二丁酰环腺苷酸(dbcAMP)对猪脂肪和蛋白质代谢的调控

通过皮下注射和饲料添加不同剂量二丁酰环腺苷酸 (dbc AMP)进行饲养试验 ,研究了其对生长肥育猪脂肪和蛋白质代谢调控的效果。结果表明 :皮下注射 1.0 mg/ kg和饲料添加 2 0 mg/ kg为最佳调控剂量 ,生长猪血清脂肪酶活性分别提高 37.6 2 %和 37.2 9% (P<0 .0 5 ) ,血脂含量分别提高 14 .77%和 15 .6 6 % (P<0 .0 5 ) ;肥育猪血清脂肪酶活性分别提高 33.0 1%和 32 .35 % (P<0 .0 5 ) ,血脂含量分别提高 12 .36 %和 15 .97% (P<0 .0 5 ) ;生长猪和肥育猪血清TG、HDL、VL DL 含量明显提高 (P<0 .0 5 ) ;肥育猪背膘厚度明显下降 ,瘦肉率明显提高 (P<0 .0 5 )。生长猪和肥育猪血清 TP、AL B和 GL OB含量增加 (P<0 .0 5 ) ,AL T、AST和 AL P活性提高 (P<0 .0 5 ) ;肌肉中干物质和粗蛋白含量明显提高 (P<0 .0 5 )。由此证明 ,dbc

DBcAMP对大鼠肝脏冷缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨DBcAMP对大鼠移植肝脏在冷缺血再灌注损伤的保护作用。方法:应用SD大鼠原位肝移植(OLT)动物模型,根据保存液的不同,80只大鼠随机分为3个组:HC-A液对照组(A组,n=30);DBcAMP+HC-A液实验组(B组,n=30);UW液对照组(C组,n=20)。所有组在单纯低温保存8h再行原位肝移植术,测定肝组织ATP含量和肝细胞内游离Ca2+浓度变化情况、血清转氨酶,进行组化染色。结果:B组与A组相比,低温保存8h末ATP含量(μmol/g湿重)较高,分别为0.53±0.10,0.48±0.08组间有显著性差异(P<0.05)。B组与A组相比,门静脉开放6h后肝细胞内游离Ca2+浓度(nmol/L)低,分别为419.30±51.12,472.20±57.93,组间有显著性差异(P<0.05);血清ALT、AST(U/L)均较低,分别为3153±741.79,2208±450.34;3790±1029.82,2527±662.20组间有显著性差异(P<0.01)。PAS染色示门静脉开放后,B组较A组肝组织糖原含量少。HE染色及电镜下观察B组较A损伤明显减轻,但是仍比C组重。结论:DBcAMP对大鼠肝脏冷缺血再灌注损伤具有保护作用。

二丁酰环腺苷酸(dbcAMP)对生长肥育猪免疫功能影响的研究

选择健康、体重(30 kg)和胎次相近、品种为长白×撒坝杂交断奶仔猪42头。试验设7个处理组,其中1个对照组。用二丁酰环腺苷酸(dbcAMP)对Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ组猪做不同剂量皮下注射(0.5,1.0,1.5mg/kg)和Ⅳ,Ⅴ,Ⅵ组猪做不同剂量饲料添加(10,20,30 mg/kg)处理,Ⅶ为对照组,研究其对猪免疫机能调控的效果。结果表明:在30～60 kg阶段,试验组Ⅱ,Ⅴ与对照组Ⅶ相比C3水平分别提高38.89%和44.44%(P<0.05),IgM水平分别提高18.49%和28.88%(P<0.05),IgG水平分别提高32.76%和48.75%(P<0.05);在60～90 kg阶段,试验组Ⅱ,Ⅴ与对照组Ⅶ相比IgG水平分别提高50.15%和41.86%(P<0.05)。

dbcAMP诱导的EoL-1分化和凋亡与bcl-2家族的关系

目的:探讨dbcAMP(dbutyrylcyclicAMP)诱导的EoL-1(eosinophilicleukemiacellline)分化和凋亡与bcl-2家族的关系。方法:通过免疫印记和流式细胞仪调查bcl-2家族蛋白在dbcAMP刺激的EoL-1细胞中的表达。结果:EoL-1在正常培养条件下表达高水平的bcl-2、bcl-xL和中等水平的bax,但未表达bcl-xs。dbcAMP诱导了EoL-1细胞下调表达bcl-2和bax及上调表达bcl-xs。结论:dbcAMP诱导EoL-1分化和凋亡与bcl-2的降低以及bcl-xs的升高有关.

