Determination of Aromatic Components of Rosa davurica Pall. by Headspace Solid Phase Microextraction Combined with GC-MS

[Objectives] To determine the aromatic components of Rosa davurica Pall. [Methods] 42 kinds of aromatic components were identified from the flowers of R. davurica by headspace solid phase microextraction( HS-SPME) combined with gas chromatography-mass spectrometry( GC-MS). The main compounds were alcohols( 54. 88%) and aldehydes( 19. 55%). [Results] The top five components with the highest relative content were phenylethyl alcohol( 12. 69%),geraniol( 9. 85%),citronellol( 8. 80%),nerol( 7. 84%) and 2-n-pentylfuran( 7. 45%). [Conclusions] Headspace solid phase microextraction( HS-SPME) combined with gas chromatography-mass spectrometry( GC-MS) can provide basis for further development and utilization of R. davurica.

Isolation and Characterization of Two New Compounds from Lysimachia Davurica

Two new saponins named davuricoside H and davuricoside K were isolated from the whole plant of Lysimachia davurica. The structures of davuricoside H and davuricoside K were determined by 1-D and 2-D NMR, MS techniques, and chemical methods to be 3β,16α ,28-trihydroxy-olean-12-en-30-oic acid-3-O-β-D-glucopyranosyl-（ 1→2 ）- [β-D-glucopyranosyl-（ 1 → 4 ） ] -α-L-arabinopyranoside and 3β,16or ,28-trihydroxy-olean-12-en-30-oic acid-3-O-{β-D- glucopyranosyl- （ 1 →2 ） - [β-D-glucopyranosyl- （ 1 →4 ） ] -α-L-arabinopyranosyl } -30-O-β-D-glucopyranosyl-ester.

达乌里胡枝子(Lespedeza davurica)混播下叶绿素荧光特性对水分变化的响应

为研究黄土丘陵区白羊草植物群落优势种叶绿素荧光动态变化特性对土壤水分变化的响应,采用盆栽控制试验,设置7个组合比例(白羊草∶达乌里胡枝子, 0∶12, 2∶10, 4∶8, 6∶6, 8∶4, 10∶2和12∶0)和3种水分水平(高水(HW),中水(MW)和低水(LW),对应为田间持水量的80%±5%, 60%±5%和40%±5%),并分别在达乌里胡枝子现蕾期、开花期与结实期将土壤水分从高水降到中水(H-MW)和低水(H-LW),测定了达乌里胡枝子在水分降低后第0天、第1天、第3天、第7天的叶绿素荧光参数。结果表明:在土壤水分阶段干旱胁迫后,最大光化学效率(Fv/Fm)和实际光化学效率(ФPSⅡ)总体上在开花期显著最高、结实期显著最低,且Fv/Fm变化范围为0.767~0.829,表明达乌里胡枝子具有更为稳定的光化学效率;现蕾期和开花期的ФPSⅡ均以H-MW显著高于H-LW,表明土壤水分降低幅度较大显著削弱PSⅡ反应中心的实际光能捕获效率;开花期的非光化学淬灭系数(NPQ)为H-LW显著高于H-MW,表明达乌里胡枝子开花期通过耗散过剩激发能以减轻重度水分胁迫对叶片光合结构的损伤;单播下的Fv/Fm、ФPSⅡ和光化学淬灭系数(q P)显著高于或与混播无显著差异,表明混播对土壤水分阶段降低后达乌里胡枝子的光合反应过程产生抑制作用。本研究为阐明土壤水分变化条件下两草种竞争与共生的生理生态机制提供理论依据。

硫化氢对盐胁迫下达乌里胡枝子生长和抗氧化系统的影响

为探讨外源硫化氢对盐胁迫下达乌里胡枝子(Lespedeza davurica)幼苗生长和抗氧化系统的影响,本试验以盐胁迫下的达乌里胡枝子为研究对象,通过施加不同浓度的外源硫化氢,并在盐胁迫第0,10,20,30 d分别测定幼苗的生长特性和抗氧化系统指标。结果表明:施加外源硫化氢缓减了盐胁迫对达乌里胡枝子幼苗生长的抑制作用,提高了盐胁迫下达乌里胡枝子幼苗抗氧化酶活性以及抗坏血酸和谷胱甘肽含量,增加了叶片相对含水量,降低了叶片相对电导率以及丙二醛的含量。综上所述,施加外源硫化氢在一定程度上提高了达乌里胡枝子幼苗叶片的抗氧化酶活性,延缓了膜脂过氧化的发生,因此增强了达乌里胡枝子幼苗对盐的耐受性。

