采样部位的 RNA—N/细菌氮没有显著的差异。其变异系数日粮Ⅰ为7.36％和7.80％;日粮Ⅱ为9.05％和12.14％;日粮Ⅲ为9.26％和9.22％。日粮Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的瘤胃细菌 DAPA—N/细菌氮的比值分别为0.5375％、0.4005％,0.5067％,日粮之间有显著差异;相应变异系数为8.13％、10.42％、8.96％。同一日粮内不同采样时间和不同采样部位的 DAPA—N/细菌氮的值差异不显著,日粮Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的不同采样时间和不同采样部位的变异系数分别为7.52％、8.18％;11.37％、11.622％;8.38％、9.04％。

dapA基因缺失对大肠杆菌L-苏氨酸产量的影响

采用Red重组技术,将大肠杆菌K12的dapA基因置换,构建dapA基因缺失的突变株,通过发酵测定突变株L-苏氨酸的产量.获得的dapA基因缺失突变株命名为K12ΔdapA.结果表明:在相同培养条件下发酵48h,重组菌株K12ΔdapA发酵液中积累的L-苏氨酸达3.71g/L,是E.coli K12原始菌株的3倍.dapA基因缺失可以增强L-苏氨酸积累的效果,为L-苏氨酸工程菌的进一步改造奠定了基础.

达格列净保护PDK1基因敲除心衰小鼠表达谱系研究

目的探讨钠-葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT2)抑制剂达格列净(DAPA)对3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶-1(PDK1)基因敲除心力衰竭(HF)小鼠中长链非编码RNA(lncRNA)表达谱的影响。方法将PDK1敲除HF小鼠分为对照组(KO组,n=10)和达格列净治疗组(KO+DAPA组,n=15);使用Arraystar小鼠lncRNA微阵列通过测序和筛选分析lncRNA表达谱;实时定量PCR验证差异表达的LncRNA;构建lncRNA-mRNA共表达网络。结果KO+DAPA组显著延长HF小鼠生存期;两组表达水平变化>1.5倍lncRNAs有2653个;生信分析表明lncRNAs参与能量代谢过程;差异表达大于3倍以上且人鼠同源的7个LncRNAs构建lncRNA-mRNA共表达网络提示uc.347和uc.321分别关联141个mRNA和108个mRNA;uc.347在心肌细胞中的过表达促进了ATP能量的产生。结论本研究揭示了达格列净影响PDK1基因敲除心衰小鼠lncRNA表达谱,差异表达的LncRNA可能参与能量代谢过程,从而改善心衰预后。

瘤胃微生物蛋白质合成测定方法的研究

采用不完全拉丁方设计给5头装有瘤胃和真胃瘘管的绵羊饲喂7种不同日粮,其日粮中加入三氧化二铬(Cr_2O_3)和聚乙二醇(PEG)作真胃食糜标记物,当用核糖核酸(RNA)作瘤胃微生物蛋白质合成标记物时,测定每千克瘤胃表观可发酵有机物(FOM)和瘤胃表观可发酵碳水化合物(FCHO)合成瘤胃微生物蛋白氮(M-N)的效率分别是26.96gM-N/kgFOM 和27.36gM-N/kgFCHO;用2,6-二氨基庚二酸(DAPA)作标记物时,测定值相应微生物蛋白氮的效率为26.90和26.97。用 RNA 作标记物测定瘤胃微生物蛋白质合成时,日粮降解蛋白质氮转化为微生物氮的利用效率为0.81。

草坪禾草丝核菌的核相研究

2003～2005年从上海市、浙江省、山东省、河南省和陕西省草坪褐斑病的97份病株标本中,分离得到了73个丝核菌分离物,其寄主包括多年生黑麦草Lolium perenne、高羊茅Festuca arundinacea、草地早熟禾Poa pratensis、匍匐翦股颍Agrostis palustris、结缕草Zoysia japonica和狗牙根Cynodon dactylon。用载玻片培养法和DAPI染色法对各分离物菌丝进行了染核观察。结果73个分离菌株可区分为单核丝核菌、双核丝核菌和多核丝核菌三大类,可能属于多个物种。单核丝核菌在中国为首次报道,同时也是其侵染草坪禾草的首次报道。

分布式应用程序体系结构到C/S网络数据模型转换机制研究

文章以分布式应用程序体系结构 DAPA(Distributed Application Program Architecture)为基础 ,研究分布计算模型到 C/S网络数据模型的转换机制。文章给出总体设计方案 ,并阐述了相关算法和技术的基本思想 ,在实现 C/S网络数据模型转换的基础上 ,对 B/S网络数据模型转换进行了研究。此项研究直接为

