基于高通量测序分析毛菊苣醇提物对db/db小鼠肠道菌群的影响

该文探究毛菊苣醇提物对糖尿病小鼠(db/db小鼠)肠道菌群的影响。该研究以m/m小鼠为正常对照组(CON组),db/db小鼠随机分为模型组(MOD组)、二甲双胍组(MET组)、毛菊苣醇提物低剂量组(CGL组)、毛菊苣醇提物高剂量组(CGH组)。灌胃给药8周,对小鼠体质量、空腹血糖、肝脏总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)进行分析,对小鼠粪便进行16S rRNA测序分析,探究毛菊苣醇提物对小鼠肠道菌群的影响。毛菊苣醇提物高剂量组可调节db/db小鼠体质量及血糖,显著降低db/db小鼠TC、TG水平(P<0.05);测序结果显示CON组、MOD组、CGH组三组小鼠肠道菌群情况存在差异,毛菊苣醇提物给药可改善db/db小鼠的肠道菌群失调,上调db/db小鼠肠道菌群中有益菌双歧杆菌属(Bifidobacterium)、Romboutsia、普雷沃氏菌属(Prevotella)菌群相对丰度。研究证明了毛菊苣醇提物给药能调节db/db小鼠肠道菌群,通过提高有益菌相对丰度调节糖脂代谢,可为新疆地产毛菊苣药材资源的开发利用提供全新的研究思路。

基于转录组学探讨当归芍药散对db/db小鼠肾脏保护作用的潜在机制

目的基于转录组学和实验验证探究当归芍药散对db/db糖尿病肾病小鼠肾脏的保护机制。方法25只8周龄造模成功的db/db小鼠按体质量随机均分为模型组(20 mL/kg蒸馏水)、达格列净组(1.3 mg/kg)、当归芍药散低剂量组(8.39 g/kg)、当归芍药散中剂量组(16.77 g/kg)、当归芍药散高剂量组(33.54 g/kg),每组5只;另选5只同龄db/m小鼠作为空白组(20 mL/kg蒸馏水)。每组灌胃1次/d,连续6周。给药结束后,检测各组小鼠体质量、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、口服糖耐量试验(oral glucose tolerance test,OGTT)的曲线下面积(area under thecurve,AUC);采用全自动生化分析仪检测尿白蛋白肌酐比值(urea albumin creatinine ratio,UACR)、甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC);采用肌酐比色法检测血肌酐(serum creatinine,Scr);采用尿素比色法检测小鼠血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN);采用HE染色观察肾脏组织病理形态;采用转录组学芯片技术检测小鼠肾组织差异基因,并对当归芍药散中剂量组差异基因进行KEGG富集分析;采用RT-PCR法检测表达量TPM>10的核心基因在肾脏组织中的mRNA表达水平。结果与空白组比较,模型组小鼠体质量、OGTT-AUC、FBG、UACR、Scr、BUN、TG、TC显著升高(P<0.01)。与模型组相比,达格列净组、当归芍药散各剂量组小鼠体质量、OGTT-AUC、FBG、UACR、Scr、BUN、TG、TC均降低(P<0.05,P<0.01)。与空白组相比,模型组共筛选出1129个差异基因,其中上调差异基因337个、下调差异基因792个。与模型组相比,当归芍药散共筛选出271个差异基因,其中上调差异基因195个、下调差异基因76个。空白组、模型组、当归芍药散中剂量组三组差异共表达基因57个,其中TPM>10的核心基因共12个,包括Gsta2、Cyp4a12a、Slc8a1、Abcc4、Cpeb4、Serpina1b、Npl、Aacs、Kap、Slc5a10、Tmem252、Ifi27l2a。12个核心基因的mRNA表达水平与转录组测序趋势相同。与模型组比较,当归芍药散中剂量组小鼠Gsta2、Abcc4、Slc8a1、NPL mRNA表达水平升高(P<0.05,P<0.01),Slc5a10、Tmem252 mRNA表达水平下降(P<0.05)。当归芍药散中剂量组差异基因富集于药物代谢-细胞色素P450、谷胱甘肽代谢、活性氧等相关通路。结论当归芍药散具有改善糖尿病肾病预后的作用,其机制可能与调控Gsta2、Slc5a10、Abcc4、Slc8a1、Tmem252、Npl等基因表达,调控细胞色素P450、谷胱甘肽代谢、活性氧等信号通路相关。