dbcAMP吸收特性研究

近年来,许多研究已证实了外源cAMP(环腺苷酸)对动物生长的调节作用,然而由于只能靠注射使用,这种方法上的局限性限制了其在动物生产中的应用.为此,本研究通过化学方法对cAMP的结构进行改造,在其分子中加入两个丁酰基,制备了dbcAMP.dbcAMP由于具有亲脂性,对酸碱较稳定,可口服被消化道吸收通过细胞膜在细胞内发挥作用.本研究旨在检测其在消化道吸收的特性,为在饲料中添加使用提供试验依据.

GDNF及dbcAMP对神经干细胞诱导分化为多巴胺能神经元作用的实验研究

目的 利用GDNF及dbcAMP对大鼠胚胎神经干细胞进行定向分化,从而获得相当数量的多巴胺能细胞,为下一步的细胞移植打下基础。方法 分离培养孕14~16 d Wistar大鼠大脑神经干细胞,通过传代培养来检测其自我更新能力,并对其进行Nestin及Brdu蛋白鉴定,利用GDNF及dbcAMP对大鼠神经干细胞进行定向分化,通过免疫细胞化学及免疫荧光等方法检测TH阳性细胞表达。结果 培养的神经干细胞均表达Nestin及Brdu,体外培养1 w后神经球的数量显著增加,体积增大;GDNF及dbcAMP均能提高TH表达,与血清对照组比较有显著差异（P〈0.05）。结论 在神经营养因子的作用下,分离的神经干细胞能够快速增殖并形成神经球,GDNF及dbcAMP均有诱导神经干细胞向多巴胺能神经元分化的作用,其中GDNF在20μg/L时诱导效能最高,dbcAMP在200μmol/L时诱导效能最高,二者均存在剂量依赖性,二者联合诱导可明显提高各自单独诱导TH细胞的阳性率。

二丁酰环腺苷酸(dbcAMP)对猪生长及糖代谢的调控

通过皮下注射和饲料添加不同剂量二丁酰环腺苷酸 (dbc AMP)进行饲养试验 ,研究其对猪生长和糖代谢调控的效果。结果表明 :皮下注射 1.0 mg/kg和饲料添加 2 0 m g/kg为最佳调控剂量 ,在生长猪阶段 ,日增重分别提高13.6 1%和 15 .4 1% (P<0 .0 5 ) ;料重比分别降低 18.81%和 19.10 % (P<0 .0 5 ) ;在肥育猪阶段日增重和料重比差异不显著 (P >0 .0 5 )。肥育猪肝糖原含量分别降低 2 7.32 %和 2 7.18% (P<0 .0 5 ) ;肌糖原含量分别降低 2 8.79%和31.79% (P<0 .0 5 )。血糖含量在生长猪和肥育猪阶段都明显提高 (P<0 .0 5 )。证明 dbc AMP对猪的生长性能和糖代谢有明显调控作用。

dbcAMP通过Cdc25B蛋白调控小鼠1-细胞期受精卵发育

为了研究PKA激活剂dbcAMP通过调控小鼠Cdc25B蛋白S149和S321位点磷酸化状态影响小鼠1-细胞期受精卵的发育,将质粒pBSK-Cdc25B-WT、pBSK-Cdc25B-S149A、pBSK-Cdc25B-S321A和pBSK-Cdc25B-S149A/S321A体外转录成mRNA;显微注射入S期受精卵中,在2 mmol/LdbcAMP的M16培养基中培养,观察其对受精卵发育、MPF活性及CDC2-pTyr15磷酸化状态的影响.结果显示,在有dbcAMP存在时,各组受精卵卵裂时间延迟,但Cdc25B-S/A-mRNAs注射组受精卵卵裂率明显高于Cdc25B-WT-mRNA注射组,MPF活性提前达到高峰;CDC2-pTyr15磷酸化状态和MPF活性变化相一致.因此,在小鼠1-细胞期受精卵有丝分裂过程中,PKA对小鼠Cdc25B蛋白S149位点与S321位点的磷酸化修饰是控制受精卵G2/M转换的重要方式.