日粮纤维对猪回肠微生物氮及微生物氨基酸流量的影响

采用5×5拉丁方设计,对5头大约克阉公猪(大约30kg)实施回盲肠瓣T型瘘管(PVCT)手术,用2,6 二氨基庚二酸(DAPA)标记法,测定以豆饼为基础的半纯合日粮中添加不同浓度的豌豆皮(4%、8%、12%)和纯稻壳(8%)对猪回肠微生物氮及微生物氨基酸流量的影响。结果表明:猪粪总氮中来源于微生物氮的量为74 53%～90 00%,回肠食糜氮中则为30 94%～50 26%;回肠食糜氨基酸流量中,有19 85%(脯氨酸)～51 42%(精氨酸)是来自微生物氨基酸;而微生物氨基酸在回肠内源性氨基酸流量中所占的比例较大,为30 49%(脯氨酸)～98 50%(亮氨酸)。豌豆皮与纯稻壳对猪回肠微生物的作用效果不尽相同,4%的豌豆皮与8%的纯稻壳的作用效果相似,而8%和12%的豌豆皮对猪回肠微生物的影响要高于8%的纯稻壳。

MATLAB在电力系统分析中的应用

本文在简单地介绍了 MATLAB语言和潮流计算的基本知识后 ,着重阐述了 MATLAB语言在电力系统潮流计算中的应用 ,通过分析 DAPA算法的程序结构总结出了MATLAB语言在处理矩阵运算方面的无可比拟的优越性。

L-赖氨酸高产基因工程菌的构建

赖氨酸的高产菌株已通过经典的诱变法获得 ,但要再提高这些诱变株的产量就很困难。赖氨酸的生物合成很有规律 ,它不仅依赖于赖氨酸合成途径中的酶 ,而且依赖于驱动合成赖氨酸的碳源代谢的酶。为了提高赖氨酸产率 ,就要求改变碳源的供应 ,从而控制中间物向赖氨酸合成的转化。二氨基庚二酸合酶基因 (dapA)和磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因 (ppc)是菌体在赖氨酸合成代谢途径中 ,控制表达二氨基庚二酸合酶和磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的关键基因。我们首先分别克隆这两个基因 ,并使之处于一定启动子控制下。然后将dapA和ppc重组克隆到同一个载体 ,并转化赖氨酸发酵菌 ,从而提高菌体内的酶活 ,进一步提高赖氨酸发酵产率。

二氢吡啶二羧酸合成酶基因在棒杆菌中的克隆与表达

在棒杆菌中影响赖氨酸生物合成的关键酶之一是二氢吡啶二羧酸合成酶(DHDPS),通过PCR扩增二氢吡啶二羧酸合成酶基因(dapA),将该基因连接于穿梭表达载体pLCX36的P32启动子下,得到重组质粒pLCXdapA,pLCXdapA以接合转移的方法转移到高丝氨酸营养缺陷型菌株谷氨酸棒杆菌A18中,获得dapA增强了的基因工程菌株。经摇瓶培养测定,编号为A18-21的结合子赖氨酸产量最高,达8.94mg/mL,是出发菌株的1.4倍。

赖氨酸工业生产菌的研究进展

简要地介绍了人工诱变赖氨酸生产菌的研究成果 ,通过 3个实例介绍了基因克隆技术在赖氨酸生产菌研究上的应用 。

负压型鼓室图宽频声能吸收率特征分析

目的探讨传统226Hz鼓室图结果为C型儿童的宽频能量吸收率特征,对C型鼓室图在环境压力(0dapa)及宽频峰压下能量吸收率特征进行分析,建立C型鼓室图宽频声能吸收率曲线范围。方法选取正常耳140耳及传统226 Hz鼓室图负压耳187耳,通过宽频声导抗测试获取环境压力(0dapa)及宽频峰压下107个频率下的声能吸收率,绘制C1和C2二组儿童宽频峰压与环境压力(0dapa)下声能吸收率均值曲线,并对所有曲线进行分析。选取并分析226Hz和1/3倍频程共17个频率下A组、C1组、C2组儿童宽频能量吸收率是否存在差异。结果当外耳道为环境压力(0 dapa)时,A组各频率处宽频声能吸收率均大于C组,且C1大于C2组;C1与C2型相比在17个频率中11个存在差异。当外耳道为宽频峰压时,C1组与C2组吸收率均值曲线相似且声能吸收率存在差异频率较少,与A组相比,在中频段更有研究意义。结论 C组与A组宽频声能吸收率存在差异。C1组与C2组声能吸收率曲线主要在外耳道为环境压力下存在差异,而在宽频峰压下相似,可为临床提供一定参考意义。