山奈酚通过抑制NLRP3炎症小体介导的脂肪组织炎症改善db/db小鼠胰岛素抵抗发生

目的:探讨山奈酚能否通过调控肥胖小鼠脂肪组织炎症改善胰岛素抵抗发生并研究作用机制。方法:db/m小鼠作为对照组,db/db雄性小鼠随机分为模型组、二甲双胍组(0.15 g·kg^(-1)·d^(-1))和山奈酚组(50 mg·kg^(-1)·d^(-1))。连续灌胃给药6周,每周记录小鼠体重,6周后进行葡萄糖耐量试验、胰岛素耐量试验、皮下和附睾白色脂肪组织质量测定;HE染色观察脂肪组织形态学变化,免疫组化法观察巨噬细胞向脂肪组织的浸润程度及巨噬细胞标志物F4/80的表达,实时荧光定量PCR检测TNF-α和IL-18以及Arg-1和IL-10的mRNA表达,蛋白质免疫印迹试验检测NLRP3、pro-caspase1、cle-caspase1和IL-1β表达。结果:与模型组相比,山奈酚能够显著抑制db/db小鼠脂肪质量增加,抑制脂肪细胞肥大。山奈酚组小鼠脂肪组织巨噬细胞浸润减少,TNF-α和IL-18 mRNA表达减少,Arg-1和IL-10 mRNA表达增加;山奈酚治疗能够抑制小鼠附睾脂肪组织NLRP3、caspase1以及IL-1β表达,抑制NLRP3炎症小体激活。结论:山奈酚可以通过抑制NLPR3炎症小体介导的脂肪组织炎症改善db/db小鼠胰岛素抵抗的发生。

壳寡糖延缓db/db小鼠自发性Ⅱ型糖尿病发生发展的作用

研究不同剂量壳寡糖延缓自发性Ⅱ型糖尿病db/db小鼠糖代谢异常发生、发展过程的效果。每日灌胃壳寡糖(COS),定期观测小鼠体重、摄食量、空腹血糖、餐后血糖等,利用口服糖耐量实验的血糖曲线下面积(AUC),评价各组小鼠自发性Ⅱ型糖尿病发展进程。各剂量COS均可有效维持db/db小鼠体重稳定、控制每日饮水量;可降低db/db小鼠空腹血糖、餐后血糖和AUC;延缓小鼠进入糖尿病前期和糖尿病阶段,其中各COS组糖尿病前期阶段可延长50%~100%。COS可减轻db/db小鼠的糖尿病早期症状,延缓其进入糖尿病前期和糖尿病阶段,延长病程前期发展过程,控制血糖水平从而在一定程度上阻滞Ⅱ型糖尿病的发展进程。