刺玫根多糖对环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠的免疫调节作用

采用水提醇沉法提取刺玫根粗多糖,以Sevage法和TCA法脱蛋白,进一步分级醇沉法分离纯化得到较纯的60%醇沉物(RDRP)进行结构鉴定和活性评价。苯酚浓硫酸法测定出刺玫根多糖RDRP总糖含量为94.1%;高效凝胶渗透色谱法测定表明主要含有重均分子量为13.1 kDa,相对分散度为1.2的多糖;通过高效离子色谱法和红外光谱测定,鉴定刺玫根多糖为由葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、甘露糖、木糖等5种单糖组成的含有α-构型的中性吡喃多糖。环磷酰胺诱导的免疫抑制小鼠模型实验结果表明,与模型组相比,刺玫根多糖各剂量组小鼠的脾脏和胸腺指数明显升高(P<0.05,P<0.01);血细胞分析仪检测发现白细胞数、红细胞数、血小板显著升高(P<0.05);ELISA法检测血清中免疫相关蛋白IgG、IgM、IgA以及细胞因子TNF-α、IFN-γ、IL-6与IL-2的分泌水平,结果显示,与模型组比较,刺玫根多糖组显著上调小鼠血清中免疫球蛋白IgA、IgG、IgM浓度水平(P<0.01)及IL-2、IFN-γ、TNF-α、IL-6的含量(P<0.01);Western blot法测定各组TLR4、MyD88、TRAF-6和NF-κB p65蛋白的表达水平,发现刺玫根多糖各剂量组脾脏中TLR4、TRAF-6蛋白极显著上升(P<0.01),高剂量组的MyD88蛋白极显著上升(P<0.01),其他组呈现上升趋势;刺玫根多糖各剂量组NF-κB p65蛋白均有上升趋势,因此其免疫调节作用机制可能与TLR/NF-κB通道有关。本研究初步阐明刺玫根多糖的基本结构特征和其免疫调节作用及其机制,为刺玫根多糖的开发应用提供一定价值的实验依据。

达乌里胡枝子愈伤组织及种子EMS诱变研究

为优化达乌里胡枝子愈伤诱导培养基的激素含量及比例,明确甲基磺酸乙酯(EMS)诱变愈伤组织及种子的最佳条件,本研究以达乌里胡枝子种子为外植体,探究了不同激素配比对愈伤诱导的影响,并针对愈伤组织和种子处理分别设置了两时间两浓度(2 h和6 h,0.3%和0.9%)及三时间两浓度(6 h、8 h、10 h,0.4%、0.8%)的EMS处理时间和浓度的组合,研究各处理对愈伤分化系数和后期植株成活率以及种子发芽率、发芽势和幼苗表型变异的影响。结果表明,达乌里胡枝子种子愈伤的最佳激素配比为0.25 mg/L NAA+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D,此时达乌里胡枝子愈伤诱导率为94.9%。EMS诱变达乌里胡枝子愈伤组织的适宜浓度为0.3%,处理时间为6 h,分化系数和植株相对成活率分别为46.31%和47.78%,接近半致死范围,且生根数、根长和平均株高等指标与高浓度EMS处理相比受到的负面影响较小。EMS诱变达乌里胡枝子种子的适宜浓度为0.8%,处理时间10 h,发芽率、出苗率、成苗率分别为53.61%、51.06%和53.28%,均接近半致死量,同时发现多株幼苗叶片出现了明显的形态变异。本试验在达乌里胡枝子原有种质资源基础上,丰富了达乌里胡枝子突变体库,也为后续开展达乌里胡枝子诱变育种研究提供理论依据。

壳聚糖-刺玫果提取物复配涂膜对半干型风干牛肉贮藏品质的影响

在25℃贮藏条件下,以未涂膜的半干型风干牛肉为对照组,用1.5%壳聚糖、0.5%、1.0%、1.5%刺玫果提取物和1.0%2,6-二叔丁基对甲酚(butylated hydroxytoluene,BHT)复配涂膜的半干型风干牛肉为处理组,利用水分含量、色度、过氧化值、pH值、硫代巴比妥酸反应物(thiobarbituric reactive substances,TBARS)值、挥发性盐基氮(total volatile basic nitrogen,TVB-N)值、菌落总数表征半干型风干牛肉在贮藏第0,3,6,9,12天时的品质变化。结果表明,与对照组相比,涂膜处理组均能较好地保持半干型风干牛肉的贮藏品质,其中1.5%刺玫果提取物复配壳聚糖涂膜显著优于其他涂膜(P<0.05),可减缓半干型风干牛肉色泽褐变和水分损失,有效抑制微生物生长以及过氧化值、TBARS值和TVB-N值的上升。

New Cytotoxic Saponins from Lysimachia davurica Ledeb.

