君迁子叶片培养再生植株的研究

【目的】建立君迁子叶片离体再生体系,为转基因操作奠定基础。【方法】以君迁子幼叶为外植体,研究适合其再生植株的叶片部位、放置方式、基础培养基、植物生长调节剂以及暗培养时间等条件。【结果】叶片基部上表面朝下接种于1/2MS+ZT5.0mg·L-1+IBA0.01mg·L-1的培养基,先期暗培养5周后转移至正常光照下培养效果最好,愈伤组织形成率、不定芽再生率和外植体平均不定芽数分别为100.0%、85.3%和2.8±0.6个。再生芽接种于不含植物生长调节剂的1/2MS培养基上,30d时生根率达100%,平均根数和平均根长分别达5.4条和3.7cm。再生植株炼苗后移栽,30d时成活率达98.5%。【结论】成功地建立了君迁子叶片的离体再生体系。

君迁子休眠芽及叶片离体培养体系优化及植株再生

以君迁子(Diospyros lotus Linn.)休眠芽和叶片为外植体,研究基础培养基种类和外植体基因型对休眠芽初代培养的影响,比较叶片放置方式、TDZ浓度、ZT与TDZ不同浓度组合及暗培养时间对叶片愈伤组织形成和不定芽再生的影响;然后对再生芽进行生根。结果表明:君迁子休眠芽初代培养中,DKW培养基最适合其生长发育,休眠芽生长势最佳;初代培养中,不同基因型的外植体在DKW培养基中生长势基本相同,说明外植体基因型对其初代培养没有影响,但对继代培养影响较大。叶片下表面朝上放置在MS+ZT 0.1 mg/L+TDZ2.0mg/L中暗培养20d,愈伤组织形成率达100%,在(1/2N)MS+2.200 mg/L TDZ上愈伤组织形成率为81.4%;叶片下表面朝上放置在MS+ZT 1.0mg/L+TDZ 2.0mg/L中暗培养0d,不定芽再生率和外植体平均不定芽数最高,分别为34.4%和2.1±0.3。组培苗在1/2MS(1/2N)+IBA 1.0mg/L中培养5d后,转入1/2MS(1/2N)+1g/L活性炭培养20d,生根率为58.14%,平均根数为4条。

柿和君迁子试管苗茎尖玻璃化法超低温保存及再生植株遗传稳定性研究

对柿(Diospyros kaki Thunb.)和君迁子(D. lotus L.)试管苗茎尖玻璃化法超低温保存及再生植株遗传稳定性进行了研究。结果表明,试管苗在添加有蔗糖0.3 molL-1的改良MS培养基 (KNO3和NH4NO3减半)上,于低温6±1℃下锻炼6周后,切取侧芽茎尖1.5～2.0 mm在含蔗糖0.7 molL-1的改良MS培养基上预培养2 d,室温(20℃)下装载液(2.0 molL-1甘油+0.4 molL-1蔗糖)过渡20 min,0℃下玻璃化液PVS2(30%甘油+15%乙二醇+15%二甲基亚砜+0.4 molL-1蔗糖)处理80 min,换成新鲜的PVS2后投入液氮保存1 d,40℃水浴化冻1 min,含蔗糖1.2 molL-1的改良MS培养基洗涤20 min,接种于含0.2 mgL-1 CPPU、1.0 mgL-1 BA、0.05 mgL-1 IAA、500 mgL-1 可溶性PVP、30 gL-1蔗糖和7 gL-1琼脂的改良MS培养基(再生培养基)的滤纸上,暗处理1 d后转移到新鲜的上述再生培养基中,暗培养1周后转到正常光下,再生率超过30%;再生植株通过细胞学和AFLP标记检测,没有发现核DNA含量、染色体数目和AFLP谱带的改变。该结果为柿属植物种质资源的长期保存提供了理论依据。

柿和君迁子试管苗缓慢生长法保存及其遗传稳定性研究

对柿(Diospyros kaki Thunb.)和君迁子(D.lotus L.)试管苗缓慢生长法保存及其恢复生长植株的遗传稳定性进行了研究,结果表明:低温(6±1)℃和光照800 lx(12 h/d)的条件下,试管苗在添加有甘露醇20g/L或PP333 1.0 mg/L的MS(1/2N)+蔗糖20g/L+琼脂7 g/L+PVP 500 mg/L培养基上或在含有CPPU 0.2 mg,/L的1/2 MS(1/2N)+蔗糖15 g/L+琼脂g/L+PVP 500 mg/L培养基上保存18个月,平均存活率在90％以上;上述3种方法保存后恢复生长的植株,在核DNA含量和染色体数目上没有发生改变;RAPD分析时表明,只有在添加PP333的保存中,次郎3个单芽姊妹系扩增出的1827条谱带中,增加了3条新带,变异率为0.16％,君迁子3个单芽姊妹系扩增出的1736条谱带中,增加了1条新带,缺失了14条带,变异率为0.86％。该结果为柿属植物种质资源缓慢生长法保存的有效性和可行性提供了理论依据。