加味葛根芩连汤对糖尿病db/db小鼠内质网应激及胰岛素抵抗的影响

目的观察加味葛根芩连汤对糖尿病小鼠肝脏内质网应激及胰岛素抵抗的影响,探讨其改善2型糖尿病的作用机制。方法将65只db/db小鼠随机分为模型组、二甲双胍组和加味葛根芩连汤低、中、高剂量组,每组13只,另取13只m/m小鼠作为空白组,给药组分别予相应药物灌胃12周。检测小鼠体质量、空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c),ELISA检测血清空腹胰岛素(FINS)、游离脂肪酸(FFA)水平,全自动生化分析仪检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)含量,HE染色观察肝组织病理改变,油红O染色观察肝脏脂质蓄积,Western blot检测肝组织肌醇需求酶1(IRE1)、p-IRE1、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p-JNK、胰岛素受体底物1(IRS1)、p-IRS1蛋白表达,RT-PCR检测肝组织IRE1、JNK、IRS1 mRNA表达。结果与空白组比较,模型组小鼠体质量、FBG、FINS、HbA1c、FFA、TC、TG水平均显著升高,肝组织结构严重破坏,组织内有大量脂滴,肝组织IRE1、p-IRE1、JNK、p-JNK蛋白表达显著升高,IRS1、p-IRS1蛋白表达显著降低,IRE1、JNK mRNA表达显著升高,IRS1 mRNA表达显著降低,差异均有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,加味葛根芩连汤高剂量组和二甲双胍组小鼠体质量、FBG、FINS、HbA1c、FFA、TC、TG水平显著降低,肝组织损伤有所减轻,肝细胞脂质蓄积减少,肝组织IRE1、p-IRE1、JNK、p-JNK蛋白表达显著降低,IRS1、p-IRS1蛋白表达显著升高,IRE1、JNK mRNA表达显著降低,IRS1 mRNA表达显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论加味葛根芩连汤可能通过调节IRE1/JNK/IRS1信号通路抑制胰岛素抵抗,减轻内质网负荷,对2型糖尿病起治疗作用。

中西药治疗糖尿病视网膜病变db/db小鼠的研究进展

糖尿病视网膜病变(Diabetic retinopathy,DR)是糖尿病导致的神经血管单元病变,发病率随着糖尿病患者人口增多而显著上升,是成年人低视力和致盲的主要病因,然而其发病机制十分复杂且治疗手段有限,故利用合理的动物模型去探寻DR的发病机制与治疗靶点至关重要。db/db小鼠是目前比较成熟的一种自发性2型糖尿病(T2DM)动物模型,广泛应用于2型DR的早期防治研究中。本文就db/db小鼠模型在DR发病机制探索和中西医药理研究等方面的进展予以阐述,以期为DR的相关机制研究及药物研发提供一定的参考依据。

2型糖尿病db/db小鼠骨强度和肠道内容物菌群的变化

目的观察db/db小鼠血糖、骨强度和肠道菌群的变化。方法20周龄雄性db/db小鼠及野生型小鼠各6只,检测空腹血糖,行三点弯曲实验检测股骨力学指标,采用16S rRNA高通量测序技术对小鼠肠道内容物基因V3-V4区进行测序及生物信息分析。结果db/db组小鼠体重(P<0.01)和血糖(P<0.05)均显著升高。db/db小鼠胫骨刚度、最大位移、最大能量吸收、最大载荷均显著低于WT小鼠(P<0.01)。db/db小鼠α多样性指标中的Chao1指数、ACE指数和observed species均显著降低(P<0.05);两者肠道细菌群落组成存在显著差异(ANOSIM:P=0.02)。db/db小鼠毛螺菌属(Lachnospira)显著降低(P<0.01);变形菌门(Proteobacteria)、δ-变形菌纲(Deltaproteobacteria)、脱硫弧菌目(Desulfovibrionales)显著升高(P<0.05),Alloprevotella属极显著升高(P<0.01)。结论本研究结果表明db/db小鼠高血糖且骨强度降低,是T2DOP的适宜动物模型。db/db小鼠与WT小鼠肠道菌群的多样性及特定菌群丰度存在差异,为研究肠道菌群与糖尿病性骨质疏松提供了理论基础。