To investigate the saponins from whole plants of Lysimachia davurica Ledeb., two new saponins named davuricoside I （compound 1） and E （compound 2） were isolated. Their chemical structures were elucidated as 3β, 16α, 28, 29-tetrihydroxy-olean-12-en-3-O-β-D-glucopyranosyl-（1→2）-β-D-glucuronopyranoside （compound 1） and 3β, 16α, 29-trihydroxy-13, 28-epoxy-oleanane-3-O-β-D-glucopyranosyl-（1→2）-β-D-glucuronopyranoside （compound 2） on the basis of their one- and two-dimensional nuclear magnetic resonance and mass spectrometry data, and chemical methods. Compound 1 showed significant cytotoxic activity against human A2780 cells.

陇东黄土高原优势植物不同龄级株丛数量性状及养分特征

研究草地植物种群数量特征,可揭示其对环境和放牧干扰的适应性机制,以往龄级水平草地植物种群数量性状研究相对缺乏。本研究以2种放牧年限下黄土高原典型草原优势植物(长芒草、达乌里胡枝子和茵陈蒿)为对象,通过对不同龄级下3种植物株丛数量性状及养分特征的定量分析,探究植物种群龄级划分方法,明晰放牧下植物种群数量性状变化规律。结果表明:1)3种植物数量性状在轮牧第6和11年间整体变化小。2)放牧年限对各龄级植物种群株丛特征影响为茵陈蒿<长芒草和达乌里胡枝子,2种轮牧年份下3种植物株丛特征均随龄级增加呈增加趋势;达乌里胡枝子冠幅和基径及长芒草冠幅、基径和分糵数均为幼龄期<其他龄级。3)长芒草磷(P)含量为幼龄期<成年期和老年前期+老年期,达乌里胡枝子和茵陈蒿则与之相反;3种植物粗蛋白(CP)含量为老年前期+老年期<幼龄期和成年期,酸性洗涤纤维(ADF)和中性洗涤纤维(NDF)含量则与之相反;各龄级磷(P)、钙(Ca)、钾(K)和镁(Mg)含量为长芒草<达乌里胡枝子和茵陈蒿。研究表明,依据3种植物株丛分蘖或分枝特征及“空心化”程度,可有效划分其龄级;轮牧下3种植物数量性状具有较高稳定性,放牧年限对植物株丛特性的影响受龄级调控。

刺玫果山荆子桤叶唐棣复合果酒的研制

以刺玫果、山荆子和桤叶唐棣为原料,混合发酵制备刺玫果山荆子桤叶唐棣复合果酒,并采用单因素试验及响应面试验对其进行发酵工艺条件优化。结果表明,复合果酒的最佳发酵工艺条件为刺玫果、山荆子和桤叶唐棣质量比1∶1∶1,果酒酵母添加量0.07%,蔗糖添加量20%,发酵温度25℃,发酵时间13 d。在此优化条件下,刺玫果山荆子桤叶唐棣复合果酒的酒精度为(12.2±0.23)%vol,花青素含量为(65.39±0.14)mg/100 mL,钙离子含量为(54.15±0.23)mg/100 mL,感官评分为(81.70±0.46)分,酒液澄清透明,呈石榴红色,口味香醇。