油柿下胚轴再生植株的培养

以油柿下胚轴为材料进行了不定芽再生和再生苗生根的研究,旨在建立油柿的离体再生体系,为转基因操作奠定基础。结果表明,在所试验的所有培养基中,MS(1/2N)+IAA0.1mg/L+ZT2.0mg/L最适合油柿下胚轴培养,其不定芽再生率和外植体平均不定芽数最高,分别为81.7%和(5.3±2.1)个。再生苗接种于添加IAA和IBA各0.5mg/L的MS(1/2N)培养基上生根效果最好,生根率达100%,平均根数达(3.2±1.4)条,平均根长度为(2.4±1.0)cm,且侧根较多、植株生长迅速而健壮。再生苗生根后移栽,30d时成活率达96%。

无核君迁子离体叶片的植株再生

以"赞圆无核"君迁子组培苗叶片为试材,研究了基本培养基类型、植物生长调节物质浓度和暗期处理对离体叶片不定芽再生的影响,并获得了完整的再生植株。结果表明:最适宜的基本培养基为MS(1/2N),最佳的生长调节剂组合为5.0mg·L^(-1) ZT+0.10mg·L^(-1) IAA,其愈伤组织诱导率、不定芽形成率及平均出芽数分别达到99.1%、87.3%和5.4个;暗培养4周,再转为光下培养2周效果最佳;将叶片再生植物转入(1/2N)MS+0.5mg·L^(-1) ZT+0.01mg·L^(-1) IAA培养基中继代培养,以1/2MS+1.0mg·L^(-1) IAA+20g·L^(-1)蔗糖+7g·L^(-1)琼脂培养基诱导生根,生根率60.5%;生根苗大田移栽成活率63%。

油柿叶片离体再生体系的建立

以油柿叶片为材料开展了离体培养研究,旨在建立其再生体系,为转基因操作奠定基础。结果表明,油柿叶盘在MS(1/2N)+IBA0.1mg/L+ZT3.0mg/L培养基上,经前期暗处理3周后移至正常光照下培养的再生效果最好,其不定芽再生率和外植体平均不定芽数最高,分别为80.5%和(4.1±0.8)个。再生苗接种于添加IAA和IBA各0.5mg/L的MS(1/2N)培养基上,4周时生根率可达92%,成功地建立了油柿叶片的离体再生体系。

土壤干旱对君迁子幼树枝叶生长及几个生理指标的影响

在土壤干旱处理条件下,对盆栽3年生幼树枝叶生长和超氧化物歧化酶,过氧化氢酶,脂质过氧化产物丙二醛测定,结果表明,土壤干旱明显抑制君迁子幼树枝叶生长速率,降低超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的活性,诱发细胞脂质过氧化作用,导致细胞液大量外漏,用土壤反复于旱法确定出君迁子幼树的暂时萎蔫土壤相对含水量和永久萎蔫土壤含水量(相对)为(4.98±0.26)％和(3.99±0.19)％,塑料薄膜包盆可明显提高君迁子幼树的枝叶生长速率.超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性,降低细胞脂质过氧化作用.

玫瑰花红枣乌梅复合饮料工艺研究

本文以玫瑰花、红枣、乌梅为主要原料,通过单因素和正交试验,研制出酸甜可口,营养丰富的复合饮料。结果表明,玫瑰花红枣乌梅复合饮料的最佳配方为玫瑰花汁15%、乌梅汁40%、红枣汁25%、白砂糖6%和柠檬酸0.06%。

软枣发芽技术研究

[目的]为软枣的育苗提供经验。[方法]将成熟的野软枣果实分别贮藏在冰柜、阴凉处,在35℃的温水、凉水中浸种,种植于秋后深翻冻晒、播种前犁的土壤中,进行发芽试验,总结软枣发芽的规律。[结果]贮藏方式、浸种方式和土壤准备方式对软枣发芽率的影响无显著差异,发芽率均在88%以上。因为软枣种子水分保持能力强,春天里有新鲜的水供细胞呼吸代谢就可以发芽,湿润疏松的土壤能够促使软枣种子继续发芽生长。[结论]成熟的软枣种子发芽性能非常强,不需要特别的贮藏和浸种,也不需要特别的土壤准备,育苗非常省功,省种。