db/db小鼠胰岛的分离与特征分析

目的分离db/db小鼠胰岛,并对其特征进行检测和分析。方法采用胶原酶V对10只db/db小鼠胰岛分离进行逆行胰管灌注和消化,用Ficoll-1077和Ficoll-1119进行胰岛的不连续密度梯度纯化,对分离的胰岛进一步进行手工挑选,并用DTZ进行胰岛和纯度鉴定,用透射电镜观察胰岛内部分泌颗粒等情况。结果经本方法分离可得到db/db小鼠胰岛数量为(122.4±6.6)个/只,当量为(483.6±82.3)IEQ/只,与ICR小鼠胰岛分离结果差异有统计学意义(P<0.05);db/db小鼠胰岛DTZ染色后显淡红色;胰岛大小指数为(3.96±0.64),显著大于ICR小鼠胰岛(P<0.05);透射电镜下显示β细胞中的胰岛素分泌颗粒减少,分泌颗粒颜色较浅。结论采用本方法可分离得到db/db小鼠胰岛,为后续开展基于胰岛功能和特征变化的2型糖尿病患者治疗研究提供一种参考。

消渴丸对2型糖尿病db/db小鼠降压降脂的拆方研究

【目的】探讨消渴丸对2型糖尿病db/db小鼠的降压降脂作用。【方法】通过拆方方法,比较消渴丸低剂量组(1.0 g/kg)、消渴丸高剂量组(4.0 g/kg)、消渴丸纯中药组(3.996 g/kg)和格列本脲组(4.0 mg/kg)自发性糖尿病db/db小鼠给药前后收缩压和舒张压、空腹血糖、胰岛素、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、血清总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的变化。比较给药处理后,各组间血清血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和肝脏过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)的含量。【结果】与正常对照组比较,模型组小鼠具有2型糖尿病特征,并伴有收缩压和血脂异常升高(P<0.05或P<0.01)。在血压调控方面,消渴丸低、高剂量组和消渴丸纯中药组在给药4周后收缩压低于模型组(P<0.05),而格列本脲组收缩压无显著变化(P>0.05);在调节空腹血糖、胰岛素和HOMA-IR方面,给药4周后消渴丸高剂量组与格列本脲组疗效相当(P>0.05),且其调控空腹血糖和HOMA-IR作用均优于消渴丸低剂量组和消渴丸纯中药组(P<0.05);在血脂调控方面,消渴丸低、高剂量组和消渴丸纯中药组TC和LDL-C水平的降低效果与格列本脲组相当(P>0.05)。AngⅡ、PPARα指标结果显示:与模型组比较,消渴丸低、高剂量组和消渴丸纯中药组血清AngⅡ水平均显著降低(P<0.05或P<0.01),而格列本脲组无显著性差异(P>0.05);与模型组比较,消渴丸低、高剂量组,消渴丸纯中药组和格列本脲组肝脏PPARα水平均显著升高(P<0.05或P<0.01),其中,消渴丸高剂量组肝组织PPARα水平最高。【结论】消渴丸对2型糖尿病db/db小鼠不仅具有调控血糖,也有降压和降血脂效果,其疗效是消渴丸纯中药部分和西药格列本脲部分协同作用的结果。消渴丸主要通过格列本脲调控HOMA-IR起到降低血糖的作用,通过消渴丸纯中药部分抑制AngⅡ降低收缩压而实现调控血压,而中药部分与西药部分协同升高肝组织PPARα表达进而调控血脂。

恒古骨伤愈合剂对db/db小鼠的降血糖和改善肠道菌群作用研究

目的 探索恒古骨伤愈合剂对db/db小鼠血糖和肠道微生物的影响。方法 将野生型小鼠作为对照组,db/db小鼠随机分为模型组和恒古骨伤愈合剂治疗组;灌胃给药12周后,检测空腹血糖、血清糖化血红蛋白和胰岛素含量,使用16S rDNA技术分析小鼠肠内容物菌群变化及预测菌群功能。结果 与模型组比较,恒古骨伤愈合剂降低db/db小鼠空腹血糖(P<0.01)、血清糖化血红蛋白(P<0.01)、胰岛素抵抗指数(P<0.01),升高胰岛素含量(P<0.01);恒古骨伤愈合剂增加db/db小鼠盲结肠有益菌丰度,降低害菌丰度,其中马文氏菌属的丰度显著升高(P<0.01);恒古骨伤愈合剂抑制了db/db小鼠菌群D-精氨酸和D-鸟氨酸代谢、鞘脂代谢、半乳糖代谢的降低及赖氨酸降解、硫中继系统、丙酸代谢的升高(P<0.05)。结论 恒古骨伤愈合剂具有降血糖功效和调节db/db小鼠肠道微生态平衡的作用。