dbcAMP-Ca对内囊出血并应激性胃溃疡大鼠血浆和胃组织中PACAP的影响

目的探讨二丁酰环腺苷酸(dbcAMP-Ca)对大鼠内囊出血合并应激性胃溃疡的治疗作用及机制。方法用放射免疫分析(RIA)方法测定内囊出血大鼠dbcAMP-Ca治疗前后血浆及胃组织匀浆中垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)含量的变化。结果内囊出血时血浆PACAP明显高于对照组(P<0.01),胃组织匀浆中PACAP明显低于对照组(P<0.01);而用dbcAMP-Ca治疗后血浆PACAP明显低于内囊出血组(出血组)(P<0.01),胃组织匀浆中PACAP高于出血组(P<0.01)。结论血浆及胃组织匀浆中PACAP可能是参与内囊出血后应激性胃溃疡发生过程中的一个重要因素,dbcAMP-Ca对大鼠内囊出血并应激性胃溃疡有治疗作用。

dBcAMP通过上皮生长因子受体间接激活诱导星形胶质细胞形态变化

目的探讨双丁酰环腺甘酸(dBcAMP)诱导星形胶质细胞形态变化的信号传导通路。方法原代培养星形胶质细胞,采用免疫细胞化学技术检测dBcAMP诱导的星形胶质细胞形态变化,并应用特定抑制剂进一步探讨其形态变化的信号传导机制。结果金属蛋白酶和上皮生长因子受体参与dBcAMP诱导的星形胶质细胞形态变化。结论 dBcAMP诱导的星形胶质细胞形态变化是通过上皮生长因子受体间接激活介导完成的。

DbcAMP-Ca对育肥期肉牛生长性能和血清生化指标的影响

为探究二丁酰环磷腺苷钙(dibutyryl cyclic adenosine monophosphate-calcium,DbcAMP-Ca)对育肥期肉牛生长性能、血清生化指标、体液免疫和氨基酸代谢的影响,随机选取12月龄体质量相近的健康西门塔尔肉牛14头分为对照组和试验组,试验组每4 d肌肉注射0.2 mg/kg的DbcAMP-Ca,对照组在同一时间内注射0.2 mg/kg的0.9%生理盐水。每次注射DbcAMP-Ca之前采集血液样本,试验期32 d。结果显示:(1)试验组平均日增重极显著高于对照组(P<0.01),料重比显著降低(P<0.05)。(2)试验组血清IgG含量第8,20,24天显著高于对照组(P<0.05),第28,32天极显著升高(P<0.01);血清IgM含量第20天显著高于对照组(P<0.05),第32天极显著升高(P<0.01);血清IgA平均浓度有趋势性升高,但差异不显著。(3)试验组肉牛血清BUN浓度第16,20天显著降低(P<0.05),在第28,32天极显著降低(P<0.01);血清TP浓度第12,16,20天显著高于对照组(P<0.05),第24,28,32天极显著升高(P<0.01)。(4)试验组血清Gly、Ser浓度第24天显著低于对照组(P<0.05),第32天的血清Gly、Ser以及第24,32天血清Asp浓度极显著降低(P<0.01);试验组血清Ile、Trp浓度第16天显著高于对照组(P<0.05),血清Ile、Trp和Thr浓度第24,32天极显著升高(P<0.01);血清Val浓度第8天显著高于对照组(P<0.05),血清Val在第16,24,32天以及血清Phe第8,16,24,32天极显著升高(P<0.01)。综上表明,补充适量的DbcAMP-Ca在一定程度上能促进育肥期肉牛的生长性能,增强肉牛的体液免疫以及改善蛋白质和氨基酸代谢。