基于分子对接技术探讨刺玫果对急性心肌缺血的保护作用及其有效成分

目的研究刺玫果乙酸乙酯、正丁醇、水3个提取部位对急性心肌缺血小鼠心肌损伤的保护作用,并采用分子对接技术筛选刺玫果中抗急性心肌缺血的活性成分。方法将小鼠随机分为6组,包括空白组、模型组、生脉饮组、乙酸乙酯组、正丁醇组、水组,连续灌胃给药15 d,在第14、15日腹腔注射盐酸异丙肾上腺素(ISO),建立急性心肌缺血模型,考察刺玫果3个部位对小鼠急性心肌缺血时心率与ST段的影响,并检测小鼠血清和心肌组织中相关指标。然后,从相关文献中确定10个刺玫果各组分的化学成分,通过AutoDockTools软件与6个心肌缺血相关靶标进行对接,根据对接情况筛选活性成分。结果刺玫果乙酸乙酯、正丁醇和水部位均可降低模型小鼠心率、减轻ST段下移现象,降低模型小鼠血清心肌酶的活性,同时使心肌中总超氧化物歧化酶(T-SOD)与过氧化氢酶(CAT)活性升高,丙二醛(MDA)含量降低,且乙酸乙酯组与正丁醇组还能纠正乳酸脱氢酶(LDH)水平的升高与还原性谷胱甘肽(GSH)的减少。而刺玫果中的10个成分与心肌缺血相关蛋白都产生较好结合,其中化合物的结合程度高低顺序为齐墩果酸>熊果酸>木犀草素>槲皮素>原花青素B2>没食子酸>金丝桃苷>橙皮苷>银椴苷>芦丁。结论刺玫果对ISO所致急性心肌缺血有保护作用,以刺玫果乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物效果最佳,且初步推断刺玫果抗急性心肌缺血的有效成分为三萜类、黄酮类、多酚类。

刺玫籽油与2种可食用植物油的品质及体外抗氧化活性比较研究

目的:比较分析刺玫籽油的品质及抗氧化活性与可食用的红松仁油、花生油的差异性。方法:从理化性质、主要成分的含量及体外抗氧化活性分析刺玫籽油与花生油、红松仁油的差异性。结果:相比于花生油及红松仁油,刺玫籽油具有较低的过氧化值、高碘值,而酸值与皂化值无显著性差异。刺玫籽油的α-亚麻酸及亚油酸的含量显著高于花生油及红松仁油,油酸含量显著高于花生油而低于红松仁油;刺玫籽油含有多酚及生育酚的量均显著高于花生油及红松仁油,但黄酮含量无显著性差异。进一步的体外抗氧化活性分析结果发现,刺玫籽油清除ABTS自由基及DPPH自由基的能力均强于花生油及红松仁油,且对自由基的清除率具有显著性差异;刺玫籽油清除超氧自由基及羟基自由基的能力强于花生油,弱于红松仁油,但清除率无显著性差异;刺玫籽油的还原力均强于花生油及红松仁油,但无显著性差异。结论:相较于花生油及红松仁油,刺玫籽油更具有作为天然抗氧化剂的优势,可为刺玫籽油进一步开发利用奠定实验基础。

柱层析法提取刺玫果肉活性成分及其体外活性

探究柱层析循环联合法提取刺玫果肉中目标成分(多糖、总黄酮、总皂苷)的工艺条件及其体外活性。以提取液中目标成分的含量为指标,通过对乙醇体积分数、吸涨体积、浸泡平衡时间、超声时间的考察确定最佳提取工艺。测定刺玫果肉目标成分的提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制率及对亚硝酸盐的清除率。结果表明,在最佳提取条件下,刺玫果肉目标成分的提取率均在90%以上;分离后,干浸膏中多糖、总黄酮、总皂苷的含量分别为428.5、484.5、122.5 mg/g。纯化后,干浸膏中多糖、总黄酮、总皂苷的含量分别为804.1、772.7、396.4 mg/g。刺玫果肉目标成分的提取物抑制α-葡萄糖苷酶活性的能力均强于阳性对照阿卡波糖,表明其具有显著的体外降糖作用;刺玫果肉目标成分的提取物清除亚硝酸盐的IC_(50)值均高于阳性对照维生素C,表明其具有较弱的亚硝酸盐清除活性。柱层析循环联合法可以同时提取多糖、总黄酮、总皂苷,且提取效率较高,为刺玫果产品的开发提供依据。

刺玫果黄酮对胰岛素抵抗HepG2细胞糖代谢功能研究

为研究刺玫果黄酮处理对胰岛素抵抗人肝癌细胞HepG2(IR-HepG2)细胞糖代谢功能,以及关键酶活性的影响,以高浓度胰岛素诱导HepG2细胞建立IR-HepG2细胞模型;刺玫果黄酮处理细胞24 h,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活性,并评价刺玫果黄酮处理对葡萄糖消耗量的影响;测定细胞内糖原积累水平和IR-HepG2细胞关键酶己糖激酶(HK)、丙酮酸激酶(PK)、葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)活性。研究结果表明:以0.1μmol/L胰岛素处理HepG2细胞24 h成功建立IR-HepG2细胞模型;0.10~1.00 g/L刺玫果黄酮处理组细胞葡萄糖消耗率均大于18%,以培养24 h的细胞活性最好。与模型组相比,1.00 g/L刺玫果黄酮处理组使细胞糖原质量分数提高81.45%(P<0.05),HK、PK活性分别提高29.26%(P<0.05)、31.93%(P<0.05),PEPCK、G6PC活性分别降低30.82%(P<0.05)、7.32%(P<0.05)。刺玫果黄酮是可以通过调节IR-HepG2细胞关键酶来调节碳水化合物代谢的潜在生物活性化合物,该发现值得开展深入研究。