恒古骨伤愈合剂联合广谱抗生素改善db/db小鼠胰岛素抵抗和肠道菌群

目的探究恒古骨伤愈合剂联合广谱抗生素暴露对db/db小鼠胰岛素抵抗和肠道菌群影响。方法以野生型小鼠作对照,db/db小鼠随机分为4组:模型组、抗生素组、恒古骨伤愈合剂组、复合干预组;给药11周后,检测体重、空腹血糖、血清胰岛素,计算胰岛素抵抗指数,16S rDNA分析动物肠内容物菌群。结果与对照组比较,db/db小鼠体重、空腹血糖、胰岛素抵抗指数升高(P<0.05)。相对于db/db小鼠,抗生素(ABS)组、恒古骨伤愈合剂(OK)组和复合干预组(AO)血糖和岛素抵抗指数(HOMA-IR)降低(P<0.05);ABS组肠道菌群的shannon、simpson和pielou_e指数下降(P<0.05);而OK组升高(P<0.05);AO组仅shannon和pielou_e升高(P<0.05)。在门水平上,OK组厚壁菌门(P<0.05)、ABX(P<0.01)和AO组(P<0.01)变形菌门的丰度升高,OK组(P<0.05)、AO组(P<0.01)和ABX(P<0.01)的拟杆菌门相对丰度降低;在科水平,OK组毛螺菌科(P<0.05)、ABX和AO组肠杆菌科、萨特菌科及AO组坦纳菌科的丰度均升高(P<0.01),而OK组Muribaculaceae丰度降低(P<0.05)。LEFse分析显示,ABX组的优势菌均为变形菌门。OK组毛螺菌科NK4A136组和乳杆菌属,脱硫杆菌科和普雷沃氏菌科富集。AO组古氏副拟杆菌,阿克曼菌属和γ-变形菌纲摩根菌科及α-变形菌纲富集。结论广谱抗生素、恒古骨伤愈合剂单独或联合使用均有降低db/db小鼠血糖和胰岛素抵抗的作用,恒古骨伤愈合剂可改善抗生素对db/db肠道微生态损害。

db/db小鼠的实验室应用

db/db小鼠为广泛应用的2型糖尿病动物模型,由瘦素受体(leptin receptor,Lepr)的自发性突变引起极度肥胖、多食、消渴、多尿。其表型的严重程度受基因背景的影响,在C57BLKS/J背景下更严重。Lepr还在其它多个位点发生自发性突变,产生一系列肥胖动物,包括db3J/db3J小鼠、db5J/db5J小鼠、dbpas/dbpas小鼠、Zucker fa/fa大鼠和Koletsky fak/fak大鼠等。这些啮齿动物在食欲旺盛和严重肥胖方面表型相似,但在血糖、肾脏损伤及生殖能力等方面的表型不尽相同,为探讨Lepr的复杂功能提供了丰富的素材。本文将就瘦素信号通路的发现史,db/db小鼠在代谢、生殖、免疫等方面的异常表型,其实验室应用、繁殖与鉴定策略,其它自发性突变动物的表型差异及对应的Lepr突变模式等进行较全面的综述。