Nicardipine inhibits N-type calcium channels in dbcAMP-diferentiated neuroblastoma×glioma hybrid cels(NG 108-15 ceLls)

ＩＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＮＤｉｈｙｄｒｏｐｙｒｉｄｉｎｅｓｈａｖｅｌｏｎｇｂｅｅｎｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄｔｏｂｅａｇｒｏｕｐｏｆｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓｏｆＬｔｙｐｅｖｏｌｔａｇｅｓｅｎｓｉｔｉｖｅＣａ２＋ｃｈａｎｎｅｌｓ（ＶＳＣＣ）．Ｒｅｃｅｎｔｌｙ，...

猪卵母细胞在不同培养液中成熟后的发育潜力

目的 优化猪胚胎体外生产培养系统。方法 将猪卵母细胞在不同培养液中行体外成熟、体外受精 ,比较成熟率和卵裂率。结果 促性腺激素明显提高猪卵母细胞成熟率 ,其中以 15IU/mlFSH +3 0IU/mlLH成熟率、卵裂率最高 ,分别为 62 %和 15 %。M199和NCSU 2 3基础培养液中的成熟率相近 ,但二者的卵裂率差异显著 ( 15 7%vs 3 6% ) ;两种基础培养液中添加 15 0 μmol/L半胱氨酸后 ,仅M199培养液中出现促卵裂效应 (P <0 0 5 ) ;添加 1mmol/LdbcAMP后 ,卵母细胞的GVBD被阻止 ,去除dbcAMP后继续培养 2 2h ,实验组的成熟率和卵裂率分别为 76 1%～ 83 3 %和 43 9%～ 5 2 9%率 ,显著高于基础液组和半胱氨酸单独添加组。结论 促性腺激素是猪卵细胞体外成熟的重要调节因子 ;dbcAMP通过调节卵体外成熟动力学 ,促卵母细胞分裂同步化 。

双丁酰环腺苷酸对甲状腺鳞癌SW579细胞株增殖的影响

目的:探讨双丁酰环腺苷酸(dbcAMP)对甲状腺鳞癌SW579细胞株增殖的影响。方法:将dbcAMP0.5、1.0、2.0mmol/L作用于甲状腺鳞癌SW579细胞24h后,用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法检测SW579细胞增殖的变化;经dbcAMP0.5mmol/L作用24h后,ELISA法检测细胞成熟促进因子(MPF)的活性,WesternBlot方法检测cdc2-Tyr15磷酸化水平,流式细胞术检测细胞周期变化情况。结果:与对照组相比,经不同浓度dbcAMP处理的SW579细胞株的增殖均受抑制。在0.5mmol/LdbcAMP作用下24h,SW579细胞MPF活性为(22.87±2.57)ng/L,远小于对照组的(115.50±7.53)ng/L,差异有统计学意义(t=3.324,P<0.05)。实验组cdc2-pTyr15磷酸化水平(0.258±0.026)高于对照组的(0.142±0.009),差异有统计学意义(t=7.424,P<0.05)。与对照组相比,应用0.5mmol/LdbcAMP处理细胞之后,G0/G1期无显著变化,S期细胞数量减少,G2/M显著增多。结论:dbcAMP能够显著降低甲状腺鳞癌SW579细胞株的活力,使细胞增殖受到明显抑制。