低温条件下君迁子幼苗SOD同工酶谱带与活性研究

本文用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法和ＮＢＴ光化学反应法测试了君迁子幼苗（４±１）℃（ｃｋ）和（０±１）℃条件下随低温处理时间的加长，ＳＯＤ同工酶谱带和活性变化。结果表明，在（４±１）℃条件下君迁子幼苗ＳＯＤ酶共有９条酶带，其中有３条一级带，４条二级带和２条三级带；在（０±１）℃条件下，随低温处理时间的加长，ＳＯＤ酶带中，一级带在９６ｈ之后全部消失，Ｄ区中三级带在低温处理２４ｈ之后就消失，三级带数逐渐减少。说明随着低温处理时间的加长君迁子幼苗中ＳＯＤ酶活性降低，ＮＢＴ光化学反应测试结果同样说明了这一论点．

柿树树干日灼的调查研究

柿树(Diospyros kaki L.f.)树干,由于受太阳光直射和温差过大的影响,常发生日灼,局部皮层深裂、脱落,乃至本质部裸露,造成树体衰弱、减产甚至死亡。经初步调查发现,柿树日灼主要发生在黑枣(D.lotus.L.)砧木上,且与砧木高度呈显著的正相关。

基于SRAP的部分柿砧木遗传多样性分析

柿Diospyros kaki Thunb.常见的砧木有君迁子D.lotus L.、浙江柿D.glaucifolia Met.、油柿D.oleifera Cheng及本砧,其遗传关系尚不完全清楚。以21份柿属砧木资源和5份栽培柿品种为试材,利用SRAP分子标记技术分析供试材料之间的亲缘关系。SRAP扩增结果表明,(1)筛选出9对多态性较好的引物,共扩增出113条清晰、可重复谱带,其中多态性带111条,多态性比例分别为98.23%;(2)UPGMA聚类分析结果显示两份本砧种质"小果甜柿"和"牛眼柿"与5份柿栽培品种聚类较近,台湾乌柿与浙江柿、油柿及浙江光叶柿聚类成组,而与其他君迁子类型的遗传关系相对较远。以上结果表明,柿砧木遗传多样性丰富,有望进一步从中挖掘新的种质类型。

响应面优化涉县无核黑枣果酒发酵工艺

以河北涉县产无核黑枣为原料,采用响应面法优化黑枣果酒发酵工艺条件。用白砂糖将黑枣汁还原糖含量调整至20%,在发酵菌种及其接种量、发酵初始pH值、发酵温度、发酵时间4个单因素试验基础上,选取发酵初始pH值、发酵温度、发酵时间为影响因子,以黑枣果酒的酒精度为响应值,应用Box-behnken试验设计建立回归模型,并进行响应面分析。结果表明,黑枣果酒发酵的最佳条件为:安琪黄酒高活性酵母添加量0.2%、发酵初始pH 3.5、发酵温度27.0℃、发酵时间9 d,在此优化条件下,黑枣果酒的酒精度为15.37%vol。

黑枣果酒发酵过程主要成分变化规律及香气成分分析

以河北涉县产无核黑枣为原料,对黑枣果酒发酵过程中可溶性固形物、还原糖、酒精度、总酸、蛋白质、脂肪、VC、多酚等主要成分的变化规律进行分析,气相色谱质谱联用测定黑枣果酒香气主要成分。结果表明,黑枣果酒发酵过程中,可溶性固形物、还原糖、蛋白质、脂肪、VC的含量随着发酵时间的变化而降低,而酒精度、总酸的含量却随着发酵时间的延长而上升,在发酵初期多酚含量略有增加,随后缓慢下降并保持稳定的水平。黑枣果酒香气成分中鉴定出匹配度较高的18种化合物,包括烷烃类物质9种、酯类物质8种和1种羟胺物质。

论金农梅花之创意

梅一直以来被人们誉为品格之象征,尤为文人士大夫所钟爱。金农写梅不受古法所拘,主张“师其意,不师其辞”,“以梅为师”,不求形似,重在尚意。其渊博学识和深厚的艺术修养,在历代写梅形式上呈现了鲜明的个性,形成了金农梅花的独特创意。

利用柿雄性性别连锁标记DISx-AF4S鉴定君迁子实生后代性别

君迁子是雌雄异株柿属植物,因其综合抗性较强,在生产上常用作柿子的砧木.君迁子早期性别鉴定对其实生后代的分类、管理与开发利用具有重要的作用.利用柿属植物中已发现的一个与雄性性别连锁的DISx-AF4S标记,对51株已知性别的君迁子性别进行验证,准确率可达98%以上,对113份未知性别的君迁子实生苗基因组DNA进行PCR扩增,有49份材料出现了目的条带,64份没有目的条带,说明供试的113份君迁子材料中有49株为雄株,其余为雌株.