红芪多糖对糖尿病肾病db/db小鼠肾功能和肾脏组织中GluT-1 mRNA和蛋白表达水平的影响

目的:探讨红芪多糖对糖尿病肾病(DN)db/db小鼠肾功能和肾脏组织中葡萄糖转运蛋白-1(GluT-1)的mRNA和蛋白表达的影响,阐明其可能的作用机制。方法:将10只db/m小鼠作为正常对照组;50只肥胖型2型糖尿病模型db/db小鼠随机分为模型组,依那普利组,红芪多糖低、中和高剂量组;每组10只。正常对照组和模型组小鼠分别灌胃给予生理盐水0.5 mL·kg-1·d-1,其他各组小鼠分别灌胃给予依那普利10mg·kg-1·d-1和红芪多糖100、200和400mg·kg-1·d-1,共8周。苦味酸法测定小鼠血肌酐(SCr)水平,酶偶联速率法测定血尿素氮(BUN)水平,ELISA法测定24h尿微量白蛋白(UMALB)水平;RT-PCR法测定小鼠肾脏组织中GluT-1mRNA的表达;Western blotting法和免疫组织化学法测定小鼠肾脏组织中GluT-1蛋白的表达。结果:与模型组比较,依那普利组和红芪多糖各剂量组SCr、BUN、UMALB和GluT-1mRNA及蛋白表达水平均降低,其中红芪多糖高剂量组和依那普利组降低明显(P<0.01)。HE及Masson染色,红芪多糖高剂量组小鼠肾小球内炎症细胞浸润较少,毛细血管腔通畅,肾小管及肾间质内胶原蛋白沉积不明显。结论:红芪多糖可改善db/db小鼠的肾功能并明显抑制GluT-1mRNA和蛋白的表达,提示红芪多糖可能通过抑制肾小球系膜细胞膜上GluT-1的表达而延缓DN的发展。

红芪多糖对db/db小鼠糖尿病心肌病心肌NF-κB p65与MMP-9表达的影响

目的:观察红芪多糖(HPS)对db/db小鼠心肌组织核转录因子(NF-κB p65)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白与mRNA表达的影响,探讨其防治心肌间质纤维化可能的作用机制.方法 :将60只雄性db/db小鼠随机分为5组:HPS高、中、低剂量组,罗格列酮组与模型组;12只雄性db/m小鼠为正常组.干预组小鼠连续灌胃8周,于干预前后每2周测空腹血糖、体质量各1次.第8周末心脏取血后,取心脏左室心肌组织,分别用于Masson染色、电镜观察心脏超微结构以及Western blotting、逆转录-免疫酶联反应(RT-PCR)法检测其NF-κB p65、MMP-9的蛋白与mRNA表达情况.结果:HPS干预8周后,与模型组比较:HPS高、中剂量组与罗格列酮组小鼠血糖下降明显(P<0.05),干预组小鼠体质量变化无明显差异(P>0.05);Masson染色可见亮绿色胶原纤维在心肌细胞间及血管周围明显增多且呈堆积状分布;电镜观察可见HPS高剂量组与罗格列酮组小鼠心肌组织内线粒体数量与破坏程度、糖原颗粒及脂滴沉积现象均有明显改善;Western blotting、RT-PCR检测结果显示,HPS高剂量组、罗格列酮组小鼠心肌组织中NF-κB p65、MMP-9的蛋白与mRNA表达量均明显降低(P<0.05).结论:HPS可降低db/db小鼠心肌组织中NF-κB p65、MMP-9蛋白与mRNA的表达水平,减轻其炎症反应状态,对心肌的间质纤维化病变具有一定的防治作用.

姜黄素对db/db小鼠肾组织p-STAT3及IκB蛋白的影响

目的:观察姜黄素对db/db小鼠糖尿病肾病的疗效,并探讨其可能的作用机制。方法:雌性db/db小鼠10只,随机分为模型组和姜黄素治疗组,5只db/m小鼠为正常对照组,姜黄素治疗组予以姜黄素200 mg/(kg·d)连续灌胃18周。实验结束时,尾静脉采血测血糖,ELISA检测小鼠24 h尿蛋白,PAS染色观察小鼠肾组织病理改变,免疫组织化学检测IV型胶原以及纤连蛋白(fibronectin,FN)在肾组织的表达,Western印迹检测磷酸化的信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)及IκB在肾组织的表达。结果:与db/m小鼠比较,db/db小鼠体型肥胖,血糖明显升高,伴有大量蛋白尿;病理改变为肾小球肥大,系膜区扩张,基膜增厚,细胞外基质(extracellular matrix,ECM)合成增加;Western印迹检测肾组织中磷酸化的STAT3表达增加,IκB表达减少。与db/db小鼠比较,姜黄素治疗后明显降低db/db小鼠24 h尿蛋白,减少肾组织中IV型胶原以及FN的表达,抑制STAT3磷酸化及IκB降解。结论:姜黄素可以减少2型糖尿病模型db/db小鼠的蛋白尿,减轻肾小球硬化,其作用机制可能与抑制STAT3磷酸化及IκB降解有关。