猪不同直径卵泡中卵母细胞体外培养的成熟潜力

比较研究了猪卵巢表面直径 0 .5～ 1 mm、1～ 2 mm、2～ 6mm、>6mm卵泡中卵母细胞所处的生发泡阶段。结果表明 ,0 .5～ 1 mm卵泡中卵母细胞主要处于 GV- 期和 GV- 期 2个阶段 ,比例分别为 67.2 %和2 0 .6%;而 1～ 2 mm和 2～ 6mm直径卵泡中 ,卵母细胞大部分则处于 GV- 期 ,比例分别为 91 .9%和89.6%;>6mm直径卵泡中 ,卵母细胞逐渐发生老化 ,GV- 期比例仅为 53 .2 %,一部分处于 GV- 期和GVBD期。体外培养试验表明 ,1～ 2 mm卵泡中卵母细胞的体外成熟率比较低 ,其中一部分卵母细胞不能发生 GVBD( 2 5.1 %) ,另有一部分卵母细胞 ( 3 9.8%)达到第 1次减数分裂中期后 ,不能继续向前发育。培养 0～ 2 0 h时 ,添加 1 mmol/ L dbc AMP,能够显著抑制 1～ 2 mm和 2～ 6mm直径卵泡中卵母细胞发生 GVBD。培养 2 0 h后 ,去除 dbc AMP,显著增加了培养到 4 4h阶段的 M- 期比率。 dbc AMP主要是降低了培养 4 4h阶段 GV期阻滞的比率 ,而对 M- 期阻滞的比例没有影响。因此 ,dbc

双丁酰环腺苷酸抑制甲状腺癌细胞株FTC-133增殖

目的探讨双丁酰环腺苷酸(dbcAMP)对甲状腺癌细胞株FTC-133增殖的影响。方法将FTC-133细胞进行常规培养,分为对照组,处理组(dbcAMP 0.5、1.0、2.0mmol/L)共4组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、生长曲线法观察0.5、1.0、2.0mmol/L dbcAMP经24h、48h对甲状腺癌细胞株FTC-133细胞增殖能力的影响,流式细胞术检测细胞周期的变化情况,使用反转录定量PCR(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹实验(Western Blotting)方法检测Raf1的mRNA和蛋白表达水平。结果与对照组比较,不同浓度dbcAMP和时间处理的FTC-133细胞增殖均受抑制,并表现出时间-剂量依赖性;S期细胞显著减少,G2/M期细胞显著增加;Raf1mRNA和蛋白水平明显减低。结论 dbcAMP显著降低甲状腺癌细胞株FTC-133的增殖能力,促进凋亡,可能与激活ERK MAPK通路有关。

cAMP类似物对人肺癌细胞生长抑制及诱导分化作用

目的 研究 2种cAMP类似物 ,DBcAMP (无位点选择性 )和 8-Cl -cAMP (位点选择性 )对高转移人肺癌细胞系PGCC细胞生长及分化的调控作用。方法 采用MTT法、Boydern小室法和软琼脂集落形成实验检测PGCC细胞体外生长、浸润及集落形成能力 ,观察用药后PGCC细胞形态、神经特异性烯醇化酶 (NSE)和嗜铬素的表达。结果 DBcAMP 1mmol/L处理第 8天 ,对PGCC细胞生长的抑制率为 30 % ,8-Cl -cAMP抑制率为 75 %～ 80 % ,磷酸二酯酶抑制剂IBMX与 8-Cl -cAMP合用没有增加其抑制作用 ,而与DBcAMP合用则有明显协同作用。 2种药物处理后 ,PGCC细胞浸润及集落形成能力均降低 ,且 8-Cl -cAMP的作用强于DBcAMP。光镜见处理细胞突起伸长或增多。结论 8-Cl -cAMP和DBcAMP可能通过不同的机理抑制PGCC细胞的生长和浸润 ,具有PKAⅡ位点特异性的cAMP类似物 ,8-Cl -cAMP是 1个新的有效的肿瘤抑制剂。

双丁酰环腺苷酸诱导的肺巨细胞癌细胞免疫细胞化学和电镜观察

应用细胞培养、免疫细胞化学和电镜技术，观察了双丁酰环腺苷酸（ＤＢｃＡＭＰ）诱导下肺巨细胞癌细胞系（ＰＧ）的生物学标记的改变。结果：经ＤＢｃＡＭＰ处理６天后，ＰＧ细胞的神经元特异性烯醇化酶（ＮＳＥ）和嗜铬素表达增强，电镜下可见神经内分泌样颗粒。结果提示：ＰＧ细胞在ＤＢｃＡＭＰ诱导下有向神经内分泌方向分化的倾向。