dauW基因对柔红霉素产量的影响

报道了先前克隆的柔红霉素产生菌天蓝淡红链霉菌(Streptomyces coeruleorubidus)dauW基因的过表达和阻断对柔红霉素产量的影响。通过原生质体融合将dauW表达质粒导入天蓝淡红链霉菌DM,所得重组菌DM-W1的柔红霉素产量无明显提高;而通过大肠杆菌-链霉菌接合转移获得的发生同源重组单交换的dauW阻断突变株DM-W2,柔红霉素产量达(192.0±61.6)μg/ml,且遗传稳定性好。试验结果表明,对dauW基因的阻断突变能明显提高柔红霉素的发酵单位。

天蓝淡红链霉菌SIPI-1482的dauW基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

柔红霉素产生菌—天蓝淡红链霉菌(Streptomyces coeruleorubidus)SIPI-1482位于基因组上dnrX和drrB之间的基因被克隆和测序,它与dnrW有较高的同源性,将其命名为dauW,并提交GenBank获得登录号EF523565,根据保守域推测dauW所编码的蛋白属于FAD依赖的氧化还原酶类。将dauW分别克隆至表达载体pET-28a(+)、pET-32a(+),转入大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达。初步实验结果表明dauW在BL21(DE3)中的表达能增加宿主对柔红霉素的抗性,推测该基因可能与天蓝淡红链霉菌对柔红霉素的自身抗性有关。