荞麦花叶发酵提取物对2型糖尿病db/db小鼠心肌损伤的影响

目的探讨荞麦花叶发酵提取物(EFBFL)对自发肥胖2型糖尿病db/db小鼠心肌损伤的保护作用及其可能的机制。方法 9周龄♂db/db小鼠随机分为EFBFL高(EFBFL-H,0.1 g·kg^(-1))、低(EFBFL-L,0.05 g·kg^(-1))剂量组,二甲双胍对照组,模型对照组,每组10只。同时以10只db/m小鼠为正常对照组。各组均每天灌胃给药1次,连续8周。于给药前及给药后第2、4、6、8周末检测小鼠随机血糖(RBG),8周后处死取血清检测肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)和糖基化终末代谢产物(AGEs)含量;HE染色光镜下观察心肌组织形态学改变,电镜下观察心肌超微结构;免疫组化法和Western blot法检测心肌组织葡萄糖转运蛋白4(Glut4)表达。结果 EFBFL能有效抑制db/db小鼠心肌细胞损伤及心肌纤维化的病理进程,降低小鼠血糖及血清中CK、CK-MB、AGEs的含量,增加小鼠心肌组织Glut4蛋白表达水平。结论 EFBFL对自发肥胖2型糖尿病db/db小鼠心肌损伤具有抑制作用,其机制可能与降低小鼠血糖、抑制AGEs的产生及促进心肌细胞Glut4蛋白的表达有关。

诱发性2型糖尿病小鼠模型与自发性db/db小鼠特性的比较

目的建立诱发性2型糖尿病小鼠模型,并将其与自发性2型糖尿病小鼠db/db进行比较分析。客观评价两种2型糖尿病小鼠模型,为糖尿病研究中动物模型的选择与实际应用提供实验依据。方法高脂饲料喂养C57BL/6J小鼠4周,腹腔连续3次注射STZ,建立诱发性2型糖尿病小鼠模型。感染后4周,大体肉眼观察小鼠的肝脏、肾脏,测定糖耐量,血清生化指标及血清细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ、TNF-α、IL-17、IL-10表达量,将其与同龄的自发性2型糖尿病小鼠db/db进行比较分析。结果肉眼观察发现,两组模型小鼠的肝脏、肾脏与对照组均具有明显差异。糖耐量分析中,两组模型小鼠与对照组小鼠各时间点的血糖值均具有统计学差异(P<0.05),耐糖功能低下,两组模型小鼠间血糖值无统计学差异。血液生化指标中,与对照组小鼠相比,两组模型小鼠GLU、CHOL、LDLC明显升高(P<0.05);两组模型小鼠相互比较,诱发性2型糖尿病小鼠血脂水平较高(P<0.05)。免疫指标比较显示:除IL-2外,两组模型小鼠血清中细胞因子水平均较对照组小鼠明显升高(P<0.05),而db/db小鼠血清中细胞因子表达较诱发性糖尿病小鼠高,其中IL-6、IFN-γ、TNF-α具有显著性差异(P<0.05)。结论两组2型糖尿病模型小鼠均在一定程度上模拟了人类糖尿病患者症状,但由于糖尿病产生的原因不同而存在着一定的差异,研究者可根据实际需要参照相关数据进行选择。