干旱胁迫下褪黑素对达乌里胡枝子幼苗生理生化特性的影响

试验旨在探究干旱胁迫下外源褪黑素对达乌里胡枝子(Lespedeza davurica)幼苗生理生化特性的影响。试验以达乌里胡枝子‘晋农1号’品种的幼苗为试验材料,在叶面喷施25、50、100、200、400μmol/L褪黑素,分析褪黑素对自然干旱条件下达乌里胡枝子幼苗的生长情况和抗氧化特性的影响。结果显示,施加外源褪黑素可明显降低达乌里胡枝子幼苗叶片的超氧阴离子(O_(2)^(-))产生速率、过氧化氢(H_(2)O_(2))、丙二醛(MDA)含量以及细胞膜透性,且随着胁迫时间延长,褪黑素的缓解效应越明显。施加外源褪黑素可以提高达乌里胡枝子幼苗中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)等酶构成的酶促抗氧化系统活性,增加抗坏血酸(AsA)、还原性谷胱甘肽(GSH)和类胡萝卜素(CAR)等非酶促抗氧化系统物质的含量,提高植物抵御干旱胁迫的能力。研究表明,外源褪黑素处理可以缓解达乌里胡枝子幼苗干旱胁迫造成的细胞膜过氧化损伤,提高酶促抗氧化系统的酶活性,增加非酶促抗氧化系统的物质含量;喷施100μmol/L的褪黑素效果较好。

体外模拟胃肠道消化对刺玫果提取物生物活性成分及其抗氧化活性的影响

体外模拟胃肠道消化,分析刺玫果提取物的生物活性成分含量,并研究其抗氧化活性。结果表明:刺玫果提取物的生物活性成分有黄酮、多糖、多酚、氨基酸、原花青素、有机酸、抗坏血酸和花青素,其中多糖含量最多,其次为原花青素,而花青素含量最少。体外模拟消化过程得出,口腔消化液、胃消化液、肠消化液、肠透析液及刺玫果提取液对·OH、ABTS^(+)·及·O^(-)_(2)的清除能力变化趋势相似,均随着样品液体积的增加而增加,其中口腔消化液和胃消化液的抗氧化能力较强。

大孔吸附树脂纯化山刺玫果总黄酮的工艺研究

对山刺玫（Rosa davurica Pall.）果总黄酮的大孔树脂纯化工艺进行了优化研究,以比吸附量和比解吸量为考察指标,进行了D-101大孔树脂纯化工艺的优化。结果表明,其最佳工艺条件为生药浓度0.025 g/m L;最佳上样量为0.23 g/g（生药量/树脂量）;最佳吸附时间为30 min;上柱液p H为2.0-4.0;吸附速率为1 BV/h;洗脱液为3 BV 70%乙醇,洗脱流速为1 BV/h。在此最佳条件下得到的山刺玫果提取物总黄酮含量由20%提高到85%左右。采用D-101型大孔树脂纯化山刺玫果总黄酮的效果较好,且操作简单,为山刺玫果的综合利用提供了依据。

刺玫果多糖含量测定方法优选

[目的]优选刺玫果多糖的含量测定方法。[方法]通过精密度试验、稳定性试验、回收率试验和线性关系考察比较苯酚硫酸法和蒽酮硫酸法2种常用多糖含量测定方法在测定刺玫果多糖中的应用。[结果]苯酚硫酸法测定刺玫果多糖含量优于蒽酮硫酸法。[结论]该研究确定的多糖含量测定方法稳定、可靠,可用于刺玫果多糖的含量测定。

刺玫瑰组织培养研究

[目的]探索组织培养刺玫瑰最适宜的培养基。[方法]以刺玫瑰茎段为外植体进行组织培养研究。[结果]组织培养刺玫瑰最佳的初代培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.10 mg/L,继代培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.20mg/L,生根培养基为1/2 MS+IBA 1.0 mg/L。[结论]该研究结果可为研究刺玫瑰的快繁技术提供了参考。