氯原酸对db/db小鼠糖脂代谢紊乱的影响及其作用机制

目的研究氯原酸（CGA）对自发性肥胖糖尿病db/db小鼠糖脂代谢紊乱的影响及其作用机制。方法将13只5~6周龄雄性db/db小鼠随机分为db/db-CGA组（n=7）和db/db-CON组（n=6）,13只5~6周龄雄性db/m小鼠随机分为db/m-CGA组（n=6）和db/m-CON组（n=7）;CGA组均给予80 mg/（kg.d）CGA灌胃,CON组均给予等体积PBS灌胃。12周后检测血浆、肝脏、骨骼肌中糖脂生化指标,内脏脂肪组织中脂联素和内脂素含量,肝脏葡萄糖-6-磷酸酶（G-6-Pase）和过氧化物酶体增殖物激活受体-α（PPAR-α）的mRNA水平及其蛋白表达。结果给予CGA12周后,db/db-CGA组小鼠血浆、肝脏和骨骼肌中三酰甘油含量和空腹血糖均明显低于db/db-CON组（P均〈0.05）,肌糖原含量明显高于db/db-CON组（P〈0.05）;脂联素水平明显高于db/db-CON组（P〈0.01）,低于db/m-CGA组（P〈0.05）;内脂素水平明显低于db/db-CON组（P〈0.01）,高于db/m-CGA组（P〈0.05）;G-6-Pase mRNA表达水平较db/db-CON组明显下降（P〈0.05）,PPAR-αmRNA和蛋白表达水平均较db/db-CON组明显升高（P〈0.05）。结论 CGA可改善自发性肥胖糖尿病小鼠糖脂代谢紊乱,其机理可能与调节脂肪因子分泌,上调肝脏PPAR-α水平及抑制G-6-Pase表达有关。

Ⅱ型糖尿病肾病模型db/db小鼠血浆的代谢组学研究

目的采用基于核磁共振的代谢组学技术研究糖尿病肾病模型db/db小鼠血浆中小分子代谢物的变化。方法用核磁共振技术检测db/db小鼠(6只)和db/m小鼠(6只)血浆中的小分子代谢物,应用模式识别技术对积分数据进行正交偏最小二乘辨别(OPLS-DA)分析及相关性分析,利用MATLAB软件做相关系数图。结果统计分析结果显示,与对照组db/m小鼠相比,试验组db/db小鼠血浆中葡萄糖和氧化三甲胺(TMAO)的含量升高,多种氨基酸含量下降。结合代谢途径分析发现,糖尿病肾病小鼠体内存在氨基酸代谢异常和能量代谢异常,肾脏受到损伤。结论本文所采用的基于核磁共振的代谢组学技术能全面客观地反映糖尿病肾病小鼠血浆中的代谢物变化,潜在的代谢标志物分析及代谢途径探讨将为临床诊断及机制研究提供新思路。

红芪多糖对12周龄糖尿病db/db小鼠血脂的影响

目的:观察红芪多糖对12周龄糖尿病db/db小鼠血脂、血糖的影响,以进一步评价红芪多糖对2型糖尿病糖脂代谢紊乱的调节作用。方法:将40只12周龄雄性SPF级BKS背景肥胖型2型糖尿病db/db小鼠随机分为红芪多糖(HPS)高剂量组、HPS中剂量组、HPS低剂量和模型对照组,每组10只;另外10只同品系非糖尿病db小鼠为正常对照组。分别给予红芪多糖及生理盐水灌胃治疗8周后观察各组小鼠的血脂情况。结果:红芪多糖高、中剂量组能明显改善db/db小鼠血脂水平(P<0.01),而红芪多糖低剂量组与模型组比较未见明显差异(P>0.05);在实验过程中,除正常对照组外,其余各组血糖均不同程度上升,治疗8周时,HPS高剂量组与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:红芪多糖对12周龄的db小鼠血脂、血糖有一定的调节作用,对研究血脂与2型糖尿病、肥胖、脂肪肝的关系及治疗有一定意义。